FL2200 型液相色谱仪标准操作规程

1、.审 核日 期批 准日 期颁 发生 效日 期分 发1、目的：建立一个 FL2200 型液相色谱仪的标准操作规程，以标准其操作。2、范围：本规程适用于本公司的 FL2200 型液相色谱仪标准操作。3、职责：仪器操 负责该仪器的操作、清洁，并及时向上级、计量管理员汇报仪器的异常情况；仪器维护保养人：负责仪器定期清洁、保养工作；计量管理员：负责维护该仪器的正常运行，指导并协助培训仪器的操作、保养，及时处理设备的异常情况。4、操作程序：4.1：根本要求4.1.1 安装仪器的房间应通风良好,否那么会引起中毒或不良刺激,也可能引起火灾,因为液相色谱仪所使用的溶剂大多是易燃且有毒的.4.1.2 严禁在仪器附

2、近吸烟,使用明火或其他火源,或安装其他任何发射或可能发射火花的设备,房间内应配备灭火装置或设备,以备紧急时防止火灾的发生.4.1.3 房间内应配备自来水龙头或其他冲洗设备.如果溶剂进入眼睛或有毒溶剂溅到皮肤上,应立即用清洁的水冲洗.4.1.4 防止在有腐蚀性气体或大量粉尘的地方安装本仪器,否那么会影响仪器正常运转,并缩短仪器使用寿命.左右,建议安装空调. 4.1.6 电源电压为交流 220V,功率为 200W;房间内有良好的实用文档.接地线.实用文档.配制流动相,配好后用有机膜过滤并超声 15 分钟配制乙腈:水=1:9；配制乙腈:缓冲盐称取 2.18g 溶解在 1000ml娃哈哈水中=1：94

3、.2.2 翻开泵、检测器和电脑，启开工作站；设置检测样品所需的各种条件；点击新建,创立工程，设置工程名称、样品名称、实验人等，点下一步，设定分析方法，下一步，设定仪器条件，下一步，设定检测器，下一步，设定仪器条件，下一步，工程创立完毕，完成。上流动相停泵状态下把不锈钢吸滤头放于 520把不锈钢吸滤头放于流动相中翻开放空阀点击系统清洗5分钟后泵停顿关闭放空阀点击“泵启动稳定 30 分钟查看基线点击工作站界面的开场，然称取 2mg 样品，溶解在 50ml 流动相里，用超声波超声让样品完全溶解就行。再用一次性针头过滤器把样品过滤到称量瓶中，进样 10-20L。实用文档.停泵状态下把不锈钢吸滤头放于1

4、0%乙腈水里翻开放空阀点击系统清洗5分钟后泵停顿关闭放空阀按“泵启动10%乙腈水过渡 40 分钟可以小流量长统清洗5 分钟后泵停顿关闭放空阀点击“泵启动清洗 30 分钟。甲醇：水=3:7 过滤下就可以用了，一天清洗一次 30-60 分钟就行。一次配制 300ml就行，太多流动相放久了容易变质。5、仪器的使用维护及本卷须知输液泵.1 高压输液泵的主要技术性能实用文档.泵类型双柱塞串联往复泵流量设定范围流量设定值误差 20Mpa2%2.0019.999ml/min 范围内，使用流量校正系数补偿后流量重复性误差 柱压Mpa压力示值误差1Mpa 或2%压力保护限值误差 1Mpa 在540MP范围内泵的

5、使用和维护本卷须知为了延长泵的使用寿命和维持其输液的稳定性，必须按照以下本卷须知进展操作：蒸馏，而常用的方法是滤过，可采用Millipore 滤膜或等滤器。泵的入口都应连接实用文档.保存和有利于泵维护的溶剂对于反相键合硅胶固定相，可以是甲醇或甲醇实用文档.体或密封环，最终产生漏液。漏液。流动相应该先脱气，以免在泵内产生气泡，影响流量的稳定性，如果有大量气泡，泵就无法正常工作。如果输液泵产生故障，须查明原因，采取相应措施排除故障：使泵在较大流量如 5ml/min下运转，将气泡排尽，也可用一个 50ml 针筒在泵出口处帮助抽出气体。另一个可能原因是密封环磨损，需更换。压力和流量不稳。原因可能是气泡

6、，需要排除；或者是单向阀内有异物，可卸下单稀酸如 4mol/L硝酸内迅速除去微生物，或将盐溶解，再立即清洗。有泄漏。检查堵塞或泄漏时应逐段进展实用文档.进样器进样装置要求：密封性好，死体积小，重复性好，保证中心进样，进样时对色谱系统的压力、流量影响小。阀的磨损。转动阀芯时不能太慢，更不能停留在中间位置，否那么流动相受阻，使冲洗，或先用能溶解样品的溶剂冲洗，再用水冲洗。色谱柱5.3.1 柱型号:4.6*250mm,5um柱的使用和维护本卷须知损坏。在色谱操作过程中，需要注意以下问题，以维护色谱柱。 部是水，反之亦然。 去留在柱头的杂质。否那么反冲会迅速降低柱效。 实用文档.样器前面连接一实用文档

7、.硅胶“饱和，防止分析柱中的硅胶基质被溶解。 理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。 系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20 倍左右，即常规分析需要 5075ml。二氯甲烷和甲醇依次冲洗，然后再以相反顺序依次冲洗，所有溶剂都必须严格脱水。一氯甲烷或氯仿依次冲洗，再以相反顺序依次冲洗。如果下一步分析用的流动相在甲醇乙腈冲洗时重复注射 100200l 四氢呋喃数次有助于除去强疏水性杂质。四氢呋喃与乙腈或甲醇的混合溶液能除去类脂。 绝对制止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。 效降低或色谱峰变形，

8、那么可能柱头出现塌陷，死体积增大。在后两种情况发生时，小心拧开柱接头，用干净小钢将柱头填料取出 1实用文档.2mm 高度注意把被污染填料取净再把柱内填料整平。然后用适当溶剂湿润的固定相与柱内一样填满色谱柱，压平，再拧紧柱接头。这样处理后柱效能得到改善，但是很难恢复到新柱的水平。使用完后应用无盐流动相冲洗。含卤族元素氟、氯、溴的化合物可能会腐蚀不锈钢管道，不宜长期与之接触。装在 HPLC 仪上柱子如不经常使用，应每隔 45 天开机冲洗 15 分钟。紫外检测器紫外检测器技术信息项目10mm基线噪音基线漂移0.5*10AU(波长为 254nm、流过池内为空气)1*10AU/h波长为 254nm、流过

9、池内为空气与检测器有关的故障及其排除流动池内有气泡线上出现许多线状“峰，这是由于系统内有气泡，需要对流动相进展充分的除气，实用文档.或者启动输液泵的同时，用手指紧压流动池出口，使池内增压，然后放开。可反复操作数次，但要注意不使压力增加太多，以免流动池破裂。实用文档.流动池被污染洗检测池，要注意溶剂的互溶性；如果污染严重，就需要依次采用 1mol/L 硝酸、水和新鲜溶剂冲洗，或者取出池体进展清洗、更换窗口。光源灯出现故障紫外或荧光检测器的光源灯使用到极限或者不能正常工作时，可能产生严重噪音，基线漂移，出现平头峰等异常峰，甚至使基线不有回零。这时需要更换光源灯。倒峰时的压力变化，或者由于样品溶剂与

10、流动相不同所引起的。流动相5.5.1 流动相的性质要求实用文档.低毒性等特征。所以选择流动相时应考虑以下几个方面：硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。累时。 UV 动相，以提高灵敏度。使柱压降增加，使别离时间延长。最好选择沸点在 100以下的流动相。化别离，且会使柱子恶化。样品易于回收。应选用挥发性溶剂。5.5.2 流动相的脱气HPLC 气泡还会影响柱的别离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至使无法检测。动相甚至固定相如烷基胺反响。溶解气体还会引起溶剂pH的变化，对别离或分析结果带来误实用文档.5.5.3 流动相的滤过用滤膜过滤时，特别要注意分清有机相脂溶性滤膜

11、和水相水溶性滤膜。有机滤水溶液，严禁用于有机溶剂，否那么滤膜会被溶解！溶有滤膜的溶剂不得用于HPLC。对于混合流动相，可在混合前分别滤过，如需混合后滤过，首选有机相滤膜。5.5.4 流动相的贮存的溶剂如用于 HPLC 引起组成变化，也防止氧和二氧化碳溶入流动相。样品测定5.6.1 次新开检新品种时几乎都须调整流动相按经历，主峰一般应调至保存时间为 615重现性更不容易到达，请注意充分平衡柱。5.6.2 烷化处理。实用文档.5.6.3 30 的测定。5.6.4 进样量：药品标准中常标明注入 10ml，而目前多数 HPLC 系统采用定量环10ml、20ml 和 5计算：由于有些对照品标示含量的方式与样品标示量不同，有些是复合盐、有些含水量不同、有些是盐基不同或有些是采用有效部位标示，检验时请注意。5.6.5 含水量不同、有些是盐基不同或有些是采用有效部位标示，检验时请注意。5.6.6 仪器的使用：流动相滤过后，注意观察有无肉眼能看到的微粒、纤维。有请重新滤过。柱在线时，增加流速应以的增量逐步进展，一般不超过1ml/min，反之亦然。否那安装柱时，请注意流向，接口处不要留有空隙。样品液请注意滤过注射液可不需滤过后进样，注意样品溶剂的挥发性。测定完毕请用水冲柱 1 小时，甲醇 30 分钟。如果第二