实验十人类染色体核型分析

1、关于实验十人类染色体核型分析第1页，共11页，2022年，5月20日，22点12分，星期三实验目的： 1、了解人类外周血淋巴细胞的培养和染色 体标本的制备方法 2、了解人类染色体的形态和分组特征，学 习染色体组型分析方法实验内容与原理： 1、人类染色体标本制作简介 人类外周血淋巴细胞的培养及染色体标本制作技术 淋巴细胞G0期或G1期 1960年Nowell和Morhead 植物血凝素(Phytohemagglutinin,PHA)第2页，共11页，2022年，5月20日，22点12分，星期三 外周血淋巴细胞的培养和染色体标本制作的步骤： 培养液的分装： 培养液：RPMI1640或M199、小牛

2、血清、PHA、 肝素、双抗（青霉素、链霉素） 采血：静脉采血 培养：37培养6672h 秋水仙素处理：秋水仙素分裂阻止剂 低渗处理：使红细胞破碎，白细胞膨胀 离心：收集白细胞 固定：固定液甲醇：冰醋酸=3：1 离心、再固定： 再离心：弃上清，留白细胞 制片： 第3页，共11页，2022年，5月20日，22点12分，星期三 染色：Giemsa染液 镜检： 封片： 显微摄影进行核型分析 2、人类染色体组型分析 *核型（karyotype) *组型 (idiogram) *染色体组型分析 （1）染色体的数目 人类染色体2n=46 核型：正常男性 46，XY 正常女性 46，XX 第4页，共11页，2

3、022年，5月20日，22点12分，星期三 人类染色体按其形态大小分7组：A、B、 C(X)、D、 E、F、 G(Y)，其主要特点和鉴别要求如下： 组 别编号 形态 大小 着 丝 粒 位 置 随体 鉴 别 要 求 A13最大1、3中部2近中无要求明确区分各号 B45次大近中无要求不与其他组相混 C612中等近中无要求6、7、8不与其他混 D1315中等近端有要求不与其他组相混 E1618较小16中17、18近中无要求明确区分各号 F1920小中部无要求不与其他组相混 G2122最小近端有要求21、22与Y区分第5页，共11页，2022年，5月20日，22点12分，星期三第6页，共11页，202

4、2年，5月20日，22点12分，星期三第7页，共11页，2022年，5月20日，22点12分，星期三 染色体的排列规则： 染色体的大小，大小 着丝粒位置，中部端部 （2）染色体的长度及着丝粒位置 1 m：微型染色体 14 m ：小型染色体 412 m ：中型染色体 12 m ：大型染色体 相对长度: 第8页，共11页，2022年，5月20日，22点12分，星期三 臂率: 1.011.70 中部着丝粒染色体m 1.713.00 近中着丝粒染色体sm 3.017.00 近端着丝粒染色体st 7.01 端部着丝粒染色体t 着丝粒指数 （3）随体及次缢痕的有无第9页，共11页，2022年，5月20日，22点12分，星期三实验材料与用具： *人类染色体照片（复印） *剪刀、胶水、组型分析报告纸实验步骤： 1、染色体分组编号 了解各染色体的特点 一个照片作对照，另一分组编号用 2、核对、调整、粘贴 着丝粒在横线上，p在上q在下 3、分析结果作业： 第