DNA的粗提取与鉴定生物选修一知识点考点

1、DNA的粗提取与鉴定生物选修一知识点考点 高中生物学学问往往环环相扣，上一个学问的学习就是为下一个学问的学习奠定理论和学问基础，下面是小偏整理的DNA的粗提取与鉴定生物选修一学问点考点，感谢您的每一次阅读。 DNA的粗提取与鉴定生物选修一学问点考点 提取DNA的溶解性原理包括DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精。 DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度的特点：在0.14mol/L时溶解度最小;要使DNA溶解，需要较高浓度?要使DNA析出，又需要0.14mol/L的浓度? 在溶解细胞中的DNA时，人们通常选用2mol/LNaCl溶液;将DNA分子析出的方法是向溶有DNA的Na

2、Cl溶液中缓慢注入蒸馏水，以稀释NaCl溶液。酒精是一种常用有机溶剂，但DNA却不能溶于酒精(特殊是95%冷却酒精)，但细胞中蛋白质可溶于酒精。 从理论上分析，预冷的乙醇溶液具有以下优点。一是抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解;二是降低分子运动，易于形成沉淀析出;三是低温有利于增加DNA分子柔韧性，削减断裂。 采纳DNA不溶于酒精的原理，可以达到的目的是：将DNA和蛋白质进一步分别。 提取DNA还可以利用DNA对酶、高温柔洗涤剂的耐受性原理。利用该原理时，应选用蛋白酶，由于酶具有专一性，蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响。温度值为6080，由于该温度值蛋白质变性沉淀，而DNA不会变性。

3、补充：DNA的变性是指DNA分子在高温下解螺旋，其温度在80以上，如在PCR技术中DNA变性温度在95。 当鉴定提取出的物质是否是DNA时，需要使用什么指示剂进行鉴定? 答：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺呈现蓝色。 原理总结：通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出DNA，可以从细胞中提取和提纯DNA;再利用酒精进一步将DNA与蛋白质分别开来，达到提纯的目的;最终利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是DNA。 试验材料的选取： 不同生物的组织中DNA含量不同。在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。 本试验用鸡血细胞做试验材料有两个缘由。一是由于鸡血细胞核的DNA含量丰富，材料易

4、得;二是鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作试验材料经常需要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长。 鸡血细胞破裂以后释放出的DNA，简单被玻璃容器吸附，所以在提取过程中为了削减DNA的损失，最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液。 破裂细胞，猎取含DNA的滤液： 若选用鸡血和洋葱作试验材料，则怎样猎取含DNA的滤液? 答：在鸡血细胞液中加入肯定量蒸馏水并用玻棒搅拌，过滤后收集滤液;切碎洋葱，加入肯定量洗涤剂和食盐，搅拌研磨，过滤后收集滤液。 为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞裂开? 答：蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂，再加上搅拌的机械作用，

5、就加速了鸡血细胞的裂开(细胞膜和核膜的裂开)，从而释放出DNA。 在以上试验中，加入蒸馏水、洗涤剂和食盐的作用分别是什么? 答：过滤时应当选用(滤纸、尼龙布)。血细胞在蒸馏水中大量吸水而张裂;洗涤剂瓦解细胞膜;食盐溶解DNA物质;选用尼龙布进行过滤。 在处理植物组织时需要进行研磨，其目的是什么?研磨不充分产生什么结果? 答：破裂细胞壁，使核物质简单溶解在NaCl溶液中;研磨不充分会使DNA的提取量削减，影响试验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。详细做法。10mL鸡血+20mL蒸馏水同方向搅拌3层尼龙布过滤滤液。 为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质? 答：用高盐浓度的

6、溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。 最初获得的DNA滤液含有蛋白质、脂质等杂质，需要进一步提纯DNA。 方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同; 方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA; 方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。 方案二与方案三的原理有什么不同? 答：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开;方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分别。 析出与鉴定： 在滤液中

7、仍旧含有一些杂质，怎样除去这些杂质呢?得到的DNA呈何颜色? 答：滤液与等体积的冷却酒精混合匀称，静置23分钟，析出的白色丝状物就是DNA。DNA呈白色。 怎样鉴定析出的白色丝状物就是DNA呢? 答：详细做法：试管2支，编号甲乙各加等量5mLNaCl溶液甲中放入少量白色丝状物，使之溶解各加4mL二苯胺，混合匀称沸水浴5min观看颜色变化。 试验操作： 制备鸡血细胞液：加柠檬酸钠，静置或离心 破裂细胞，释放DNA：加蒸馏水，同一方向快速通方向搅拌过滤，除去细胞壁、细胞膜等。 溶解核内DNA：加入NaCl至2mol/L，同一方向缓慢搅拌 DNA析出：加蒸馏水至0.14mol/L，过滤，在溶解到2m

8、ol/L溶液中除去细胞质中的大部分物质。 DNA初步纯化：与等体积95%冷却酒精混合，析出白色丝状物除去核蛋白、RNA、多糖等。 DNA鉴定：二苯胺，沸水浴，呈现蓝色 留意事项：在鸡血中加入柠檬酸钠防止凝固;鸡血静置或离心以提高细胞悬液浓度;使用塑料烧杯;使用尼龙布过滤;玻棒沿同一方向搅拌;玻棒搅拌要缓慢(细胞裂开快速搅拌);玻棒不要遇到烧杯壁;二苯胺试剂要现用现配等。 思维导图在高中生物教学中的详细应用 1.思维导图在新授课中的应用 思维导图的应用，不仅能优化教学内容，还能提高教学效率，让同学的学习有的放矢，削减学习的盲目性。因此，在新授课的课堂导入环节中，老师可借助思维导图构建学问之间的联

9、系，让同学明确生物学习的内容以及学习的目的，从而引起同学对生物学习的重视。例如，在细胞的物质输入和输出的新授课中，为了让同学对本章内容有所了解，老师预先借助绘图软件绘制了思维导图，将完整的学问脉络呈现给同学。以“细胞的物质输入和输出”为一级主题，进行学问点之间的发散构建，二级主题包括物质跨膜运输的实例、生物膜的流淌镶嵌模型、物质跨膜运输的方式，也就是生物课程中每节的主题内容。接下来，连续以二级主题为核心进行三级主题的拓展物质跨膜运输的实例包括细胞的吸水和失水、物质跨膜运动的其他实例、选择透过性膜;生物膜的流淌镶嵌模型包括对生物膜结构的探究历程、流淌镶嵌模型基本内容;物质跨膜运输的方式包括小分子

10、物质或离子跨膜运输方式、大分子物质或颗粒状物质进出细胞的方式。这些是在教学内容的基础上进行的规律构建。此外，老师还要把学习本章的意义和功能、学习的方法等同作为一级标题与之并列，让同学在学习前对本章的内容、学习方法和重要性有充分的熟悉，为同学接下来的学习奠定基础。 2.思维导图在复习课中的应用 高中生物学学问往往环环相扣，上一个学问的学习就是为下一个学问的学习奠定理论和学问基础，强调同学学习思维的规律性，这就需要老师在教学中构建学问网络构图。对此，老师可通过手工方式来绘制思维导图，并在教学中进行应用，尤其是在复习课中进行应用，这样不仅能提高复习效率，还能减轻同学的学习负担。例如，老师在组织同学复

11、习高中生物内容时，可以第一、二章走近细胞组成细胞的分子为单位，第三、四章(细胞的基本结构细胞的物质输入和输出)为单位等进行思维导图的绘制。老师在绘制思维导图的整个过程中要与同学一起共同完成，让同学跟着老师的思维完成学问网络的构建，将同学头脑中零散的学问点整合起来。细胞是生命的基本单位，这是第一章的主要内容，老师在绘制思维导图时要以此为起点引导同学对细胞种类、细胞生命的意义等学问点进行回顾，并由此引出细胞的组成结构;而对组成细胞的成分：元素和化合物、蛋白质、核酸、糖类和脂类、无机物等学问点的介绍，应由同学来完成。绘制思维导图的过程即同学复习学问的过程，也是查缺补漏的过程。 3.思维导图在同学笔记中的应用 俗话说：“好记性不如烂笔头。”记笔记是高中生普遍应用的一种学习方式，但记笔记往往会演化成抄老师的板书，许多时候同学急于跟上老师的节奏而快速记录，根本不知道自己写的是什么，失去了记笔记的意