氯沙坦对阿霉素肾病大鼠肾脏保护作用的研究

1、氯沙坦对阿霉素肾病大鼠肾脏保护作用的研究血管紧张素型受体拮抗剂(Angitensintypereeptrantagnist，AT1RA)具有降压效果，可以延缓肾脏疾病动物模型肾脏损伤进展，应用于临床延缓肾功能不全进展的治疗中1,2。氯沙坦(Lsartan，ARB)是临床用于延缓肾功能不全进展的血管紧张素型受体拮抗剂，具有良好的疗效，但其对肾脏保护作用的详细机制尚不完全清楚。阿霉素肾病大鼠肾脏组织损伤的演变过程与人类肾脏病肾损害的慢性病理过程相似，本研究建立阿霉素肾病大鼠动物模型，观察给予氯沙坦干预后大鼠肾组织氧化抗氧化成分变化及对RAS系统中AT1、AT2、AE及AGT基因表达变化，讨论其对肾

2、脏的保护作用。1材料与方法1.1动物安康清洁级近交系雌性istar大鼠，48只，3月龄，体重(18020)g，(由吉林大学医学动物繁育中心提供)，适应性喂养1。随机分为对照组、肾衰组、氯沙坦组，每组16只。1.2方法1.2.1试剂与仪器Trizl(购自美国Invitrgen公司)，逆转录酶(购自大连宝生物工程公司)，2PRix(购自北京天根公司)，阿霉素(购自美国Siga公司)，氯沙坦(购自杭州默沙东制药公司)，DA、SD检测试剂盒(购自南京成生物工程研究所)，全自动生化分析仪(购自日本lypus公司)，引物由大连宝生物工程公司合成。1.2.2模型制备肾衰组和氯沙坦组腹腔注射阿霉素，每次4g/

3、kg，每周1次，持续5，出现大量蛋白尿提示肾病动物模型制备成功。对照组注射一样体积生理盐水，持续5。1.2.3给药方法造模成功后，氯沙坦组大鼠给予氯沙坦1.2g/只灌胃，1次/d;肾衰组给予同等量生理盐水灌胃，1次/d。所有动物均连续给药2，于治疗完毕后，在腹腔麻醉下取双肾冻存于液氮。1.2.4检测指标处死动物，搜集血液，别离血清，3000r/in离心15in，保存于-20冰箱待测。血清尿素氮(BUN)、肌酐(r)含量(l/L)采用生化分析方法检测，均用lypulsAU640型全自动生化分析仪测定。取肾组织液氮研磨匀浆，3000r/in离心10in，取上清，用黄嘌呤氧化酶法测定肾组织SD活性，

4、用硫代巴比妥酸法测定肾组织DA含量，并用蛋白含量校正。1.3统计学处理方法采用SPSS11.0软件分析。计量资料实验数据以xs表示，单变量配对资料之间的比拟采用配对样本t检验。转贴于论文联盟.ll.2结果2.1血清尿素氮(BUN)、肌酐(r)含量变化与对照组比拟，肾衰组血清BUN明显增加(P0.05)，氯沙坦组那么明显低于肾衰组(P0.05);肾衰组血清r明显增加(P0.05)，氯沙坦组那么明显低于肾衰组(P0.05)。见表1。表1血清BUN、r的含量与对照组比拟：1)P0.05，与肾衰组比拟：2)P0.05，下表同2.2肾皮质DA、SD含量变化与对照组比拟，肾衰组大鼠肾皮质DA含量明显增加(

5、P0.05)，氯沙坦组那么明显低于肾衰组(P0.05);肾衰组大鼠肾皮质SD含量明显增加(P0.05)，氯沙坦组那么明显低于肾衰组(P0.05)。见表2。2.3肾组织中肾组织AT1、AT2、AE、AGTRNA的表达肾衰组肾脏AT1表达上调，AT2降低，氯沙坦组转为AT1下调，AT2表达接近对照组程度;血管紧张素转化酶(AE)在肾衰时表达上调，给予氯沙坦后降低，但仍高于对照组程度;与对照组比拟，肾衰模型血管紧张素原(AGT)程度增高，而给予氯沙坦后其程度降低。见图1，表3。表2肾皮质DA、SD的含量表3肾组织AT1、AT2、AE、AGTRNA表达比拟3讨论AT1RA类药物(angitensinr

6、eeptrblker)是临床最常用、疗效确切能延缓肾功能不全进展的一类药物，其作用机制是抑制Ang与其受体结合，降低循环血压和肾小球内压3。血中BUN、r程度在一定程度上可反映肾小球的滤过功能。本研究显示，肾衰大鼠肾小球滤过功能严重下降，而进展氯沙坦干预治疗可以改善肾小球滤过功能，延缓肾功能不全的进展，具有肾脏保护作用。氯沙坦是一种非肽类口服药，可以特异性阻断Ang和AT1受体的结合，近年来氯沙坦在治疗高血压、心力衰竭、心肌缺血、糖尿病肾病和改善胰岛素抵抗等方面应用较多。在RAS系统中，血管紧张素原(AGT)通过肾素转变成血管紧张素(Ang)，Ang通过血管紧张素转化酶(AE)的酶解作用生成血

7、管紧张素(Ang)，是RAS主要活性肽4。Ang可作用于血管紧张素受体AT1和AT2，是肾损伤中重要的调节因子。研究证实，Ang主要通过激活NADPH氧化酶和增加线粒体内RS来刺激细胞内RS的生成5,6。本研究显示，脂质过氧化反响参与了大鼠阿霉素肾病病理过程，且机体抗氧化才能减退，而氯沙坦可通过改善肾病机体氧化应激状况发挥肾脏保护作用。本研究发现，肾衰组肾脏AGT、AE程度升高，AT1表达增高，AT2降低，氯沙坦组转为AT1下调，AT2表达接近对照组程度。提示肾损伤时，由于AGT、AE程度增高，增高的AGT在AE作用下可大量生成Ang;同时，由于AT1程度升高，Ang与AT1结合通过其缩血管作用影响肾脏血流动力学，促进肾脏病的进展，也经其诱导单核细胞活化、促进巨噬细胞和血管平滑肌细胞分泌炎症介质加重细胞损伤，肾脏一些炎症表现主要与AT1程度升高或活性增强有关7,8。由于AT2主要抑制细胞生长、分化，并介导血管扩张，因此肾衰时AT2下调使其功能减弱，可经减少肾血流方式促进了肾组织损伤，二者表达失衡可能在肾损伤的发病机制和靶器官的损害过程中发挥重要作用。氯沙坦可竞争性抑制Ang与其受体结合，且主要与AT1结合，阻断Ang引起的血管收缩、交感兴奋、醛固