CpGODN的免疫刺激作用课件

1、CpG-ODN的免疫刺激作用 CpGODN的免疫刺激作用课件CpG-ODN的免疫刺激作用 CpGODN的免疫刺激作用课件CPG概念为非甲基化的胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸重复序列，即CpG 基序。一种免疫佐剂作用靶点TLR9细胞免疫，体液免疫CpGODN的免疫刺激作用课件CPG概念CpGODN的免疫刺激作用课件Th1免疫应答慢性乙型肝炎患者细胞免疫低下HBV免疫耐受，持续感染肿瘤微小残留病的清除CpGODN的免疫刺激作用课件Th1免疫应答慢性乙型肝炎患者细胞免疫低下CpGODN的免疫CPG提高PBMC中Th1细胞CpGODN的免疫刺激作用课件CPG提高PBMC中Th1细胞CpGODN的免疫刺激作用课件

2、Th1占淋巴细胞百分比CpGODN的免疫刺激作用课件Th1占淋巴细胞百分比CpGODN的免疫刺激作用课件CPG提高PBMC中Th1 、Tc1细胞百分率*：与对照组比较，P0.05 CpGODN的免疫刺激作用课件CPG提高PBMC中Th1 、Tc1细胞百分率*：与对照CPG刺激BPMC分泌细胞因子*：与对照组比较，P0.05 CpGODN的免疫刺激作用课件CPG刺激BPMC分泌细胞因子*：与对照组比较，P0.0CPG诱导PBMC杀伤靶细胞收集CPG活化的PBMC细胞毒性实验：效应细胞为CPG活化的PBMC；靶细胞为CFSE预染的K562细胞。对照组效应细胞为未经CPG活化的PBMC。效：靶20：

3、1，混合培养2h。流式细胞术检测靶细胞死亡率。CpGODN的免疫刺激作用课件CPG诱导PBMC杀伤靶细胞收集CPG活化的PBMCCpGOCPG诱导PBMC杀伤靶细胞CpGODN的免疫刺激作用课件CPG诱导PBMC杀伤靶细胞CpGODN的免疫刺激作用课件CFSE染色靶细胞浓度为5mol/ L 的CFSE （2羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯）工作液取对数生长期的靶细胞浓度108/ L细胞悬液与等体积CFSE 工作液混合37 孵育10 min。离心洗涤两次后悬浮细胞备用CpGODN的免疫刺激作用课件CFSE染色靶细胞浓度为5mol/ L 的CFSE （2羧CFSE染色靶细胞CpGODN的免疫刺激作用

4、课件CFSE染色靶细胞CpGODN的免疫刺激作用课件实验结果 CpG活化PBMC对K562细胞的杀伤作用(N=5)CPG活化PBMC 16.855.14 %对照组8.622.83 %*：与对照组比较，P0.05 CpGODN的免疫刺激作用课件实验结果 CpG活化PBMC对K562细胞的杀伤作用(CIK细胞杀伤靶细胞CpGODN的免疫刺激作用课件CIK细胞杀伤靶细胞CpGODN的免疫刺激作用课件CIK细胞杀伤靶细胞CpGODN的免疫刺激作用课件CIK细胞杀伤靶细胞CpGODN的免疫刺激作用课件研究背景 通过主动免疫、过继特异性免疫、过继非特异性免疫等方式，清除慢性乙肝患者体内残存的HBV，达到治

5、疗效果。CpGODN的免疫刺激作用课件研究背景 通过主动免疫、过继特异性免疫、过继非特研究背景 B淋巴细胞具有抗原递呈细胞的性质，同时具有CpG-ODN受体：TLR-9。本研究探讨CpG-ODN诱导B淋巴细胞成为高效APC，使之具有类似于树突状细胞功能的可行性。CpGODN的免疫刺激作用课件研究背景 B淋巴细胞具有抗原递呈细胞的性质，同时具TOLL受体CpGODN的免疫刺激作用课件TOLL受体CpGODN的免疫刺激作用课件TOLL受体在血细胞中的表达CpGODN的免疫刺激作用课件TOLL受体在血细胞中的表达CpGODN的免疫刺激作用课件活化B细胞负载核心抗原磁珠分选B淋巴细胞CPG活化B淋巴细

6、胞核心抗原肽:FLPSDFFPSV-FITC流式细胞仪、荧光显微镜检测抗原负载状况CpGODN的免疫刺激作用课件活化B细胞负载核心抗原磁珠分选B淋巴细胞CpGODN的免疫刺磁珠分选B细胞分选前B细胞 7.89% 分选后B细胞 89.6% CpGODN的免疫刺激作用课件磁珠分选B细胞分选前B细胞 7.89% 分选后B细胞 89.活化B细胞负载抗原肽CpGODN的免疫刺激作用课件活化B细胞负载抗原肽CpGODN的免疫刺激作用课件活化B细胞负载核心抗原荧光显微镜观察B细胞负载HBcAg18-27肽 CpGODN的免疫刺激作用课件活化B细胞负载核心抗原荧光显微镜观察B细胞负载HBcAg18APC与T细

7、胞作用机制CpGODN的免疫刺激作用课件APC与T细胞作用机制CpGODN的免疫刺激作用课件CPG对B细胞抗原递呈相关分子的作用研究CpG2006、2216由上海生物工程技术服务有限公司合成，全硫代化修饰对照组为含10%FCS的RPMI1640外周血PBMC，细胞量107/孔，37、5%CO2、48小时实验组加入CpG2006或CpG2216，终浓度均为1umol/mL，余同上CpGODN的免疫刺激作用课件CPG对B细胞抗原递呈相关分子的作用研究CpG2006、22CpG提高淋巴细胞CD69表达 T淋巴细胞 B淋巴细胞 CD69表达率（%）*：与对照组比较，P0.05 CpGODN的免疫刺激作

8、用课件CpG提高淋巴细胞CD69表达 T淋巴细胞 B细胞CD80、CD86表达对照组加CPG-ODN组加CPG-ODN组CpGODN的免疫刺激作用课件B细胞CD80、CD86表达对照组加CPG-ODN组加CPGCpG提高B细胞表面CD80、CD86的表达 CD80 CD86CD80、CD86表达率（%）*：与对照组比较，P0.05 CpGODN的免疫刺激作用课件CpG提高B细胞表面CD80、CD86的表达 B细胞MHC-、MHC-表达对照组加CPG-ODN组CpGODN的免疫刺激作用课件B细胞MHC-、MHC-表达对照组加CPG-ODN组CpCpG提高B细胞表面MHC-、MHC-的表达 MHC

9、-MHC-MHC表达量（MFI）*：与对照组比较，P0.05 CpGODN的免疫刺激作用课件CpG提高B细胞表面MHC-、MHC-的表达 活化B细胞诱导CTL负载了抗原的活化B细胞与淋巴细胞混合培养(含IL-2的RPMI1640培养液).收集细胞,以五聚体技术检测HBV特异性CTL.实验组特异性CTL为0.500.19%，对照组为0.200.10%。 CpGODN的免疫刺激作用课件活化B细胞诱导CTL负载了抗原的活化B细胞与淋巴细胞混合培养特异性CTL诱导Pro5TM MHC Pentamers检测对照组和实验组HBcAg18-27抗原特异性CTL（Q2-1区）。前者为对照组（未加APC），后者为实验组（加APC）。CpGODN的免疫刺激作用课件特异性CTL诱导Pro5TM MHC Pentamers检测结论CpG能够活化B细胞，对T细胞无明显的作用CpG能够提高B细胞表面抗原递呈相关分子的表达CPG诱导PBM