丹参酚酸B的荧光特性研究

1、丹参酚酸B的荧光特性研究【摘要】目的研究丹酚酸B的荧光性质。方法采用大孔树脂吸附和醋酸乙酯萃取，自丹参药材中别离丹酚酸B，采用荧光扫描确定其激发波长和发射波长，考察pH、温度及光照时间对其荧光强度的影响。结果丹酚酸B的激发波长和发射波长分别为394n和501n。pH酸性、进步温度和延长光照时间可进步丹酚酸B的荧光强度。结论丹酚酸B在酸性条件下稳定，温度和光照可加强其荧光效应。【关键词】丹酚酸B；荧光光谱；稳定性FluresenePrpertiesfSalvianliAidBinRtfSalviailtirrhizaBge.Abstrat：bjetiveTresearhthefluresenep

2、rpertiesfsalvianliaidB.ethdsTseparatesalvianliaidBfrthertfSalviailtirrhizaBge.byar-retiularresinadsrptinandaetylesterextratin,sanitsexitatinandeissinavelengthbyfluresenespetrphteter,inspettheeffetfpH,teperatureandilluinatintienitsflureseneintensity.ResultsItsexitatinandeissinavelengthererespetively3

3、94nand501n.Aid,heatingandilluinatinprteditsflureseneintensity.nlusinSalvianliaidBasstableinaidnditin,heatingandilluinatinerehelpfultitsflureseneeffet.Keyrds：SalvianliaidB;Fluresenespetru;Stability光动力疗法PhtdynaiDiagnsisTherapy是肿瘤诊断和治疗的有效新方法，其中光敏剂的选择是关键。目前临床常用的光敏剂为多种卟啉类衍生物混合物，给药后需避光12个月，给患者带来较大不便1。故从天然

4、产物中寻找毒副作用小的新型光敏剂已成为研究的热点。中药含有多种活性化合物，已有文献报道补骨脂素、姜黄素、大黄素等具有光敏活性2。中药丹参SalviailtirrhizaBge.中有效成分有丹参酮和丹酚酸，前者的荧光性质已有报道3。由于丹酚酸Salvianliaids是水溶性有效成分，以丹酚酸B含量最高4。丹酚酸B是由三分子丹参素与一分子咖啡酸缩合而成，其构造如图1所示。分子构造中存在较多共轭环，势必对其光学活性产生一定影响。有关此方面的研究尚无文献报道。为了探究丹酚酸B的光敏活性，本实验对其荧光性质进展了研究。1材料与方法1.1材料与试药丹参药材湖北产，60减压枯燥后，粉碎过40目筛，HPD1

5、00河北沧州宝恩化工。1.2仪器F-4500荧光光谱仪日立公司，RE52S-1旋转蒸发仪上海亚荣生化仪器厂。1.3方法1.3.1丹酚酸B的别离纯化药材粉100g，加50%乙醇800l60提取2h，过滤，滤液减压浓缩至200l，用20%盐酸调pH至3，离心3000r/in，10in去沉淀。参加HPD100大孔树脂30g预先用95%乙醇浸泡24h，再用水洗净，放置8h，用50l水洗3次，再用70%乙醇100l分2次淋洗，搜集乙醇液，减压回收至干，参加醋酸乙酯50l提取，提取液回收溶剂至干，得固体物2.3g。经薄层鉴别，呈现一个丹酚酸B斑点。图1丹酚酸B分子构造略1.3.2荧光光谱测定称取别离的丹酚

6、酸B样品0.2g，加50l甲醇溶解，以此供试液进展荧光扫描测定。2结果2.1丹酚酸B的激发光谱和发射光谱以200700n扫描丹酚酸B的激发波长，发现394n为其最大激发波长。以该波长激发，获得其最大发射波长为501n。如图2所示，丹酚酸B的激发波谱范围较窄，在380430n之间，但其发射波谱范围较宽，在400600n之间，这归因于分子构造中分散的共轭体系。由于630n以上的光才具有较强的生物组织穿透力，丹酚酸B的激发波长穿透才能较弱，只适于浅表肿瘤或血管内照射进展的光动力治疗。其发射波谱宽，对肿瘤的选择性较差，但适用范围广，因此也是一种具有潜在价值的光敏活性物质。2.2pH对丹酚酸B荧光强度的

7、影响滴加10%盐酸和10%氢氧化钠调节供试液的pH，结果说明，在酸性环境中，丹酚酸B的发射强度增加，最大发射光谱未发生改变，但在碱性条件下，发射强度降低，最大发射波长蓝移，为497n，并在397n处出现另一发射峰。这说明丹酚酸B在酸性条件下稳定，但在碱性条件下发生了构造破坏，可能引起解离，故产生了另一个发射峰，并导致原来发射荧光强度的降低。见图3。图2丹酚酸B的激发光谱左和发射光谱右略2.3光照对丹酚酸B荧光强度的影响将供试液置入密封可透光的玻璃容器中，放在自然光下10000lux，每隔一定时间测定其发射光谱。结果说明，丹酚酸B的最大发射波长在光照下未发生挪动，荧光强度随照射时间增加而增加。这

8、说明光照对丹酚酸B具有活化作用。见图4。2.4温度对丹酚酸B荧光强度的影响将供试液置入恒温水浴中保温，设定温度20,30,40,50,60，每温度保温30in，测定其荧光强度。结果说明随温度进步，丹酚酸B的荧光强度随温度进步有所增加，但增加的幅度不大，40后渐趋稳定。说明在60温度范围内，丹酚酸B可保持较好的稳定性。见图5。图3不同pH条件下丹酚酸B荧光光谱的变化略图4光照时间与丹酚酸B荧光强度的关系略图5温度与丹酚酸B荧光强度的关系略3讨论丹酚酸B是中药丹参中的主要活性成分之一，具有抗动脉粥样硬化、保护心肌细胞、防心脑缺血损伤、抗血小板凝聚、抗肝纤维化、改善记忆、抗肿瘤等作用5。丹酚酸B具有

9、荧光活性，利用此性质，可进展定性定量检测，并可进步其对肿瘤部位的靶向作用，从而进步其作用效果。本实验考察了pH、温度、光照对丹酚酸B荧光强度的影响。由于实验是在有机溶剂中密闭条件下进展，故可防止条件改变导致氧化对丹酚酸B构造的破坏。实验结果说明，pH酸性、一定温度和光照有利于丹酚酸B荧光强度的增加，不会导致其构造的破坏。至于丹酚酸B对肿瘤细胞的光敏杀伤作用有待进一步讨论。【参考文献】1王瑞平,李迎新.光动力疗法在肿瘤治疗中的应用J.国外医学生物医学工程分册,1999,22(6):355.2许川山,AlbertingLangLeung.中药光敏剂介导的光动力疗法J.激光杂志,2022,25(6):92.3李俊芬,董川