临床检验定性方法学评价

1、临床检验定性方法学评价第1页，共27页。医学实验室认可的相关文件CNAS-CL02医学实验室质量与能力认可准则；CNAS-CL27医学实验室质量与能力认可准则在临床血液学检验领域的应用说明； CNAS-CL29医学实验室质量与能力认可准则在临床化学检验领域的应用说明CNAS-CL30医学实验室质量与能力认可准则在临床免疫检验领域的应用说明第2页，共27页。实验室认可对方法学验证的要求CNAS-CL29:2007第3页，共27页。检测限与可报告范围可被检测系统检测出的被测量最低浓度称为检测限（limit of detection，LoD），有时也称检测低限（lower limit of dete

2、ction）或最小检出浓度（minimum detectable concentration）。测量范围（measuring range）表明测量系统的误差处于规定的极限内（如CV=10%）时，被测量值分布的高、低界限值间的范围，又称工作范围（working range）。第4页，共27页。可报告范围reportable range在方法学规定的性能条件下，检测结果的最大范围。例：CK测定测量范围：20-1000 U/L可报告范围：20-5000 U/L（血清稀释，CV20%）第5页，共27页。临床对“准确性”的要求实验室提供的检验结果或数据，应有助于临床医生进行疾病诊断、疗效评估和预后判断。

3、一个可以实现计量学“准确”测量的方法，不一定能满足临床医生的实际工作需要。除了具有计量学准确性外，实验室还应对检验方法进行医学或临床准确性评价 第6页，共27页。定性实验（qualitative tests）仅给出阳性或阴性（是或非）的实验结果。特点：使用简便、低成本、操作过程规范或能满足使用者的特殊要求。评价：使用病人样本进行重复性实验和方法比较是非常重要的内容。第7页，共27页。定性实验的临床应用在临床实验室中，定性试验可用于筛查、诊断、确认、或监测为目的的测定。试验的敏感性、特异性、预测值和效率等，决定了其在临床应用的范围。从临床应用的角度讲，定性实验可分为筛查实验、诊断实验和确认实验。

4、第8页，共27页。筛查实验（screening tests）筛查实验通常用于对整个人群或特定人群中是否存在初测物的检查，如：大便潜血实验。通常要求检验方法有较高的敏感性，以保证不漏掉真阳性结果。一般情况下，筛查实验可能产生假阳性结果，但在有较好的确认实验及不会带来严重后果的前提下，还是很有益处的。 第9页，共27页。诊断实验（diagnostic tests）定性实验用于特定疾病的诊断或临床可疑指征的判断，如微生物学培养与细菌鉴定。通常情况下，诊断性实验要求方法学同时具有较好的敏感性和特异性。在有确认实验的条件下，可以适当放宽对方法学特异性的要求。第10页，共27页。确认实验（confirma

5、tory tests）确认实验通常在筛查实验和诊断实验之后进行，对已做出的检验结果进行验证和确认，以帮助临床医生做出正确的临床诊断。确认实验一般设计为有较好的特异性和较高的阳性预测值，如使用荧光密螺旋体抗体吸收实验（FTA-ABS）作为梅毒初筛实验的确认实验。第11页，共27页。临界值（cutoff）实验结果处于（阴、阳性）分界点时的样本中分析物浓度值；低于此值，定性实验的结果为阴性；高于此值，定性实验的结果为阳性。对定性实验来讲，临界值是唯一的医学决定水平.第12页，共27页。临界值（cutoff）当样本中被测物浓度处于临界水平时，定性实验重复检查同一样本，将产生50%的阳性结果和50%的阴

6、性结果。当样本浓度在临界值以上增加时，阳性结果比率增加；而当样本浓度在临界值以下减低时，阴性结果比率增加。第13页，共27页。临界值的95%区间当样本浓度高于临界值时，重复实验产生95%阳性结果；当样本浓度低于临界值时，重复实验产生95%阴性结果；之间的样本浓度范围。 第14页，共27页。定性实验重复性评价 确立方法的临界值 ；在临界值基础上准备出-20%浓度的样本和+20%浓度的样本 ；对以上低、高浓度样本分别测定20次，记录阴性及阳性结果数； 第15页，共27页。确定Cut-off value当实验结果表明“临界值”样本的阴性结果和阳性结果不是各占50%时，原因可能是：被评估的临界值浓度不

7、准确、或结果数据不充足、或方法学剂量反应曲线在临界值处是非线性的 第16页，共27页。Cut-off 95%区间当实验结果表明+20%浓度的样本产生阳性结果数95%，同时，-20%浓度的样本产生阴性结果数95%，说明临界值20%浓度范围等于或超出临界值的95%区间，对于被测物浓度在20%浓度范围以外的样本，实验方法将给出稳定的结果。当阳性和/或阴性结果数95%时，应另外准备不同浓度的实验样本，重新进行评价。 第17页，共27页。方法学比较样本种类和数量：最好使用常规病人的新鲜样本，样本量应保证评价实验方法和比较方法测定的需要。样本中被测物应稳定，应尽可能用评价方法和对比方法同时完成测定。作为最

8、低要求，用对比方法测定的阴性和阳性样本数量，应分别在50例以上。 第18页，共27页。方法比较实验过程使用临床样本进行方法学对比研究应在10到20天内完成，保证足够的样本量，确保对实验方法的评价在常规实验条件下进行。 第19页，共27页。参考样本盘由一组临床样本组成，测定结果可与指定的参考方法或临床诊断相联系，参考样本盘通常包含不同浓度被测物的临床样本，可能时，还包括干扰物质。对评价定性实验方法是非常有效的。第20页，共27页。已知样本临床诊断结果 临床诊断总计阳性阴性评价方法阳性ABA+B阴性CDC+D总计A+CB+DN第21页，共27页。已知样本临床诊断结果方法敏感度 = 100%A/（A

9、+C）方法特异性 = 100%D/（B+D）相关样本的患病率 = 100%（A+C）/N阳性结果预测值（PVP） = 100%A/（A+B）阴性结果预测值 （PVN）= 100%D/（C+D）方法效率 = 100%（A+D）/N第22页，共27页。定性实验方法评价样本的临床诊断是未知的，实验方法只能与对比方法进行比较。由于对比方法的准确度并非100%，此情况下不能简单使用敏感性和特异性来描述方法学性能，应使用“符合率”对实验方法结果与对比方法结果的一致程度进行描述：第23页，共27页。样本的临床诊断未知对比方法总计阳性阴性实验方法阳性aba+b阴性cdc+d总计a+cb+dn第24页，共27页。样本的临床诊断未知阳性符合率 = 100% a/(a+c)阴性符合率 = 100% d/(b+d)总符合率 = 100% (a+d)/n第25页，共27页。HBsAg测定的Cutoff值ELISA方法：0.2-0.5 ng/m