干化学应用河南医科大学第一附属医院(老区)

1、干化学应用实验室专员房圣亚主要内容干化学原理V350分析仪的日常保养常见应用问题解析美国强生公司是世界上最大的、最具综合性的医疗保健品制造商，为消费者、制药业和医疗器材及诊断市场提供全面的专业化服务。2010年销售额达到675亿美元，在全世界的医疗保健产品生产企业中名列第一。全球雇员超过12万。公司总部位于美国新泽西州，拥有多于250家子公司，为57个国家的市场提供产品和专业化服务。产品覆盖制药、医疗器材和保健品。在外科缝线、OTC药品、医疗器械及诊断领域居于国际领先地位。2010年在财富全球最受景仰的公司评选中，名列第三。全球仅有的五家AAA信用级工业公司之一。强生公司3强生OCD主要产品

2、安全输血 血型分析 血液筛查 实验室诊断 临床生化 临床免疫 实验室自动化* ValuMetrix实验室管理咨询服务* Veridex肿瘤分子诊断* 注册中MicroSlide 多涂层薄膜干片技术扩散层扩散层试剂层试剂层指示剂层指示剂层支持层支持层标本MicroSlide多涂层薄膜干片技术：将所需试剂预固相在多层薄膜和邮票大小的透明支持基垫之上。当血浆，血清，尿液或脑脊液与这些已含化学物质的干式薄膜接触时发生反应并对反应信号进行测量。干片分类CM/RTPMIR干片钠钾氯地高辛苯巴比妥卡马西平苯妥因C反应蛋白胆固醇 甘油三酯总蛋白 白蛋白高密度酯蛋白 脂肪酶尿蛋白 脑脊液蛋白谷丙转氨酶 谷氨酸转

3、移酶碱性磷酸酶 r谷氨酰转酞酶乳酸脱氢酶 肌酸激酶肌酸激酶同工酶 尿素氮肌酐 尿酸 乳酸 铁、总铁结合力磷 锂淀粉酶胆碱脂酶总胆红素结合/非结合胆红素血氨乙醇水杨酸茶碱醋氨酚镁二氧化碳比色/速率法干片免疫速率法干片电极法干片 指示剂层 支持层扩散层试剂层比色/速率法干片通过测定干片颜色变化来确定化合物浓度 指示剂层 支持层 多孔结构，允许标本通过 均匀分布标本 过滤大分子（蛋白质，脂肪等） 去除干扰物质（溶血，黄疸等） 提供反射测定的背景扩散层试剂层扩散层比色/速率法干片结构试剂层 扩散层 试剂层指示剂层 支持层 包含检测反应所需的酶，缓冲液，催化剂等 多层试剂，控制反应顺序比色/速率法干片结

4、构葡萄糖干片指示剂层 扩散层 试剂层 指示剂层 支持层试剂层产物与指示剂层中的染料结合时，形成有色复合物，其与分析物浓度成正比。比色/速率法干片结构支持层 扩散层 试剂层 指示剂层 支持层 提供反应支持基垫 允许光路自由通过比色/速率法干片结构反射光的测定干扰物质反光背景成色层生成纯净的反射光光源滤光片接收器比色/速率法干片功能演示湿化学 ： 采用透射光度法 遵循朗勃比尔定律干化学 ： 采用反射光度法 遵循Williams Clapper定律吸光度浓度反射光浓度透射与反射接收器接收器透射 与 反射光线经过干扰物质 光线不经过干扰物质 受影响 不受影响尿酸其他的优异抗干扰能力 MicroSlid

5、e多层涂膜技术可以针对不同检测项目使用加以不同成份的薄膜以达到最佳的检测结果某些干片中有清道夫层如尿酸试剂去除维他命C 和镁干片去除钙的干扰 某些干片试剂层下有半透膜层（如尿素氮）：去除药物干扰半透膜尿素氮 竞争性与非竞争性免疫速率反应模式 需要液体反应底物 地高辛、苯妥因、苯巴比妥、CRP、 卡马西平免疫速率法干片电极法干片 离子选择电极技术 直接法测定两电极间电势不同 钾，钠，氯18盐桥S2S1S3S4aIar离子载体膜M+ ClAgCl Ag离子载体膜M+ ClAgClAgaIarVV干片常规已知浓度液体(参比液)待测液体(标本)离子选择电极(ISE)盐桥ar电极法干片19干片在接触点被

6、穿透测量电压读数通过电压读数计算出分析物的浓度旗舰测试项目 K，Na，Cl 直接离子选择电极20Aqueous Solution (Serum)水相(血清)Non-aqueous solution(Lipids, Proteins)非水相(血脂,蛋白质)以间接法检测的容量以直接法检测的容量间接法无法对血脂和蛋白质进行校正.21组成成分 原始体积水相9.3 ul非水相 0.7 ul总样本体积 10.0 ul按照血清中, 非水相占有的体积约为7 %计算标本电解质排斥效应22组成成分 原始体积稀释液 990.0 ul水相 9.3 ul非水相 0.7 ul总样本体积 1000.0 ul稀释后的正常人标

7、本(100倍稀释)稀释比率 = 最终体积 / 原始体积总的血清稀释比率 = 1000 / 10 = 100 倍水相稀释比率 = (990 + 9.3) / 9.3 = 107.45 倍电解质排斥效应23正常人标本Na=140K = 4.0稀释 1:100检测计算Na= 140K = 4.0结果Na = 130.3K = 3.72单位：mmol/LNa = 140 /107.45100 = 130.3 mmol/LK = 4/107.45100 = 3.72 mmol/L直接离子选择电极法检测间接离子选择电极法结果电解质排斥效应蛋白质增高脱水巨球蛋白血症多发性骨髓瘤高球蛋白血症肉芽肿病某些胶原病

8、血脂增高甲状腺机能减退肾病综合症糖原过多症糖尿病急性胰腺炎直接法 vs. 间接法 ISE疾病状态对标本的影响血浆蛋白影响血浆蛋白为部分水溶性，故高浓度的蛋白会造成与血脂类似地影响 4 8 12 160.800.901.00检测结果总蛋白直接电极法间接电极法 干式生化系统的抗干扰性（黄疸）20018016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000加入胆红素 BILIRUBIN ( mg/dL)( 最终结果 /原始结果)= 结果离散度 %*CREAASTPHOS# LDH #ALKPCaPROTECO2#MgCHOLGLUA

9、LT*TRIG*NA*CL*UREA*CK*AMYL*ALB*URCA*FEDxxxxx Dxxxxxxx 某湿生化系统文件来源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000BILIRUBIN A

10、DDED ( mg/dL)结果离散度%PROT*ALB*ALKP*AMYL*AST*ECO2*CA*CHOL*CREAT*GLU*K*LDH*Mg*NA*CL*URCA*UREA*TRIG*CK200VITROS 350 干式生化系统的抗干扰性（黄疸）文件来源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.20018016

11、014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000加入 脂肪 ( INTRALIPID Added mg/dL)结果离散度%*BILIURCAPHOSGLUPROTMgCHOLALBCaCREAALKPAST#ALT*UREA*CK*CL*K*GGT*NA*CO2# LDH 109% AT 750 MG/DLCxxxxx 某湿生化系统 干式生化系统的抗干扰性（脂血）文件来源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instrumen

12、ts- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D. 干式生化系统的抗干扰性（脂血）18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000LIPEMIA ( INTRALIPID Added mg/dL)结果离散度%*ALB*ALKP*ALT*AMYL*AST*BICARB*BIL*CAL*CK*CL*CHOL*CREAT*GLU*K*LDH*Mg*Na*PHOS*PROT*URCA*UREAVITROS 35

13、0200文件来源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.200 18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000加入 血红素 (as hemoglobin mg/dL)结果离散度%Hxxxxx xxx 某湿生化系统T.BILICPKMgA

14、LBPHOSUATRIGALTTPALKPGGTAMYL*CL*GLU*CHOL*GLOB*CREAT*D.BILI*BUN*CO2*NA*CA 干式生化系统的抗干扰性 （溶血）文件来源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.18016014012010080604020100 200 300 400 500 60

15、0 700 800 900 1000HEMOLYSATE ADDED (as hemoglobin mg/dL)结果离散度%*ALKP*AMYL*ECO2*CAL*CK*CL*CREAT*NA*URCA*UREABILIPHOSPROTALBTRIG GLU CHOLMg200VITROS 750强生干式生化系统的抗干扰性（溶血）文件来源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder,

16、M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.主要内容干化学原理V350分析仪的日常保养常见应用问题解析每日保养需要做的保养:清空:废稀释杯和废吸头箱空试剂盒箱废干片箱检查: 加样架是否脏了有无损坏补充:稀释杯,吸头试剂参比液,稀释液,免疫冲洗液质控: 做所有机上项目的质控每日保养清洁加样架和通道每日保养更换各种辅助试剂:选择相应的子程序仪器自动准备放入新的辅助试剂参比液,洗液都是记数为300滴稀释液是2-10ML每周保养需要做的保养:清洁:加样架平台,加样架运动轨道吸头停止位加样位的样品杯限位器触摸屏和键盘检查:加样臂的运动路径主控计算机的空气滤网每周保养加样架平台加样架运

17、动轨道吸头停止位加样位的样品杯限位器每周保养加样臂的运动路径每周保养空气滤网必要的保养应做的保养:须更换的:保湿剂,干燥剂 反射光度计的灯泡清洁: 废干片通道 推片尺和干片通道需做的: 用黑白参考片做的光 路校正测试必要的保养必要的保养进入Diagnostic-setup/adjust-Reflectometer Iris调整灯电压(至8V以下)必要的保养用黑白参考片做的光路校正测试Diagnostic-setup/adjust-Correction Factor输入黑白参考片的反射系数按提示将参考片放入孵育盘更新生成的校正系数主要内容干化学原理V350分析仪的日常保养常见应用问题解析45肌酐

18、为什么有时候肌酐不出结果，报DP,稀释后结果反而不高？常见应用问题解析-肌酐反应原理两点速率法：滴加样本后，干片进行孵育。反应初期样本重的内源性肌酸被氧化，所产生的反射信号值在两个时间点测定，测定的反射强度差值与样本中的肌酐 (CREA) 浓度成正比。46常见应用问题解析-肌酐已知干扰物质血清和血浆 肌酸：肌酐 (CREA) 浓度为 133 mol/L 时，大于 707 mol/L的肌酸浓度将会显示“DP”代码（因为提高很多的肌酸浓度可能引起过度的背景密度）。 对于没有显示错误代码的样本，肌酸引起的残留偏差将小于 13.3 mol/L。 肌酐 (CREA) 浓度为 1237 mol/L时，大于 88 mol/L 的肌酸浓度将会显示“DP”代码。 对于没有显示错误代码的样本，肌酸引起的残留偏差将小于 2%。47肌酐 常见应用问题解析-肌酐处理方法稀释样本如果肌酐浓度超出系统可报告范围，或者分析仪显示“DP”代码（指示高背景密度，通常是因为肌酸浓度升高所致），则按如下步骤操作：手工样本稀释1. 使用 VITROS 7% 牛血清白蛋白溶液稀释样本；2. 重新分析；3. 结果乘以稀释因子，获得原始样本中肌酐浓度的估计值。48CK/CKMB为什