ANCA相关性血管炎课件

1、大纲一、概述二、ANCA抗体谱三、ANCA自身抗体的检测方法四、ANCA的临床意义大纲一、概述一、概述1、定义：是一种以中性粒细胞和单核细胞胞质成分为靶抗原的自身抗体，现已发现ANCA自身抗体谱存在10多种特异性抗体2、历史： 1982年，Davies在节段性坏死性肾小球肾炎患者中发现 1985年，Wouder发现韦氏肉芽肿患者中也存在 1988年，Falk等发现了系统性血管炎和坏死性新月体肾小球肾炎也存在，但是与以前的ANCA有所不同 1989年，Targen等发现ANCA与炎性肠病有关一、概述1、定义：是一种以中性粒细胞和单核细胞胞质成分为靶抗二、ANCA抗体谱ANCA靶抗原实际上为细胞胞

2、质中的颗粒蛋白酶 主要位于中性粒细胞胞质的嗜天青颗粒 单核细胞胞质的溶菌酶 少部分位于中性粒细胞胞质的特异性颗粒 胞质 核质中二、ANCA抗体谱ANCA靶抗原实际上为细胞胞质中的颗粒蛋白二、ANCA抗体谱 嗜天青颗粒:细胞中可被天青染色的颗粒 中性粒细胞嗜天青颗粒：是中性粒细胞中一种成分颗粒。它约占颗粒总数的20%，它是一种溶酶体，含有酸性磷酸酶、髓过氧化物酶和多种酸性水解酶类等能消化吞噬的细菌和异物二、ANCA抗体谱 嗜天青颗粒:细胞中可被二、ANCA抗体谱溶菌酶：是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。主要使细胞壁破裂，导致内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合，与DN

3、A、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活。因此，该酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。该酶广泛存在于人体多种组织中，鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、唾液、血浆、尿、乳汁等体液以及微生物中也含此酶，其中以蛋清含量最为丰富。溶酶体：是具有一组水解酶(是在酸性区域具有最适pH的水解酶组)、并起消化作用的细胞器。据电子显微镜观察，溶酶体是由68毫微米厚的单层膜所围着的直径为0.4微米至数微米的颗粒或小泡。从产生来看，溶酶体是由高尔基体断裂产生，单层膜包裹的小泡，数目可多可少，大小也不等，含有60多种能够水解多糖，磷脂，核酸和蛋白质的酸性酶二、ANCA抗体谱溶菌酶：是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶二、A

4、NCA抗体谱已知的ANCA靶抗原嗜天青颗粒 特殊性颗粒 胞质 核板层蛋白酶3（PR3） 乳铁蛋白（LF） 烯醇酶 核质成分？ 髓过氧化物酶（MPO） 溶菌酶（LYS） 催化酶杀菌/通透性增高蛋白（BPI） 肌动蛋白人白细胞弹性蛋白酶（HLE）组织蛋白酶G（CG）溶菌酶（LYS）天青杀素（AZU）防御素（DEF）葡萄糖醛酸酶人溶酶体相关膜蛋白2（H-LAMP2）二、ANCA抗体谱已知的ANCA靶抗原嗜天青颗粒 二、ANCA抗体谱1、胞质型ANCA（cANCA）的靶抗原： 主要是蛋白酶3，占80%-90% 杀菌/通透性增高蛋白 某些未知的抗原2、核周型ANCA（pANCA）的靶抗原： 主要是髓过氧

5、化物酶 杀菌/通透性增高蛋白、人白细胞弹性蛋白酶、组织蛋白酶G、溶菌酶、天青杀素、葡萄糖醛酸酶、乳铁蛋白、烯醇酶 某些未知的抗原3、非典型ANCA（aANCA或xANCA）的靶抗原： 主要靶抗原还不清楚，现大多将其作为pANCA的亚型 二、ANCA抗体谱1、胞质型ANCA（cANCA）的靶抗原：二、ANCA抗体谱抗PR3抗体（PR3-ANCA） 1、PR3的作用: 水解作用，致血管内皮损伤，在血管炎中起重要作用 杀微生物活动性 调节髓样细胞分化 2、PR3-ANCA的临床意义 诊断WG：特异性：95% 敏感性：不活动50% 活 动100% 抗体滴度与病情活动一致 显微镜下血管炎（MPA）、结节

6、性多动脉炎（PAN）等其他多种原发性血管炎中也可被检测到 二、ANCA抗体谱抗PR3抗体（PR3-ANCA）二、ANCA抗体谱抗MPO抗体（MPO-ANCA） 1、MPO的作用 产生毒性氧自由基的主要酶 杀微生物活动性 2、MPO-ANCA的临床意义 主要与显微镜下血管炎（MPA） 坏死性新月体性肾炎（NCGN） 变应性肉芽肿性血管炎（CSS）有关 抗体滴度与病情活动一致 还可见于PAN、抗GMB病、WG、SLE、RA、药物性狼疮、Felty综合征（关节炎-粒细胞减少-脾大综合征）二、ANCA抗体谱抗MPO抗体（MPO-ANCA）二、ANCA抗体谱抗杀菌/通透性增高蛋白抗体（BPI-ANCA）

7、 1、BPI的作用： 是中性粒细胞中最强的抗G-细胞的内源性抗生素 对内毒素有对抗作用，可中血清中游离的内毒素 可抑制细胞因子的释放 2、BPI-ANCA的临床意义 1/3表现为cANCA，1/3表现为pANCA，1/3阴性 主要见开肺炎症性疾病并与长期慢性铜绿假单胞菌感染有关，如成人肺囊性纤维化（阳性率91%）、部分原发性支气管扩张症、弥漫性小支气管炎、及部分原发性肺纤维化 亦可在系统性血管炎（常伴有PO3-ANCA或MPO-ANCA）、炎性肠病(IBD)、自身免疫性肝炎(AIH)中出现 二、ANCA抗体谱抗杀菌/通透性增高蛋白抗体（BPI-ANC二、ANCA抗体谱抗人白细胞弹性蛋白酶抗体（

8、HEL-ANCA）抗组织蛋白酶G抗体（CG-ANCA） 1、HEL及CG的作用： 具有蛋白水解酶活性 有炎症症位的趋化作用，杀菌活性，血小板活化作用 2、HEL-ANCA及CG-ANCA的临床意 HEL-ANCA:可见了于SLE、药物性血管炎（如肼苯哒嗪引起的狼疮综合征），原发性胆汁性肝硬化（PBC）、原发性硬化性胆管炎（PSC） CG-ANCA:可见于SLE、IBD、PBC、PSC 两都在上述疾病中敏感性低、特异性差，且与病情活动无关二、ANCA抗体谱抗人白细胞弹性蛋白酶抗体（HEL-ANCA二、ANCA抗体谱1、抗溶菌酶抗体（LYS-ANCA） 可见于IBD、PBC和AIH2、抗天青杀素抗

9、体（AZU-ANCA） 可见于系统性血管炎、DIL等，但阳性率不高，缺乏特异性 也报道它与临床明确的血管炎无明显相关性，与多器官受累有关，尤其是肾、肺损害3、抗防御素抗体（DEF-ANCA） 可出现在一种热带寄生虫-慢性过度反应性盘尾丝虫病中，阳性率100%,并与病情活动有关4、抗葡萄糖醛酶抗体（-glucuronidase-ANCA） 其临床意义及与临床疾病的相关性目前尚不阐明二、ANCA抗体谱1、抗溶菌酶抗体（LYS-ANCA）二、ANCA抗体谱5、抗人溶酶体相关膜蛋白2抗体（H-LAMP2-ANCA） 与NCGN相关联，活动期阳性率在于90%，且常与PR3-ANCA和MPO-ANCA同时

10、出现6、抗乳铁蛋白抗体（LF-ANCA） 可见于SLE、IBD、RA、药物性狼疮、PBC、PSC、AIH,但阳性率低且与病情活动无关7、抗-烯醇酶抗体 其临床意义目前亦不明确，近有报道与IBD密切相关8、抗催化酶抗体 其临床意义目前尚不明确，近有报道与IBD密切相关二、ANCA抗体谱5、抗人溶酶体相关膜蛋白2抗体（H-LAM三、ANCA自身抗体的检测方法ANCA检测方法： 1、检测ANCA的方法有多种： 间接免疫荧光法（IIF）、酶联免疫吸附试验（ELISA）放射免疫法（RIA）、免疫印迹法（IB）、放射免疫沉法（RIP）、斑点杂交法(dotblotting)和流式细胞法（FCM） 2、临床常

11、规检测ANCA一般选用IIF作为筛远试验，选用ELISA作为特异性ANCA确认试验三、ANCA自身抗体的检测方法ANCA检测方法：三、ANCA自身抗体的检测方法IIF法检测ANCA因检测底物粒细胞抗原片固定方法差异而表现不一：甲醛固定只表现为,c-ANCA;而乙醇固定可表现为c-ANCA及pANCA；ELISA法检测特异性抗体三、ANCA自身抗体的检测方法IIF法检测ANCA因检测底物三、ANCA自身抗体的检测方法两种免疫荧光的ANCA cANCA pANCA三、ANCA自身抗体的检测方法两种免疫荧光的ANCA三、ANCA自身抗体的检测方法用乙醇固定虽可表现为c-ANCA及pANCA，但许多自

12、身疫疾病中存在ANA，故可出现pANCA假阳性，而甲醛固定虽全部表现为c-ANCA，但可破坏核抗原，可阻止ANA的结合，从而避免出现pANCA假阳性固定 荧光染色表现乙醇甲醛HEp-2结果 +c +p +p +p或+H +p和+H +p和+H - +c +c - - +c - - - - - +H +H +H _ cANCA pANCA aANCA ANA pANCA aANCA ANA ANA三、ANCA自身抗体的检测方法用乙醇固定虽可表现为c-ANC三、ANCA自身抗体的检测方法注意事项：1、仅有IIF法检测ANCA，而没有检测ANCA特异性抗体，降低了ANCA对疾病诊断的特异性2、仅检测

13、抗PO3及MPO两种ANCA特异性抗体，而不检测IIF-ANCA，降低ANCA对疾病诊断的应用范围3、用IIF法检测ANCA时，未能严格排除ANA的干扰，可出现假阳性结果，推荐使用组合抗原片4、IIF和或ELISA的检测常仅为定性结果，而无定量结果三、ANCA自身抗体的检测方法注意事项：四、ANCA的临床意义CHCC2012血管炎分类：1、大血管炎：主要累及大动脉(主动脉及其主要分支)的血管炎，可累及所有血管，包括：大动脉炎及巨细胞动脉炎2、中血管炎：主要累及中等动脉(器官动脉主干及其分支)，所有大小的动脉均可累及，常并发炎性动脉瘤及动脉狭窄，包括：结节性多动脉炎及川崎病3、小血管炎：主要累及

14、小血管(小动脉、微动脉、毛细血管、小静脉)的血管炎，中等动脉、静脉也可累及，包括：ANCA相关性血管炎及免疫复合物性小血管炎4、变异性血管炎：可累及任意大小(大、中、小)和任意种类血管(动脉、静脉、毛细血管)的血管炎，包括：白塞病及科根综合征5、单器官性血管炎：局限在单一器官或系统的血管炎（包括任何大小的血管)，且没有证据表明是系统性血管炎累及该器官的表现器官中病灶可以为单发或多发性。命名中应包括受累器官和血管的种类，某些患者病程初期可表现为SOV，而后逐渐发展成系统性血管炎6、与系统性疾病相关的血管炎：与某一系统性疾病相关或继发于某一系统性疾病的血管炎。命名中应包含该系统性疾病7、与可能的病

15、因相关的血管炎：与某一可能的特殊病因相关的血管炎。命名中应明确指出可能的病因(如肼苯哒嗪相关性MPA，丙基硫氧嘧啶相关性AAV)四、ANCA的临床意义CHCC2012血管炎分类：四、ANCA的临床意义根据ANCA的类型将NCA相关性血管炎（AAV）分为： MPOANCA相关性AAV PR3一ANCA相关性AAV ANCA阴性AAV（当某一患者有充分证据诊断为AAV，但血清ANCA检测始终阴性时，则诊断为ANCA阴性AAV，类似于血清阴性的SLE和血清阴性的RA）根据组织病理学特点将NCA相关性血管炎（AAV）分为 显微镜下多血管炎(MPA) 肉芽肿性多血管炎(GPA) 嗜酸性肉芽肿性多血管炎(

16、EGPA) 单器官AAV：如特发性坏死性新月体肾炎四、ANCA的临床意义根据ANCA的类型将NCA相关性血管炎四、ANCA的临床意义免疫复合物性小血管炎：1、抗肾小球基底膜病：主要累及肺、肾毛细血管，并有抗肾小球基底膜抗体在肾小球基底膜上沉积的血管炎。肺受累可引起出血性肺泡炎，肾受累可引起新月体性肾炎和血管袢坏死，该病抗GMB抗体几乎100%阳性2、冷球蛋白性血管炎：以冷球蛋白在小血管中沉积及血清中出现冷球蛋白为特征的血管炎。主要累及皮肤、肾脏和周围神经3、IgA性血管炎(过敏性紫癜）：以IgAl为主的免疫复合物沉积为特征的小血管炎。主要累及皮肤、消化道、关节，肾脏病变与IgA肾病难以鉴别4、

17、低补体血症性荨麻疹性血管炎(抗Clq性血管炎，HUV)：以荨麻疹及低补体血症为主要特征的小血管炎，血清中出现抗Clq抗体。常出现肾脏受累、关节炎、阻塞性肺疾病、眼炎四、ANCA的临床意义免疫复合物性小血管炎：四、ANCA的临床意义ANCA与原发性小血管炎 1、IIF-ANCA和PR3-ANCA及MPO-ANCA联合检测，可显著提高对原发性ANCA相关性小血管炎的诊断价值： 敏感度：72.5% 特异性：98.4% 2、相当数量的原发性ANCA相关性小血管炎ANCA检测阴性，对此类诊断依靠临床表现、其他实验室检查和组织学检查 3、免疫复合物性小血管炎，如Goodpasture综合征可有1/3患者出

18、现ANCA阳性，此类患者多表现为重叠综合征四、ANCA的临床意义ANCA与原发性小血管炎四、ANCA的临床意义ANCA与炎性肠病1、在溃疡性结肠炎（UC）中ANCA阳性率60%-80%，在克罗恩（CD）中阳性率为10%-20%，多为pANCA或aANCA2、其靶抗原目前尚不清楚，烯醇酶、催化酶及BPI均有报道，部分患者用乙醇固定可检测到pANCA或aANCA，但甲醛固定表现阴性，说明其靶抗原可能位于细胞核上，可能不是严格意义上的ANCA3、也有报道pANCA阳性的UC患者粘膜血管炎发生率高四、ANCA的临床意义ANCA与炎性肠病四、ANCA的临床意义ANCA与自身免疫性肝病1、主要见于自身免疫性肝病中的型自身免疫性肝（AIH），阳性率65%-92%，原发性硬化性胆管炎（PSC），阳性率29%-40%，原发