泌尿外科解剖和生理培训课件

1、泌尿外科解剖和生理泌尿外科解剖和生理泌尿系统的解剖肾上腺肾输尿管膀胱尿道前列腺阴囊内容物泌尿外科解剖和生理2泌尿系统的解剖肾上腺泌尿外科解剖和生理2肾上腺的解剖肾上腺（suprarenal gland）位于腹膜后隙，肾脏的上方,左侧为半月形，右侧似三角形。肾上腺的动脉有三支： 膈下动脉肾上腺上动脉腹主动脉肾上腺中动脉 肾动脉肾上腺下动脉一、肾上腺的解剖泌尿外科解剖和生理3肾上腺的解剖肾上腺（suprarenal gland）位于腹左肾上腺静脉左肾静脉右肾上腺静脉下腔静脉少数汇入右膈下静脉右肾静脉泌尿外科解剖和生理4左肾上腺静脉左肾静脉泌尿外科解剖和生理4二、肾上腺的生理 肾上腺皮质由外向内可分

2、为层即球状带、束状带和网状带。球状带主要分泌醛固酮，又称为盐皮质激素，其主要功能是促进肾脏对钠离子的主动重吸收和对钾离子的排泄，维持体内水的恒定，增加组织液和血量，这对生命至关重要。束状带及网状带分泌糖皮质激素，主要为皮质醇。皮质醇主要作用是促进糖异生和升高血糖。促使蛋白质分解，使脂肪组织中脂肪分解并在体内重新分布。皮质醇在机体处于应激状态时可提高其耐受能力。皮质醇还具有抗炎抗过敏和抑制免疫功能的作用。肾上腺髓质由嗜铬细胞构成，主要分泌肾上腺素，也可分泌少量去甲肾上腺素。肾上腺素和去甲肾上腺素对心血管、内脏平滑肌的活动有调节作用。肾上腺髓质是人体极重要的内分泌腺，髓质分泌功能障碍将引起人体失去

3、有效的应急能力泌尿外科解剖和生理5二、肾上腺的生理 肾上腺皮质由外向内可分为层即球状带、束状肾脏的解剖与生理一、肾脏的解剖： 肾的位置肾（kidney）位于脊柱两侧，贴附于腹后壁 泌尿外科解剖和生理6肾脏的解剖与生理一、肾脏的解剖： 泌尿外科解剖和生理6肾的毗邻（前面观）泌尿外科解剖和生理7肾的毗邻（前面观）泌尿外科解剖和生理7肾的毗邻（后面观）泌尿外科解剖和生理8肾的毗邻（后面观）泌尿外科解剖和生理8肾蒂的结构和排列肾蒂（renal pedicle）由出入肾门的肾血管、肾盂、神经和淋巴管组成。由前向后为：静、动、盂；由上向下为：动、静、盂。泌尿外科解剖和生理9肾蒂的结构和排列肾蒂（renal

4、 pedicle）由出入肾门肾血管与肾段泌尿外科解剖和生理10肾血管与肾段泌尿外科解剖和生理10肾静脉泌尿外科解剖和生理11肾静脉泌尿外科解剖和生理11肾的被膜肾的被膜有三层：由外向内依次为肾筋膜、脂肪囊和纤维囊。泌尿外科解剖和生理12肾的被膜肾的被膜有三层：由外向内依次为肾筋膜、脂肪囊和纤维囊肾的被膜（纵面观）泌尿外科解剖和生理13肾的被膜（纵面观）泌尿外科解剖和生理13输尿管的解剖输尿管(ureters)：全长2530cm。可分三部：腹部（腰段），从肾盂与输尿管交界处至跨越髂血管处； 盆部（盆段），从跨越髂血管处至膀胱壁；壁内部（膀胱壁段），斜行穿膀胱壁。泌尿外科解剖和生理14输尿管的解剖

5、输尿管(ureters)：全长2530cm。可输尿管动脉泌尿外科解剖和生理15输尿管动脉泌尿外科解剖和生理15腹膜后大血管泌尿外科解剖和生理16腹膜后大血管泌尿外科解剖和生理16膀胱的位置与毗邻膀胱(urinary bladder)位于盆腔前部，空虚时上界约与骨盆上口相当，膀胱体上面有腹膜覆盖，下外侧面紧贴耻骨后隙的疏松结缔组织、肛提肌和闭孔内肌。男性膀胱底上部借直肠膀胱陷凹与直肠相邻，下部与精囊和输精管壶腹相邻；膀胱颈与前列腺相接。女性的膀胱底与子宫颈和阴道前壁相贴，膀胱颈与尿生殖膈相邻。泌尿外科解剖和生理17膀胱的位置与毗邻膀胱(urinary bladder)位于盆膀胱的血供髂内动脉前干

6、膀胱上动脉膀胱下动脉膀胱上中部膀胱下部髂内静脉泌尿外科解剖和生理18膀胱的血供髂内动脉前干膀胱上动脉膀胱下动脉膀胱上中部膀胱下部前列腺的位置泌尿外科解剖和生理19前列腺的位置泌尿外科解剖和生理19阴囊的层次泌尿外科解剖和生理20阴囊的层次泌尿外科解剖和生理20肾上腺的解剖1. 选题背景 2.研究现状3.研究目标和研究内容4. 技术路线5. 本课题特点6. 部分预实验结果7. 实验进展安排泌尿外科解剖和生理21肾上腺的解剖1. 选题背景 2.研究现状3.研究目标和研究内泌尿外科解剖和生理22泌尿外科解剖和生理222 HIF-1结构功能及其靶基因 1 胃癌化疗及多药耐药研究概况3 HIF-1肿瘤中

7、表达及与生物行为关系4 HIF-1与化疗耐药的关系5 p53基因与HIF-1表达的关系泌尿外科解剖和生理232 HIF-1结构功能及其靶基因 1 胃癌化疗及多药耐药 1 胃癌化疗及多药耐药研究概况胃癌是常见的消化道恶性肿瘤，化疗仍是治疗中晚期胃癌的主要手段，但由于肿瘤的多药耐药（MDR），化疗的效果并不理想。目前认为mdr-1基因与MDR有关，其编码p-糖蛋白(p-gp)，能把结构功能不同的药物泵出细胞外而降低药物浓度, 从而引发肿瘤耐药但是对于癌症中p-gp过表达的调节机制目前尚不清楚。泌尿外科解剖和生理24 1 胃癌化疗及多药耐药研究概况胃癌是常见的消化道恶性肿瘤，MDR的基本概念 MDR

8、是指抗某种细胞毒药物的耐药细胞系对许多结构上无关的和作用机制不同的其它抗癌药物产生的交叉抗药性,是一种独特的广谱耐药现象泌尿外科解剖和生理25MDR的基本概念 MDR是指抗某种细胞毒耐药分类: 原药耐药PDR 多药耐药MDR 肿瘤耐药机制 药理耐药 . 生化耐药 凋亡耐药 细胞动力学耐药 泌尿外科解剖和生理26耐药分类:肿瘤耐药机制 药理耐药 . 生化耐药 凋亡耐药 经 典 M D RMDR1的基因产物一种细胞膜糖蛋白称为P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)分子量为170KD(P170) P-gp具有能量依赖性“药泵”功能 表达水平与耐药程度成正比泌尿外科解剖和生理27经 典

9、 M D RMDR1的基因产物泌尿外科解剖和生理27P-gp介导的抗癌药物阿霉素、柔红霉素、表阿霉素米托蒽醌长春花碱、长春新碱乙托泊苷（Etoposide）紫杉醇、泰素帝Actinomycin D泌尿外科解剖和生理28P-gp介导的抗癌药物阿霉素、柔红霉素、表阿霉素泌尿外科解剖恶性肿瘤生长迅速 ,当肿瘤细胞生长超过血管生成的速度时,极易发生缺氧.因此肿瘤缺氧是肿瘤恶性进展的重要特征.肿瘤细胞可通过多种途径对缺氧进行适应性调节.缺氧诱导因子1（Hypoxia inducible factor 1, HIF-1）是调节细胞缺氧反应的主要转录因子 .泌尿外科解剖和生理29恶性肿瘤生长迅速 ,当肿瘤细

10、胞生长超过血管生成的速度时,极易泌尿外科解剖和生理30泌尿外科解剖和生理30Till Acker ，et al. A role for hypoxia and hypoxia-inducible transcription factors in tumor physiology。 J Mol Med , 2002, 80:562575.泌尿外科解剖和生理31Till Acker ，et al. A role for 缺氧诱导因子1（Hypoxia inducible factor 1, HIF-1）HIF-1 活性调节亚单位HIF-1 可能与稳定HIF-1及二聚化有关 2. HIF-1结构功能

11、代谢及其靶基因 泌尿外科解剖和生理32缺氧诱导因子1（Hypoxia inducible fac泌尿外科解剖和生理33泌尿外科解剖和生理33泌尿外科解剖和生理34泌尿外科解剖和生理34泌尿外科解剖和生理35泌尿外科解剖和生理35缺氧诱导因子1的代谢泌尿外科解剖和生理36缺氧诱导因子1的代谢泌尿外科解剖和生理36 缺氧 癌基因激活 HER2 FRAP HRAS CSRC 抑癌基因失活 VHL PTEN p53 生长因子或细胞因子 IGR、Insulin、EGF、IL-1 HIF-1的表达调节因素泌尿外科解剖和生理37 缺氧 HIF-1的表达调节因素泌尿外科解剖和生理37二. 研 究 现 状1.

12、HIF-1在肿瘤细胞中表达位于细胞核内. 2.HIF-1在多种肿瘤中的表达 ,在肿瘤 附近正常组织中不能测及 . 3.在结肠癌、肺癌、乳腺癌及前列腺癌的研究中发现，HIF-1蛋白表达随乳腺癌恶性度升高而增加，且与浸润、淋巴结转移有关 泌尿外科解剖和生理38二. 研 究 现 状1. HIF-1在肿瘤细胞中表达位于4. 发现HIF-1-/-组剂量反应曲线较HIF-1+/+组明显左移,IC50也显著减少. 5.对肿瘤细胞的研究发现HIF-1-/-肿瘤细胞对放疗和化疗药物的敏感度都有所增加。 6.多药耐药基因MDR1是 HIF-1的靶基因。 泌尿外科解剖和生理394. 发现HIF-1-/-组剂量反应曲

13、线较HIF-1+/7.利用乏氧诱导肺腺癌细胞459表达HIF-1，发现p-gp和MRP随着HIF-1表达而增加，并且对表阿霉素和顺铂的耐药性增强。 8.国外的研究也发现，缺氧能导致p-gp和HIF-1过表达，从而产生对VP-16、博莱霉素和蒽环类耐药。 9.国外对卵巢癌的研究已表明突变型P53过表达会引起HIF-1表达升高. 泌尿外科解剖和生理407.利用乏氧诱导肺腺癌细胞459表达HIF-1，发现p-g待解决问题目前关于HIF-1与胃癌生物行为及多药耐药机制关系的研究报道甚少。 目前对于HIF-1与的研究多用基因转染方法，应用原代胃癌体外细胞药物敏感性进行研究的报道甚少泌尿外科解剖和生理41

14、待解决问题目前关于HIF-1与胃癌生物行为及多药耐药机制关 三.研究目标和研究内容1. 研究目标研究HIF-1蛋白表达与p-gp表达的相关性，探讨其与胃癌细胞多药耐药的关系。探讨HIF-1表达与胃癌生物学行为的关系 .探讨HIF-1蛋白表达与突变P53过表达的相关性 . 泌尿外科解剖和生理42 三.研究目标和研究内容1. 研究目标研究HIF-1蛋白表2. 研究内容 对例新鲜胃癌标本进行细胞纯化，短期原代培养，应用流式细胞技术和MTT法检测其对常用化疗药物的敏感性应用免疫组化技术检测60例胃癌石蜡标本P53、P-gp、HIF-1蛋白表达，并收集临床病理资料。泌尿外科解剖和生理432. 研究内容

15、对例新鲜胃癌标本进行细胞纯化，短期应用RT-PCR方法检测相同60例新鲜胃癌细胞HIF-1mRNA的表达水平。 应用TUNEL、荧光显微镜等方法检测化疗药诱导胃癌细胞凋亡后的形态学改变。泌尿外科解剖和生理44应用RT-PCR方法检测相同60例新鲜胃癌细胞HIF-1四. 技术路线HIF-1RT-PCR 免疫组化胃癌手术标本细胞分离、短期培养及流式技术检测化疗药物体外敏感性HIF-1、p-gp 、P53 免疫组化化疗药诱导胃癌细胞凋亡后形态学改变对结果进行统计分析泌尿外科解剖和生理45四. 技术路线HIF-1RT-PCR 免疫组化胃癌手术标本泌尿外科解剖和生理培训课件 实用性探讨HIF-1蛋白表达

16、与p-gp表达的相关性，可望从一新角度阐述耐药发生机制。 研究HIF-1表达与胃癌生物学行为的关系，探讨其作为一种新的独立预后参数的可能性。 探讨HIF-1蛋白表达与P53过表达关系有助于更好理解胃癌病理生物学特征。泌尿外科解剖和生理47 实用性探讨HIF-1蛋白表达与p-gp表达的相关性， 国外已有类似的文献报道。可行性手术标本充足 ，设备齐全，预实验结果 科学性泌尿外科解剖和生理48 国外已有类似的文献报道。可行性手术标本充足 ，设备齐全免疫组化判断标准：P53:无阳性细胞或阳性细胞 5 %为阴性, ( + ) , ( ) ， 强阳性( ) ，为（）。P-gp 为胞质和(或) 胞膜阳性,阳

17、性细胞 5 %为阴性,5 %15 %为+ , 16 %为 。HIF-1判断标准：为阴性，为（），为（），为（）泌尿外科解剖和生理49免疫组化判断标准：P53:无阳性细胞或阳性细胞 5 %为阴药物敏感性判断：高度敏感:抑制率 50 %;中度敏感:抑制率30 %50 %;不敏感:抑制率 30 %。 泌尿外科解剖和生理50药物敏感性判断：高度敏感:抑制率 50 %;中度敏感:抑制HIF-1阳性 HIF-1阴性p-gp 阳性p-gp 阴性HIF-1阳性 HIF-1阴性药物敏感性与HIF-1的关系泌尿外科解剖和生理51HIF-1阳性 HIF-1阴性p-gp 阳性p-gp 阴HIF-1表达与胃癌生物学行为

18、的研究 按临床病理分期、组织类型、淋巴结转移与否分组泌尿外科解剖和生理52HIF-1表达与胃癌生物学行为的研究 按临床病理分期、组织HIF-1蛋白表达与P53过表达关系 HIF-1阳性 HIF-1阴性P53 阳性p53阴性泌尿外科解剖和生理53HIF-1蛋白表达与P53过表达关系 HIF-1阳性 H 部分预实验结果泌尿外科解剖和生理54 部分预实验结果泌尿外科解剖和生理5胃癌中突变p53蛋白的表达 （10*20倍） 细胞核内表达 泌尿外科解剖和生理55胃癌中突变p53蛋白的表达 （10*20倍） 细胞核内表胃癌中p-gp的表达 （10*20倍） 细胞膜/浆表达泌尿外科解剖和生理56胃癌中p-gp的表达 （10*20倍） 细胞膜/浆预实验结果小结基本掌握胃癌细胞分离和短期原代培养的方法原代胃癌细胞法体外药物敏感实验基本掌握免疫组织化学的实验流程泌尿外科解剖和生理57预实验结果小结基本掌握胃癌细胞分离和短期原代培养的方法原凋亡细胞DNA片断电泳分析 1.未加化疗药组 2.顺铂1ppc 24小时3.顺铂 10ppc24小