磷酸盐缓冲液配制方法

1、磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法欧阳引擎(2021.01.01)0.01MPBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KC1, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mMK2HPO4, pH 7.2)PBS 缓冲液(pH7.2 - 7.4 ): NaCl 137mmol/L , KC12.7mmol/L, Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L称 7.9g NaCl, 0.2g KC1, 0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml蒸惚水中，用HC1调节溶液的pH 值至7.4,最后加蒸馆水定

2、容至1L。保存于4C冰箱中即可。需要注意的是，通常所说的浓度0.01 M指的是缓冲溶液中所有 的磷酸根浓度，而非Na离子或K离子的浓度，Na离子和K离 子只是用来调节渗透压的。母液的配制：0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于 1000ml 水 各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4 ,100ml):取 19ml 0.2mol/L 的NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4,即可。然后只需将0.2M PB (

3、pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如:0.1M PB (PH=7.4):取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml即可。0.01M PB (PH=7.4):取 50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml即可。0.02M PB (PH=7.4):取 100ml 0.2 MPB,加水稀释至 1000ml即可。若需要NaCl的话，加入NaCl至0.9% (g/100ml)即可。另:其它各种另PH值的0.2M PB (100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4 (ml) 0.2M Na2HPO4 (ml)5.793.56.55.89285.990106.087.712.

4、36.185156.281.518.56.377.522.56.473.526.56.56&531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.03862 TOC o 1-5 h z 33672872237719ml81ml1684138710.590.58.591.5793&05.394.7 0.01M磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取 8g NaCl. 0.2g KC1、1.44g Na2HP04 和 0.24g KH2PO4,溶 于800ml蒸徭水中，用HC1调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸 憎水定容至1L即可。在 bf/in2(1034xl05Pa)

5、M压下蒸气灭菌 (至少20分钟)，保存存于室温或4C冰箱中。需要注意的是，通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有 的磷酸根浓度，而非Na离子或K离子的浓度，Na离子和K离 子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话，则需要 在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、 定容、灭菌消毒。PH7.67.47.27.0H2O1000 1000 1000 1000NaCl8.58.58.58.5Na2HPO4 2.22.22.22.2NaH2PO4 0.10.20.30.4根据经验来看，新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之 间，可是在温度的影响下，尤其在夏天

6、，其电离常数发生了改 变，在经过昼夜的时间后，PH值会明显改变（我亲自测过偏 酸）。所以做实验的同学可要注意了，PH值可能会影响实验结 果，甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气，要加 强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的 PBS,如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液。PBS缓冲液称取 NaCl 8g, KC1 0.2g, Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4,加水定容 至1L,常温保存备用。PBST缓冲液取300）11 Tween-20加入PBS 100ml中，混匀后即刻使用。现用 现配。如果

7、是把所有固体加大十倍，配置为浓缩液，工作时候十倍稀 释，那么，在刚配好浓缩液时，PH在6.5左右，明显偏酸。不 能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更方便的方 法。十倍稀释以后，PH自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次PH&0的PBS配方详细NaCl 137mmol/L, KC1 2.7mmol/L, Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。滴加浓盐酸将pH值调节至&0,然后加入去离子水将溶液定 容至1 Lo咼温咼压灭菌后，室温保存。注意：上述PBS Buffe

8、r中无二价阳离子，如需要，可在配方中 补充 1 mM CaC12 和 0.5 mM MgC12o0.05mol/L PBS（磷酸缓冲液 Phosphate Buffer Solution, PBS）的配 制：甲液：0.05mol/L Na2HPO4溶液：称取磷酸氢二钠 9.465g7.099g,加蒸憎水至 1000ml;乙液：0.05mol/L KH2P04 溶液：称取磷酸二氢钾，9.07g6.803g, 加蒸徭水至lOOOmlo将甲乙液分装在棕色瓶内，于4C冰箱中保存，用时甲、乙两 液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液，见下表： pH甲液ml乙液ml TOC o 1-5 h z 5.29 2.597.55.59 5.095.05.91 10.090.06.2420.0