研究结果实验方案_第1页
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1、一、构建人源菌群小鼠1. 无菌小鼠繁殖、生产设施环境指标数20-5020-40-0.1-2. :3 30min 油作为抗冻保护剂,旋涡振荡混匀,-801g 0.5mL 50mgCaCO3的PBS溶液中13. 无菌KM 鼠的人源菌群化:每只无菌KM 4. 人源菌群KM 小鼠的培育:无菌全价一、构建人源菌群小鼠1. 无菌小鼠繁殖、生产设施环境指标数20-5020-40-0.1-2. :3 30min 油作为抗冻保护剂,旋涡振荡混匀,-801g 0.5mL 50mgCaCO3的PBS溶液中13. 无菌KM 鼠的人源菌群化:每只无菌KM 4. 人源菌群KM 小鼠的培育:无菌全价饲采食和饮水。严格的每天

2、。5. 人源菌群KMDGGE) 人源菌群 KM 4 ) DNA 的提取:按照文献2DNA) PCR 扩增 V3 GeneB 通用引物及优势菌属引物进行PCR 扩增3中条带序列分别设计 ) 扩增产物的DGGE 条带比较及PCA 分析:利用ty UPGMA 人源菌群KM普通级C57BL/6J8. C57BL/6J(1)孕鼠颈椎脱臼法处死,迅速将其侵入碘液中5-10s,在手术台上大约 20s;NaOH (3)(7)人源菌群KM 小鼠代乳无菌C57BL/6J 人源菌群C57BL/6JDGGE评价:4二、茶多酚干预1. C57BL/6J 12362. 420(7)人源菌群KM 小鼠代乳无菌C57BL/6

3、J 人源菌群C57BL/6JDGGE评价:4二、茶多酚干预1. C57BL/6J 12362. 420 三、小鼠肠道菌群与脂肪代谢变化4 通用引物及优势菌属引物进行PCR 扩增3(5)DGGE ty 绘制相似性UPGMA 聚类ty而获得的DGGE 图谱数据矩阵导,DGGE 特殊条带和分析4实时荧光定量PCR 对优势菌属的定量分析5四、参考文献1 Lecuit M, Sonnenburg J L, Cossart P, et参考文献1 Lecuit M, Sonnenburg J L, Cossart P, etal. Functional Genomic Studies ofestinal t

4、o a Foodborne Enteropathogen in a Humanized Gnotobiotic Mouse Chemistry.2007,282(20):15065-J. Journal of TurnbaughPJ, HamadyM, YatsunenkoT,etal. AcoregutmicrobiomeinobeseandleanNATURE.2009,457(7228):480-487. Leung K, ToppE. Bacterialcommunity dynamicsinliquidswinemanure duringstorage: molecular ysis

5、 using DGGE/PCR of 16S rDNAJ. FEMS MICROBIOLOGY ECOLOGY. 2001, 38(2-3):169-177. ShenJ,Zhang B,Wei G, et al. Molecular Profilingofthe Clostridium leptum Subgroup inHuman Fecal Microflora by PCR-Denaturing Gradient Gel Electrophoresis and Clone LibrarydandEnvironmentalMicrobiology.2006,72(8):5232-5238. 5 Audrey M. Neyrinck, ossemiers, Celine Druart, et al. Prebiotic Effects of Arabinoxylan Related to the Increase in Bifidobacter

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