生殖道标本课件

1、生殖道标本 Lower Genital Tract Specimens 涉及内容一、生殖道标本的正常菌群、病原菌及标本采集注意事项二、淋病奈瑟菌感染的检查三、软下疳性病的检查四、性病淋巴肉芽肿的检查五、细菌性阴道病的检查六、性传播衣原体感染的检查七、性传播支原体感染的检查一、全面了解机体的正常菌群细菌分离培养与鉴定的结果评价：正常人群的无菌体液中检测到细菌，应考虑细菌为感染的病原体。存在正常菌群的标本检测到细菌，应结合细菌的量考虑是否为致病菌。如临床表现支持感染，但培养阴性，应考虑为标本不合格、培养不恰当等因素。直接镜检找到病原体，而培养阴性，应考虑有L细菌、厌氧菌或苛氧菌感染。宫颈或宫颈内部

2、：淋病奈瑟菌，沙眼衣原体，人乳头瘤病毒阴道高位拭子：酵母菌，阴道毛滴虫，细菌性阴道感染肛门或直肠拭子：淋病奈瑟菌，B群链球菌（+阴道拭子）女性下生殖道标本采集男性的生殖道致病菌与女性绝大部分一致；尿道炎通常由淋病奈瑟氏菌或非淋病奈瑟氏菌引起；可能并发于生殖器溃疡；男性生殖道标本：淋病奈瑟氏菌感染 挤压尿道或直接获取尿道口分泌物； 直接涂片 如果培养，须直接接种温暖的筛选性平板，保温并即刻送微生物室培养。任何不能及时送检的生殖道标本，都应采用运送培养基采样保存。禁止冷藏早发B群链球菌病 1%的新生儿因母亲定植（10-30%的孕妇）发展为EOD（早发疾病） 50%病死率 25%的美国女性在L&D期

3、间得到预防 长期病症包括：在30%以上的新生儿中产生严重精神运动发展障碍Adriaanse et al. Neonatal early onset group B streptococcal infection: a nine-year retrospective study in a tertiary care hospital. J Perinat Med. 1996;24:531538在孕期3537周时的普查培养阴道和直肠拭子肉汤过夜增菌接种于血平板上再孵育过夜和鉴定可疑菌落任何有GBS菌尿的患者需要在分娩期做好预防分娩时快速检测敏感性不够二、淋病奈瑟菌感染的检查 (一)微生物检验1.用

4、无菌棉拭子取尿道脓液或宫颈脓液和分泌物。抵抗力极低易自溶，应立即送检或床旁自接接种2.取分泌物标本涂片染色镜检，为革兰阴性双球菌，特别是见白细胞内细菌，有助于诊断3.抗原检测 可用EIASA及免疫荧光技术检测抗原，对诊断较有帮助。4核酸检测 PCR检测DNA片段，快速敏感特异，但要注意假阳性，需结合临床进行诊断。5分离培养与鉴定 在选择培养基上见典型菌落镜检，氧化酶、糖发酵等生化试验，荧光抗体试验鉴定确证。6淋病奈瑟菌培养是目前实验室的金标准。(二)临床意义1淋病奈瑟菌所致淋病，常见于男性淋菌 性尿道炎(急性和慢性)、附睾炎，前列 腺炎等；女性淋菌性尿道炎、宫颈炎、 阴道炎等；女孩阴道炎和尿道

5、炎，主要 由直接或间接传染。亦可发生全身性淋 病(淋菌性菌血症、淋菌性眼炎和咽炎等)2淋病是目前世界上发病率最高的性病， 女性易受感染，易发生在性活跃的中青年。三、软下疳性病的检查软下疳性病是由杜克嗜血杆菌感染引起生殖器疼痛性溃疡及所属淋巴结化脓性病变的性传播疾病。 (一)采集溃疡脓液或分泌物为标本。 (二)微生物检验 1标本直接涂片染色，呈链状或“鱼 群状排列G-菌，可初步诊断。2PCR 检测病原菌核酸、快速敏感特异、有助于诊断。 3分离培养与鉴定 可选用选择培养基培养，可见典型菌落。再经涂片染色镜检和生化反应鉴定，可明确诊断。4软下疳实验室检查的金标准为培养加PCR检测。(三)临床意义1本

6、病性交传染，间接传染少见。多见 于女性，男女比1：2，但男性病人症 状重。病变多在外生殖器，也可播散 到其他部位的皮肤和粘膜。2软下疳发生12周后，有1030 患者出现一侧腹股沟淋巴结炎和淋巴 结周围炎称横痃。四、性病淋巴肉芽肿的检查(一)微生物检验 性病淋巴肉芽肿的病原体是性病淋巴肉芽肿衣原体。实验室的金标准是分离培养加PCR。1.取淋巴结脓液或宫颈和直肠拭子或活检材料为标本：2.标本直接涂片作Giemsa染色检查衣原体及其包涵体；荧光抗体(DFA)染色检测细胞内衣原体包涵体3抗原检测 用荧光抗体(DFA)染色检测抗原 酶免疫检测(EIA)衣原体可溶抗原4PCR检测沙眼衣原体DNA敏感性、特

7、异性达100和93，可用于早期诊断;5分离培养 可用鸡胚培养、细胞培养和动物接种方法,分离培养病原体，涂片染色镜检，免疫荧光检测、生化反应作鉴定;6抗体检测 检测补体结合抗体，效价达l：64有诊断意义；微量免疫荧光试验可测抗体，滴度1：512有意义。(二)临床意义 这是一种由衣原体引起的人类的接触性感染的性病。主要发生在热带及近热带地区。最普遍的症状是腹股沟腺炎的病灶。慢性症状为直肠炎，可以引起直肠狭窄，肛门和阴道瘘管脓肿。在发病的过程中出现全身症状，发热、头痛、发冷。 五、细菌性阴道病的检查(一)微生物检验1.由阴道加特纳菌引起的生殖道性传播疾病。2.采集阴道分泌物及感染部位的标本3.直接涂

8、片染色镜检，可观察到线索细胞，有大量多形性G-杆菌,实验室检查的金标准。4阴道分泌物pH和胺试验 pH45；标本中滴加10KOH 1滴即可发出鱼腥味为阳性。5分离培养与鉴定 将阴道分泌物接种于人血平板作培养，48h后观察菌落特征，同时作生化试验等进行鉴定。(二)临床意义1主要是阴道内乳酸杆菌受抑制，厌氧菌大量生长繁殖，而发生混合性感染的细菌性阴道病。可分解氨基酸产胺而发生鱼腥味，亦使pH上升。2主要引起细菌性阴道病，也可引起产后感染，流产等妇科疾病。3分离培养一般不用，因20- 40正常妇女阴道中也可检出此菌，应结合临床。六、性传播衣原体感染的检查(一)微生物检验目前实验室检查衣原体的金标准是

9、培养加PCR。1.用无菌棉拭子采集宫颈、男性尿道分泌物或病变部位活检标本。2.直接显微镜检查 涂片Giemsa染色镜检，见上皮细胞包涵体有诊断价值，原体呈紫红色或红色，始体为蓝色或暗蓝色。免疫荧光检查：用直接法荧光抗体(DFA)染色检查细胞内有典型的衣原体包涵体；3.抗原检测 ELISA检测衣原体特异性抗原。具有快速敏感特异性高的特点。4核酸检测 PCR和LCR法：检查分泌物和尿标本中衣原体DNA片断，快速敏感特异。5分离培养与鉴定 有细胞培养(Hela细胞)、鸡胚卵黄囊和小白鼠(腹腔、脑内、鼻腔内)接种三种方法，取培养细胞涂片、Giemsa和碘染色镜检、荧光抗体染色、ELISA、PCR等进是

10、测特异性抗体，也可对分离出的病原体进行血清学分型。(三)临床意义1沙眼衣原体沙眼生物变种有18个血清型，D-K型引起NGU (非淋球菌性尿道炎) ；A、D、B引起沙眼。2由衣原体引起的性传播疾病，发病率呈明显上升趋势，引起全世界重视，并将此列为独立的性传播疾病。常可引起女性不孕、男性不育症。此病常临床症状轻或隐性感染。七、性传播支原体感染的检查(一)微生物检验1.取宫颈分泌物、男性分泌物和无菌中段尿或感染部位标本。2.将标本涂片、革兰染色或Giemsa染色镜检。因支原体无固定形态,故意义不大。3.PCR检测支原体DNA,敏感性特异性均高，且快速，但应避免假阳性。4.支原体营养要求高，选用选择培

11、养基培养,可见典型呈“油煎蛋状”菌落，为阳性。目前实验室检查的金标准为细菌培养。(二)临床意义1解脲脲原体为条件致病菌，故应结合临床考虑诊断和治疗。2NGU(非淋球菌性尿道炎)并非都由沙眼衣原体和支原体所引起，还有其他微生物可引起，因此应结合临床考虑诊断及治疗。3.支原体所致的STD（性传播疾病）呈上升趋势，应引起重视。也引起女性不孕、习惯性流产不育等危害。正确评价细菌培养结果女性阴道与宫颈分泌物标本不常规接种血平板做普通细菌培养因为引起女性生殖道感染的病原体多数不能通过普通的细菌培养获得应根据临床症状选择相应的检测方法 -脓性白带（淋病）：淋病奈瑟菌培养； -稀薄、淡黄色、泡沫样白带（滴虫性阴道病）：镜检观察虫体 -外阴搔痒，豆腐渣样分泌物（真菌性阴道病）：白带镜检查真菌 孢子和菌丝 -乳白色均质分泌物（细菌性阴道病） ：镜检线索细胞，生化检查细菌培养的意义培养阳性感