酵母菌形态观察_第1页
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文档简介

1、酵母菌形态观察酵母菌形态观察微生物实验报告酵母菌的形态观察一、目的要求:、掌握普通光学显微镜的使用方法和注意事项、观察酵母菌的形态特征、出芽生殖方式,并掌握酵母菌与细菌形态特征的区别、学习鉴别死活酵母细胞的实验方法二、器材和器皿:、生理盐水、美蓝染色液、显微镜、酒精灯、载玻片、盖玻片、接种针、擦镜纸酵母菌是单细胞的真核微生物,菌体比细菌大而且不运动。酵母菌的繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖两种,以无性繁殖为主。芽殖是酵母菌普遍的无性繁殖方式,少数为裂殖;有性繁殖是产生子囊和子囊孢子。本实验是通过美蓝染液水浸片来观察酵母的形态和芽殖方式。美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型无色。用美蓝

2、对酵母活细胞染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型,而对代谢作用微弱或死细胞,无此还原能力或还原能力极弱,而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。因此,不仅用此法可观察酵母细胞形态,也可用来鉴别酵母菌的死细胞和活细胞。四、操作步骤:(一)显微镜的主要构造:普通光学显微镜的构造主要分为三部分:机械部分、照明部分和光学部分。(二)显微镜的使用方法低倍镜的使用方法1)取镜和放置:显微镜平时存放在柜或箱中,用时从柜中取出,右手紧握镜臂,左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上,镜座后端距桌边12寸为宜,便于坐着操作。2)调节光源3)低倍镜观察先将标

3、本玻片置于载物台上,并将标本部位处于物镜的正下方,以左手按逆时针方向转动粗调节器,使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处,应注在上升镜台时,切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着镜台上升,以免上升过多,造成镜头或标本片的损坏。然后,两眼同时睁开,左眼看目镜,同时反时针方向慢慢旋转粗调节轮,当在视野内出现物象后,改用细调节轮,上下微微转动,直至视野内获得清晰的物象。然后认真观察标本各部位,确定并将需进一步要观察的部位移视野中央,准备用高倍镜观察。观察完一个标本后,如果想要再观察另一标本时,需先将高倍物镜(或油镜)转回到低倍物镜,取出标本,按放片的方法换上新片,即可观察。千万不可在高倍物镜(或油镜)

4、下换片,以防损坏镜头。(五)美蓝浸片观察步骤在载玻片上滴一小滴0.1%美蓝液,无菌操作用接种环取酵母少许,与美蓝液混合均匀,染色2-3min。.加盖玻片:先将盖玻片一端与菌液接触,然后慢慢放下使其盖在菌液上。先低倍镜,后高倍镜,观察酵母细胞的形态、构造和出芽情况,并注意区分死细胞(蓝色)与活细胞(不着色)。.30min后再镜检。五、实验现象1.都是单个细胞都是透明的基本是活的5.用美兰染色后蓝色是死细胞,透明的是活细胞美蓝染液浓度和作用时间的不同,对酵母菌死细胞数量有何影响?试分析其原因。答:吕氏碱性美蓝染液无毒性,在浓度不大的情况下,对酵母菌死细胞的数量影响几乎没有。在浓度高的情况下,会导致酵脱水死亡。作用时间短对死细胞数量影响不大,时间过长,会由于酵母细胞在脱离了最适培养条件的情况下逐渐死亡,而使得死细胞数量偏大。在显微镜下,酵母菌有哪些突出的特征区别于一般细菌?答:酵

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