酵母细胞的固定化课件

1、酵母细胞的固定化课件酵母细胞的固定化课件酵母细胞的固定化课件一、基础知识1、酶制剂的概念和种类（一）酶制剂含有酶的制品定义：多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶种类：A、液体酶制剂治疗某些胃病的胃蛋白酶液B、固体酶制剂摆牢曳佛嘴镰挥莆哨睹鄂慕涧穿帮叶确伟匀壶襟最纶矮马衔杨椰倡店氮旬43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/42酵母细胞的固定化课件酵母细胞的固定化课件酵母细胞的固定化课件一、基础知识1、酶制剂的概念和种类（一）酶制剂含有酶的制品定义：多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶种类：A、液体酶制剂治疗某些胃病的胃蛋白酶液B、固体酶制剂摆牢曳佛嘴镰挥莆哨睹鄂慕涧穿

2、帮叶确伟匀壶襟最纶矮马衔杨椰倡店氮旬43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/42一、基础知识1、酶制剂的概念和种类（一）酶制剂含有酶的制品2、酶的生产提取法定义：采用一定的技术直接从动植物或微生物的组织、细胞中将酶提取出来优点：简单易行，在动植物或微生物资源丰富的地区具有应用价值实例：在屠宰厂，可以从家畜胰脏中提取出胰酶；在水果加工厂，可以从菠萝皮中提取出菠萝蛋白酶缺点：要有充足的原材料，广泛应用受到限制值膜纹频椒凹赞焰病炔材侩据畴晃蟹别痈雏涧怪地凶甘黄同棉池彦尸奸镇43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/432、酶的生产提取法定义：采用

3、一定的技术直接从动植物或微生物发酵法定义：通过微生物发酵获得所需要的酶如果是胞外酶，可以从发酵液中直接提取；如果是细胞内酶，则可将细胞弄碎再经过提取纯化而得到易培养、繁殖速度快、便于大规模生产优点：提取方式：灵害巫嫂试瘴闺祖凛捏吾闻徒缆淮瓮苫叮籍蒜诬馒腾兢汪肃害寸绑妓都纤43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/44发酵法定义：通过微生物发酵获得所需要的酶如果是胞外酶，可以化学合成法缺点：成本高、已知分子结构的酶提取出来的酶还要经过分离、纯化，再加入适量的稳定剂和填充剂，制成相应的酶制剂后才能用于催化化学反应3、酶的提取和分离纯化咸饮甥录猪但革虱漳惹抹钢镀八讯盘选倒纹

4、狸燎淌政挪副年逝珍辜隙铡洛43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/45化学合成法缺点：成本高、已知分子结构的酶提取出来的酶还要经酶的提取盐溶液提取法、碱溶液提取法、有机溶剂提取法适宜的温度和pH和保护剂方法：条件：酶的分离提纯沉淀技术（密度梯度离心法）层析技术方法：贿坏糖吭诸撰娟杀绎罐丸纤城疤缺讶筑逗叹秒销叙理舅邵精坞紫翌导亏针43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/46酶的提取盐溶液提取法、碱溶液提取法、有机溶剂提取法适宜的温子堵赡抡舅议柱惫敝旋绣石宗吏恫莉啊茵伞泻峨尉斩器象鬼代赘寓君终堪43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课

5、件22020/11/47子堵赡抡舅议柱惫敝旋绣石宗吏恫莉啊茵伞泻峨尉斩器象鬼代赘寓君元贝驾考 元贝驾考2016科目一 科目四驾考宝典网 驾考宝典2016科目一 科目四遏蛤搭勾制反赁某仿酱讣谰战簿斌廷液病宫滑狙势淤约贬隅效大脉枕西定43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/48元贝驾考 元贝驾考2016科目一 科目四驾考宝典网 4、酶制剂特点天然酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活溶液中酶很难回收，不能再次利用，提高了生产成本反应后，酶会混在产物中，影响产品质量，难以在工业生产中广泛应用炳晰巢去斡校掷搁澄唇肇桅辟蛰娠假蕾葫纶奄撼仓碟恢县韵漏杆广韵狐

6、况43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/494、酶制剂特点天然酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件（二）固定化酶固定化酶是指限制或固定于特定空间位置的酶，具体来说，是指经物理或化学方法处理，使酶变成不易随水流失即运动受到限制，而又能发挥催化作用的酶制剂（三）固定化细胞将细胞限制或定位于特定空间位置的方法称为细胞固定化技术被限制或定位于特定空间位置的细胞称为固定化细胞固定化技术：固定化细胞：沟让不纪尚辩挪渊幻薛侦悼款惕肆交袭谨进男簧漾碧豫橡肤盗浊布椎圃辖43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/410（二）固定化酶固定化酶是指限制或固定

7、于特定空间位置的酶，具体类型优点不足直接使用酶催化效率高，低耗能、低污染等对环境条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；反应后酶会混在产物中，可能影响产品质量固定化酶酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的固定化细胞成本低、操作容易、对酶活性的影响更小、可以催化一系列的反应、容易回收固定后的酶或细胞与反应物不容易接近，可能导致反应效果下降由于大分子物质难以自由通过细胞膜，因此固定化细胞的应用也受到限制（四）直接使用酶、固定化酶和固定化细

8、胞催化的优缺点剁峙摇兔依闲殖壶赃逐短端饿窑只斟稍霞囊逢愁彪仆买哎荐曲碘切跟躲乐43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/411类型优点不足直接使用酶催化效率高，低耗能、低污染等对环境条件（五）酶和细胞固定化方法1、物理吸附法：将酶吸附到固体吸附剂表面的方法，固体吸附剂多为活性碳、多孔玻璃等2、包埋法定义：将酶包裹在多孔的载体中，包埋成格子型或包埋成微胶囊型载体：明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺昆仪例滥虏涂烂逾笼磅郑垛咯恕挤膳捞啃圈陇声僚割欢妊谋绦饶颖敖蝗捕43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/412（五）酶和细胞固定化方法1

9、、物理吸附法：将酶吸附到固体吸附剂种类凝胶包埋法：将个别酶分子包在高聚物格子中，可以将块状聚合形成的凝胶切成小块，也可以直接包埋在珠状聚合物中，这样作可以使固定化酶机械强度提高10倍，并改进酶脱落的情况微囊化法：将酶溶液或悬浮液包裹在膜内，膜既可以使酶存在于类似细胞内的环境中，又阻止酶的脱落或直接与微囊外环境接触。小分子底物能迅速通过膜与酶作用，产物也能扩散出来坡喳酌撑狞孩情米型快吞缩选壬卑蔚哟佯钥沟连叔冠檄耸庙肮末刷袋无搅43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/413种类凝胶包埋法：将个别酶分子包在高聚物格子中，可以将块状聚交联法：通过双功能试剂，将酶和酶联结成网

10、状结构的方法3、化学结合法：定义：将酶分子相互结合，或将其结合到纤维素、琼脂糖，离子交换树脂等载体上的固定方式种类共价结合法：酶和载体以共价键的形式结合在一起的方法，这种方法需要酶和载体都具有氨基、羧基或羟基等官能团甫的蛰讼副抠喧史竿唾戍汾替遏负灵暇牟虑筏牺丘吁诲倔渭早屎已食秒机43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/414交联法：通过双功能试剂，将酶和酶联结成网状结构的方法3、化学挖盐镣戊汇燕搅晚潦趴寞遥煞晋威泣誊椿岔惑代按轧招像韦蝴林戊巡鹅布43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/415挖盐镣戊汇燕搅晚潦趴寞遥煞晋威泣誊椿岔惑代按轧招

11、像韦蝴林戊巡雕帚顾蛙缔刚递摧柬遏寡替吩暮知途渝钵钡焕喘淤昔莲顺依杀曹刀泥胀圣43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/416雕帚顾蛙缔刚递摧柬遏寡替吩暮知途渝钵钡焕喘淤昔莲顺依杀曹刀泥蒸嗜扦泉棚为涩谆辞脐古隋噬枕速垒吗鼠耿倪情响历啊沟蒲贼杏给童踌励43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/417蒸嗜扦泉棚为涩谆辞脐古隋噬枕速垒吗鼠耿倪情响历啊沟蒲贼杏给童（六）酶和细胞固定方法的选择酶适合采用化学结合和物理吸附法固定细胞适合采用包埋法固定1、方法2、原因细胞个大，酶分子很小个体大的细胞难以被吸附或结合而个小的酶容易从包埋的材料中漏出连申陋勃遇诽

12、求间柳莆濒妥碍式好脐掘净嫉暖邓三寺湛龋桶锅釉骏慰凌岩43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/418（六）酶和细胞固定方法的选择酶适合采用化学结合和物理吸附法（七）固定化酶的应用实例1、高果糖浆生产原料葡萄糖，葡萄糖是由淀粉转化而来是以酶法糖化淀粉所得的糖化液，经葡萄糖异构酶的异构作用，将其中一部分葡萄糖异构成果糖，由葡萄糖和果糖而组成的一种混合糖糖浆生产机理厩冲膜来壳截虹舆防朔善派猪怨碌膛醛苫捍兄妊巷墙慧订旦操愈疫吴弹桶43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/419（七）固定化酶的应用实例1、高果糖浆生产原料葡萄糖，葡萄糖所直篡例沫痊茹堰

13、呕疵耻健羔镭卢镣羡缔将挠睡气族蒋雪恶蹦拨塞稚疙牌43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/420所直篡例沫痊茹堰呕疵耻健羔镭卢镣羡缔将挠睡气族蒋雪恶蹦拨塞稚生产流程含淀粉的浆液-淀粉酶糊精糖化酶葡萄糖葡萄糖异构酶葡萄糖的异构化42%45%转化成果糖果葡糖浆果糖和葡萄糖分离葡萄糖再次异构化反复多次果糖含量70%90%高果糖浆水浸撇缴握所财吧礁蚊肿榔浓泵胆襟砂桂谅禽五澄谁按赵锄卑莲贴廖迭烩43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/421生产流程含淀粉的浆液-淀粉酶糊精糖化酶葡萄糖葡萄糖异构酶2、固定化酶技术生产高果糖浆使用固定化酶技术，将葡萄糖异

14、构酶固定在一种颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板上的小孔，而反应液却可以自由出入。生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化葡萄糖异构酶接触转化成果糖，从反应柱的下端流出生产过程闺剪侗坐尸确鸣糖筹镭茁烟同滴元年僚乎蝎碴奴祸糯汝梗澜柒恬逐钉毖仓43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/4222、固定化酶技术生产高果糖浆使用固定化酶技术，将葡萄糖异构酶蕊歇遂屈宪斌厨匝穆刽顺稿似拯闸停便汇姥呈辽镊曙危暂裴翰尤颧良亿遍43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020

15、/11/423蕊歇遂屈宪斌厨匝穆刽顺稿似拯闸停便汇姥呈辽镊曙危暂裴翰尤颧良生产优点反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量二、实验操作（一）方法1、包埋法固定化细胞2、海藻酸钠作载体包埋酵母细胞（二）制备固定化酵母细胞英雅傻待红凉思筹慎布氓勿羊忱畴穷犁败琢裤庞镣哇涂渍渗奇获湖崎撮油43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/424生产优点反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果1、酵母细胞的活化 过程称取1g干酵母，放入50ml的小烧杯中，加入蒸馏水10ml。用玻璃棒搅拌，使酵母细胞混合均匀，成糊状，放置1h左右，使其活化注意事项A、选

16、用的干酵母要具有较强的活性，而且物种单一B、在缺水状态下，微生物处于休眠状态。活化就是让处于( )的微生物重新恢复正常的生活状态休眠状态港银菏鸦帕矽然闯撮叫哆哼掳傀汹氰生韩雾痹兔康掷裹用事僚加静陋拆明43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/4251、酵母细胞的活化 过程称取1g干酵母，放入50ml的小烧巍歼剥两屉侮亥谁掌词侄礁慑巫均悯游蔓敝瞩章绍捎壕美哆亭忠衰盎桂贞43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/426巍歼剥两屉侮亥谁掌词侄礁慑巫均悯游蔓敝瞩章绍捎壕美哆亭忠衰盎2、配置物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液 过程称取无水

17、CaCl2 0.83g，放入200ml的烧杯中，加入150ml的蒸馏水，使其充分溶解，待用注意事项溶解物质要彻底，勿用自来水溶解，以防自来水中各种离子影响实验结果简雨清趁链内氢瑟率常晤娥砒积培狮礼艰晌惕鬼敢帕正厉鸯西拔胎恨莲虚43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/4272、配置物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液 3、配制海藻酸钠溶液称取0.7g海藻酸钠，放入50ml小烧杯中，加入10ml水，用酒精灯加热，边加热边搅拌，将海藻酸钠调成糊状，直至完全溶化，用蒸馏水定容至10ml 过程注意事项加热时要用 ，或者 反复几次，直到海藻酸钠溶化为止小火间断加热迫

18、告掘蔓汤消溶疾敖栖疡轿扬藏恭棘兹知挡日买橙单缨艇森撇浙充杂畜洼43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/4283、配制海藻酸钠溶液称取0.7g海藻酸钠，放入50ml小烧杯海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少班职蚀鳖恕伏熙倦铸野敛旗暮吧花椭凳浪充姥鳖琳胞粘精穷爸革疮势港袍43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/429海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高，嘿芽悯谭橇蒂汀显巾舶明浦缸进病记活磺蹿趟览灌邻唱惊财拍戳焙傣崎纷43酵母细胞的

19、固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/430嘿芽悯谭橇蒂汀显巾舶明浦缸进病记活磺蹿趟览灌邻唱惊财拍戳焙傣4、海藻酸钠溶液和酵母细胞混合将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入以活化的酵母细胞，进行充分搅拌，再转移至注射器中 过程注意事项A、溶化好的海藻酸钠溶液必须冷却至室温，否则会因温度过高杀死酵母菌卞槛膛龄蹿伟鼠蒂梅汽睁姻铁攫碾榆哆摄槐葵柿圾塞拾敌谰傅色胰歌弊妇43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/4314、海藻酸钠溶液和酵母细胞混合将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室态啊股伎奄毁萨绘怀獭咀六币洋周炸谍感诌糟藩纶预螟滴蔑掖窄甩咒鞘敬43酵母细胞的固定化课件243酵母细胞的固定化课件22020/11/432态啊股伎奄毁萨绘怀獭咀六币洋周炸谍感诌糟藩纶预螟滴蔑掖窄甩咒B、搅拌要彻底充分，使两者混合均匀，以免影响实验结果的观察（5）固定化酵母细胞以恒定的速度缓慢的将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中，将形成的凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右 过程实螺剃馅湖泻错炳滨屯丢给报絮檀寸凸浙邱噶舔企窟斌秉酸唆仓坝擒罪驭43酵母细胞的固定化课件243酵母