松茸多糖两种测定方法的比较研究

1、松茸多糖两种测定方法的比拟研究【摘要】目的选择一种准确、稳定、简便的松茸多糖含量测定的方法。方法对硫酸-蒽酮法和苯酚-硫酸法测定松茸子实体多糖的含量进展比拟。结果硫酸-蒽酮法和苯酚-硫酸法分别在1.212gL-1(r=0.9993)和1.515gL-1(r=0.9991)范围内呈线性关系；精细度实验RSD分别为0.13%和0.31%；硫酸-蒽酮法在3h内稳定，苯酚-硫酸法在6h内稳定；含量测定结果分别为4.28%和4.95%。结论苯酚-硫酸法测定松茸多糖含量显色灵敏，颜色稳定，操作简便，可作为测定松茸多糖含量测定的方法。【关键词】松茸；多糖含量；蒽酮-硫酸法；苯酚-硫酸法Abstrat：bje

2、tiveTseletareaurate,stableandnvenientethdfrdeteinatinfPlysaharidententinTrihlaatsutakeSing.ethdsPlysaharidententinTrihlaatsutakeSingasdeterinedbytethds:athranne-sulfuriaidethdandphenl-suifuriaidethd.ResultsThestandardurvefathranne-sulfuriaidethdandphenl-suifuriaidethdasrespetivelylinearintherangesf1

3、.212gL-1(r=0.9993)and1.515gL-1(r=0.9991),athranne-sulfuriaidethdasstableithin3h,phenl-suifuriaidethd.asstableithin6h;thententas4.28%and4.95%respetively.nlusinPhenl-suifuriaidethdissensitive，stableandnvenientandanbeusedfrdeterinatinfplysaharidententinTrihlaatsutakeSing.Keyrds：TrihlaatsutakeSing；Plysa

4、haridentent;Anthranne-sulfuriaidethd;Phenl-suifuriaidethd松茸TrihlaatsutakeSing.是赤松、台湾松等树木的活体共生菌，又称松茸、松蕈、松蘑、鸡丝菌,属担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、口蘑科、口蘑属1。子实体味道鲜美，有很高的营养价值和特殊的药用效果，被誉为“蘑菇之王2。现代研究说明，松茸有治疗糖尿并抗癌、镇咳、祛痰、平喘等作用3。松茸多糖含量的测定，有采用苯酚-硫酸法4，有采用硫酸-蒽酮法5。本文对松茸多糖的两种测定方法进展了比拟研究，以选定一种方便快捷的合适松茸多糖含量测定的方法。1仪器1.1仪器722分光光度计；水浴锅，电

5、子天平，枯燥箱、循环水真空泵。1.2试药葡萄糖中国药品生物制品检定所;95%乙醇、浓硫酸、蒽酮、苯酚均为分析纯，水为双蒸水。松茸购自吉林省博苑长白山特产科技。2方法与结果2.1对照品溶液的配制精细称取经105枯燥至恒重的无水葡萄糖对照品10g，置100l量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成每毫升中含无水葡萄糖0.1g的对照品溶液。2.2样品溶液的制备精细称取60枯燥至恒重的松茸细粉0.5g，置圆底烧瓶中，加80%乙醇150l，加热回流1h，趁热滤过，残渣用80%乙醇洗涤3次，将残渣及滤纸置烧瓶中，加水150l，加热回流1h，趁热滤过，烧瓶及残渣用热水洗涤3次，合并滤液与洗液，转移至250

6、l量瓶中，加水至刻度，摇匀。2.3硫酸-蒽酮法测定松茸多糖的含量2.3.1标准曲线的制备精细量取对照品溶液0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1l，分别置10l具塞刻度试管中，各加水至2.0l，摇匀，在冰水浴中缓慢滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液至刻度，摇匀，冷却后置沸水浴中保温10in，取出，立即置冰水浴中冷却10in，取出，以相应试剂为空白。照紫外-可见分光光度法，在620n波长处测定吸光度。以吸光度(Y)为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线6，建立回归方程：Y=0.0357X+0.0222(r=0.9993)。结果说明：浓度在1.212gL-1范围内线性关系良好。2.3.2空白溶液的制备取

7、水约2.0l，置10l具塞枯燥试管中，在冰水浴中缓慢滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液至刻度，摇匀，放冷后置沸水浴中反响10in，立即取出置冰水浴中冷却10in，即得空白溶液。2.3.3精细度实验分别精细量取对照品溶液1l，按“2.3.1项下的方法重复测定6次，吸光度的RSD为0.13%，结果说明仪器精细度良好。2.3.4稳定性考察精细汲取按“2.2项下方法制备的样品溶液1.0l，自“加水至2.0l起，按照“2.3.1项下方法每隔0.5h测定吸光度，连续6h，考察其稳定性。结果说明，样品溶液在3h内显色稳定，可进展测定。RSD为2.94%。2.3.5松茸多糖含量测定精细量取样品溶液1l，置10l具塞刻

8、度试管中，照“2.3.1项下的方法测定，自“加水至2.0l起，依法测定吸光度，计算，即得。松茸多糖的含量为4.28%。转贴于论文联盟.ll.2.4苯酚-硫酸法测定松茸多糖的含量2.4.1标准曲线的制备精细量取对照品溶液0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1l，分别置10l具塞刻度试管中，各加水至2.0l，摇匀，各精细参加5%苯酚溶液1l，摇匀，迅速精细参加硫酸5l，摇匀，放置10in，置40水浴中保温15in，取出后迅速冷却至室温，以相应试剂为空白。照紫外-可见分光光度法，在490n波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，对照品溶液质量浓度为横坐标，得回归方程：Y=0.0467X-0.0221

9、，r=0.9991,结果说明，无水葡萄糖在1.515gL-1范围内，其质量浓度与吸收度线性关系良好。2.4.2空白溶液的制备取水约2.0l，置10l具塞枯燥试管中，精细参加5%苯酚溶液1l，摇匀，迅速精细参加硫酸5l，摇匀，放置10in，置40水浴中保温15in，取出后迅速冷却至室温，即得空白溶液。2.4.3精细度实验分别精细量取对照品溶液1l，按“2.4.1项下的方法重复测定6次，吸光度的RSD为0.31%，结果说明仪器精细度良好。2.4.4稳定性考察精细汲取按“2.2项下方法制备的样品溶液1.0l，加水至2.0l，按照“2.4.1项下方法每隔0.5h测定吸光度，连续6h，考察其稳定性。结果

10、说明，样品溶液在6h内显色稳定，可进展测定。RSD为2.15%。2.4.5松茸多糖含量测定精细量取样品溶液1l，置10l具塞刻度试管中，照“2.4.1项下的方法测定，自“加水至2.0l起，依法测定吸光度，计算，即得。松茸多糖的含量为4.95%。2.5硫酸-蒽酮法与苯酚-硫酸法的比拟结果见表1。表1硫酸-蒽酮法与苯酚-硫酸法比拟略3结论本文采用硫酸-蒽酮法和苯酚-硫酸法对松茸粗多糖进展了含量测定。硫酸-蒽酮法测定多糖的原理是根据多糖经浓硫酸脱水生成糠醛或其衍生物，与蒽酮试剂起缩合反响，生成蓝绿色化合物；苯酚-硫酸法测定多糖的原理是根据糖经浓硫酸处理后脱水产生的糠醛或其衍生物，再与苯酚缩合生成橙黄

11、色物质于490n处比色7。从表1数据的比拟可以看出，在精细度、相关系数上，硫酸-蒽酮法优于苯酚-硫酸法；在稳定性方面，苯酚-硫酸法较硫酸-蒽酮法稳定；在含量测定中，硫酸-蒽酮法测定粗多糖的含量比苯酚-硫酸法低。虽然硫酸-蒽酮法在测定方面也具有一定优势，但由于苯酚-硫酸法测定松茸多糖含量显色灵敏，颜色稳定，操作简便，因此苯酚-硫酸法是测定松茸多糖含量较为理想的方法。4讨论在测定松茸多糖的试验中，与苯酚-硫酸法相比，硫酸-蒽酮法稳定性较差，含量测定结果较低，可能是由于松茸中的蛋白质8对蒽酮-硫酸法的显色反响有一定干扰所致。【参考文献】1魏铁铮,许广波,傅伟杰,等.不同培养基对松口蘑菌丝生长的影响J.食用菌学报,2000,7(3):48.2李云.珍稀共生食用菌松口蘑研究进展J.安徽农业科学,2022,35(15):4468.3吴映明,陈爱葵,曾小龙,等.松口蘑的镇咳、祛痰、平喘作用研究J.中国食用菌,2022,22(4):37.4廖丽娟,李英姬,金光洙.松茸多糖提取工艺及质量测定J.延边大学医学学报,2022,31(3):172.5吴漾,李婷婷,李永乐.等.松茸、蛹虫草混菌共酵菌