纳洛酮对催产素所致小鼠记忆减退的影响

1、纳洛酮对催产素所致小鼠记忆减退的影响【摘要】目的观察侧脑室分别给予纳洛酮、催产素(xytin,T)对小鼠学习记忆的影响及阿片受体在T影响小鼠学习记忆中的作用。方法按分层随即区组设计将小鼠分成4组(n=7)：生理盐水组(NS组)、纳洛酮组(Nal组)、T组、Nal+T组。采用避暗实验分别测定给药后第1天、第2天小鼠的埋伏期及错误次数。结果用药后第2天，与NS组相比，T组错误次数增加(P0.01)，埋伏期缩短(P0.05);与T组相比：Nal+T组的错误次数减少(P0.05)，埋伏期差异无统计学意义(P0.05)。结论在本实验条件下，侧脑室微量注射T能损伤小鼠的记忆功能，而侧脑室给予阿片受体拮抗剂

2、纳洛酮后，逆转T所致的记忆损伤，提示T损害记忆的作用与阿片受体有关。【关键词】催产素;纳洛酮;避暗实验;记忆Abstrat：bjetiveTinvestigatetheeffetfnalxnerxytin(T)irinjetinintlateralerebralventrilentheeryinie,andtexplretherlefpiidreeptrintheeffetfTneryinie.ethdsTheieererandlydividedint4grups(n=7eah):nralsalinegrup(NSgrup),nalxneNalgrup,Tgrup,Nal+Tgrup.Thet

3、iesftheerrrsandtheduratinflatenyererespetivelyrerdednthefirstdayandthesenddayafterthedrugadinistratininstep-thrughtask.Resultsnthesendday,asparedttheNSgrup,thetiesferrrsinreased(P0.01)andtheduratinflatenydereased(P0.05)inthestep-thrughtaskintheTgrup;parediththeTgrup,thetiesferrrsdereased(P0.05)hilet

4、hereerensignifiantdifferenesintheduratinflateny(P0.05)inthestep-thrughtaskintheNal+Tgrup.nlusinUnderthisexperientnditins,irinjetinfTlateralerebralventrileuldipairtheeryinie.eanhile,nalxne,thepiidreeptrantagnist,uldreversetheeffetfT.therefre,thepiidreeptrediatedtheeffetsfTntheery.Keyrds:xytin;nalxne;

5、step-thrughtask;ery催产素(xytin，T)是一种九肽构成的激素，由下丘脑室旁核和视上核大细胞分泌后，经下丘脑-垂体束运送到神经垂体储存，当机体需要时由神经垂体释放到血液中。脑内许多部位有T受体，如：大脑皮质局部区域、基底神经核、边缘系统、背侧丘脑、下丘脑、脑干和脊髓。大量研究说明T除了参与与生育有关的一些行为外，还在复杂的社会行为和应激中发挥作用1。此外，T与学习记忆的关系亲密，侧脑室、海马、基底神经核或中缝背核微量注射T后，可通过影响记忆的稳固和读取过程而导致遗忘，因此被称为遗忘肽1-2。中枢内给予T可调节脑内阿片肽、多巴胺、五羟色胺和谷氨酸的释放。但是，T对小鼠学习记忆

6、的影响是否与阿片受体有关尚未见文献报道。本研究利用避暗实验，并通过预先侧脑室注射阿片受体的特异性拮抗药纳络酮(nalxne)，观察阿片受体是否参与T对小鼠记忆的影响。1材料和方法1.1实验动物昆明种小鼠，雌性，体重2025g，由徐州医学院实验动物中心提供。实验前2天使小鼠熟悉实验室环境，自由摄食饮水，每日固定时间进展实验。1.2主要试剂和仪器ZH-500型小鼠避暗仪(安徽淮北正华生物仪器设备)，实验装置清楚暗两室，两室之间有一直径为3大小的圆洞，两室底部均铺以铜栅，暗室接电。盐酸纳洛酮注射液(北京四环药业,批号20221207);T(上海禾丰制药,批号091204);2种药物均以生理盐水(NS

7、)稀释至所需浓度。1.3侧脑室微量注射将小鼠的头部固定，在小鼠两耳连线与双眼连线之间，在颅骨中线旁2处，用微量注射器垂直刺入2(预先将塑料套管在针尖固定)，给药容积为2.5l，在30s内完成注射，留针2in。1.4动物分组及处理按分层随即区组设计分组，使各组平均体重根本一样。小鼠分成4组(n=7)：NS组、纳洛酮(1g)组(Nal组)、T(5ng)组、Nal(1g)+T(5ng)组(Nal+T组)。各组小鼠均于训练前30in侧脑室给药，其中Nal+T组于训练前30in侧脑室给予纳洛酮后，再于训练前15in侧脑室微量注射T。每次侧脑室均注射2.5l。1.5避暗实验法训练时先将小鼠放入反响箱中适应

8、3in，再将暗室底铜栅通40V、50Hz交流电，最后将小鼠背对洞口放入明室，小鼠进入暗室即受电击。训练时记录第1次进入暗室的时间(步入埋伏期，step-thrughlateny，STL)，STL大于180s者弃去不用。记录5in内第1次进入暗室的时间(埋伏期)和进入次数(错误次数)作为根底成绩。假如5in时小鼠仍未进入暗室，错误次数记为0次，埋伏期记为300s。48h后再次将小鼠放入明室，记录5in内第1次进入暗室的时间(埋伏期)和进入次数(错误次数)。1.6统计学处理数据用s表示，采用SPSS13.0统计软件进展分析，多组间比拟采用完全随机设计方差分析法(ANVA)，两两比拟采用q检验。P0

9、.05为差异有统计学意义。转贴于论文联盟.ll.2结果如表1所示：在用药前各组小鼠的错误次数和埋伏期差异无统计学意义(P0.05)，说明各组小鼠根底智力相似。用药第1天，避暗实验中各组小鼠的错误次数和埋伏期差异均无统计学意义(P0.05);用药第2天与NS组相比，Nal组的埋伏期及错误次数无明显差异(P0.05)，而T组错误次数明显增加(P0.01)，埋伏期明显缩短(P0.05)，说明侧脑室微量注射1g纳洛酮对小鼠的学习记忆无明显影响，而侧脑室微量注射5ngT对小鼠的记忆有损伤。与T组相比，Nal+T组的错误次数明显减少(P0.05)，埋伏期有增加趋势，但差异无统计学意义(P0.05)，说明纳

10、洛酮可能逆转T所致的记忆损伤。表1纳洛酮对T所致小鼠记忆减退的影响(避暗法，n=7，s)3讨论在中枢神经系统内许多部位存在着T神经元、T纤维及其受体。T在中枢神经系统内发挥多种作用，如心血管功能的调节、体温调节、痛觉调制、对行为活动的影响等，T能明显消弱记忆过程，即消弱记忆的稳固、储存与回忆过程3-4。我们的实验结果再次证实了这一观点，我们观察到侧脑室微量注射T后，与NS组相比，小鼠避暗实验的错误次数明显增加，埋伏期缩短，说明T对小鼠的记忆有损伤作用。那么，T对记忆的消弱作用是否与脑内的阿片受体有关呢?目前尚未见到相关报道。已有研究说明：阿片受体与记忆亲密相关5，阿片类药物成瘾之后，其记忆非常

11、强烈，而且可导致终生难忘，说明学习记忆功能参与了阿片的成瘾过程;纳洛酮作为阿片受体拮抗药，对各型阿片受体都有竞争性拮抗作用，本身不产生明显药理作用，是常用的工具药。Gaugh等6-7认为阿片肽抑制杏仁核中去甲肾上腺素递质的释放，使记忆减弱，而纳洛酮可解除这种抑制作用。此外，T可通过激活T受体，抑制海马A1区神经元对外周传入电信号的反响，中枢内阿片系统也参与T的这种抑制作用，当用纳洛酮阻断阿片受体后，T的抑制作用明显减弱8。而海马是影响动物学习记忆过程的主要作用部位，老年痴呆患者的海马及颞叶的T程度明显增高3。在本实验中，我们观察到侧脑室单独给予阿片受体拮抗药纳洛酮后，与生理盐水组相比，错误次数

12、和埋伏期差异均无统计学意义，说明单独应用1g纳洛酮对小鼠的记忆并无明显影响。但在给予T之前预先给予纳洛酮，与单独应用T组相比，小鼠的错误次数明显减少，避暗埋伏期增加，说明纳洛酮可以逆转T对记忆的损害作用，提示阿片受体参与T减退记忆的作用。综上所述，我们认为，中枢神经系统内的阿片受体可能参与了T对记忆的减退作用。【参考文献】1delivEiraLF,abi,DiehlF,etal.Glurtiid-ediatedeffetsfsysteixytinupneryretrievalJ.NeurbilLearne,2022,87(1):67-71.2u,YuL.Rlesfxytininspatiall

13、earninganderyinthenuleusbasalisfeynertinratsJ.RegulatryPeptides,2022,120(1-3):119-125.3邹叶青,柳丰萍,高建群,等.催产素的研究进展J.广州医学院学报,2022,35(6):61-64.4梅镇彤.学习和记忆的神经生物学.上海:上海科技教育出版社,1997:95-97.5raniA,GhadaiR,FathiN,etal.NalxneiprvesipairentfspatialperfraneinduedbypentylenetetrazlkindlinginratsJ.Neursiene,2022,145(3):824-831.6GaughJL,Intrini-llisnIB,ahillLF,etal.Neurdulatrysystesanderystrage:rleftheaygdalaJ.BehavBra