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文档简介

1、项目二细菌的染色技术食品药品职业学院中药和生物系中药和生物系1细菌按细胞壁组成不同分为细菌染色技术基础知识细菌基本结构：细胞壁革兰阳性菌：G+革兰阴性菌：G-2实验目的学习微生物涂片、染色的基本技术。掌握细菌革兰染色方法及其结果判断。熟悉革兰染色法的实际意义。学习无菌操作技术，巩固油镜的使用方法。 细菌染色技术示例 细菌革兰染色法3实验原理细菌染色技术示例 细菌革兰染色法染色目的细菌细胞与背景形成鲜明的色差，在显微镜下更易于识别。鉴别细菌染色方法单染色：用于观察细菌大小及形态；复染色/革兰染色：用于鉴别细菌，指导临床合理用药；其他方法：负染色、银染色等4实验原理细菌染色技术示例 细菌革兰染色法

2、常用染料碱性染料：美兰、结晶紫、番红等；酸性染料：伊红、酸性复红等；中性染料：如基姆萨氏（Gimsa）染料 5实验步骤细菌染色技术示例 细菌革兰染色法涂片、固定初染结晶紫媒染碘液脱色95%酒精复染复红油镜镜检7实验步骤 制片：自制标本片细菌染色技术示例 细菌革兰染色法涂片干燥固定8涂片过程的无菌操作10实验步骤 制片：自制标本片细菌染色技术示例 细菌革兰染色法涂片载玻片要洁净无油 涂片时，取菌切不可多,更不可将培养基刮下，涂抹要均匀，菌膜不宜过厚。以免影响显微镜观察tips11实验步骤 制片：自制标本片细菌染色技术示例 细菌革兰染色法干燥菌膜面朝上 玻片切勿离火焰太近，因温度太高会破坏菌体形态。tips12实验步骤 Grams染色细菌染色技术示例 细菌革兰染色法初染结晶紫媒染卢戈碘液脱色95%酒精复染沙黄/番红革兰染色要严格控制各试剂的作用时间，尤其是酒精脱色，时间过短，G-可染成紫色造成假阳性；反之，G+也可染成红色造成假阴性。 tips14tips2.4.5.水洗后勿使染料干凅，稍微甩干后直接进行下一步操作，以免染料结晶干扰显微观察 7.水洗后务必等标本片干燥后方进行油镜观察，否则油水分层，难以清晰观察物象 水流不要直接

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