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文档简介

1、CL-BIII八通道残留农药测定仪使用说明上海博纳新技术研究所2006年4月农残常识识1有机磷和和氨基甲甲酸酯类类杀虫、杀螨剂剂的特点点。两类类农药的的作用机机理均为为抑制动动物体内内乙酰胆胆碱酯酶酶的活性性,破坏坏神经传传导,引引起一系系列的神神经中毒毒症状,直至死死亡。二二者的主主要区别别在于:有机磷磷类杀虫虫、杀螨螨剂对乙乙酰胆碱碱酯酶的的抑制是是不可逆逆的,而而氨基甲甲酸酯类类杀虫、杀螨剂剂对乙酰酰胆碱酯酯酶的抑抑制是可可逆的。农残常识识2酶抑制率率法和酶酶系酶源源:国家家标准GB/T 5009.199-2003蔬菜中有有机磷和和氨基甲甲酸酯类类农药残残留量的的快速检检测推荐的酶酶抑制

2、率率法能方方便、快快速、准准确、成成本低廉廉检测出出农产品品中的农农药残留留,也同同时肯定定了乙酰酰胆碱酯酯酶作为为快速检检测推荐荐试剂的的活性量量和具体体要求。近年来来,我们们通过对对动物源源和植物物源的多多种丁酰酰胆碱酯酯酶、乙乙酰胆碱碱酯酶进进行检测测实验和和比较研研究,发发现乙酰酰胆碱酯酯酶对农农药的检检测敏感感度和综综合指标标优于丁丁酰胆碱碱酯酶;确定了了有机磷磷和氨基基甲酸酯酯类农药药对乙酰酰胆碱酸酸有较专专一性的的抑制作作用;分分析出在在抑制率率70%以下,大大多数农农药浓度度和乙酰酰胆碱酯酯酶抑制制率呈较较好的线线性关系系,并能能实现对对单种农农药的定定量分析析;解决决了酶的的

3、活性和和稳定性性控制等等技术农残常识识3什么是间间接比色色法:由于只有有当底物物与产物物之间,在光学学性质或或其它理理化性质质有显著著差异时时,才可可能直接接用分光光光度计计法测定定,因此此对酶活活性浓度度的监测测大多是是采用间间接监测测法。如如对胆碱碱酯酶的的测定:底物(硫代乙乙酰胆碱碱)及酶酶水解产产物(硫硫代胆碱碱和乙酸酸)并不不具有颜颜色,不不能用分分光光度度计法测测定。所所以必须须设法在在原来反反应体系系中添加加一些试试剂,这这些试剂剂必须不不与酶作作用也不不影响酶酶活性,同时又又能与酶酶反应物物迅速作作用,产产生可以以被直接接测定的的物质。这就产产生了Ellman的胆碱酯酯酶测定定

4、法即间间接连续续监测法法。目前前国内大大多厂家家生产的的快速农农药测定定仪都采采用了Ellman的胆碱酯酯酶测定定法即间间接比色色法。该该方法通通过监测测底物(硫代乙乙酰胆碱碱),酶酶水解产产物硫代代胆碱与与添加的的二硫代代硝基苯苯甲酸(DTNB)作用立刻刻生成黄黄色化合合物的反反应速度度来测定定酶活性性变化。农残常识识4什么是连连续监测测法:50年代,Warburg首先用分分光光度度计测定定酶的活活性。该该方法不不需停止止酶反应应就可测测定反应应物的变变化,容容易观察察到反应应的整个个过程和和干扰情情况(通通过绘制制反应曲曲线)。因此逐逐步取代代了固定定时间法法成为目目前测酶酶活性的的主要方

5、方法。该该方法是是利用连连续对反反应过程程进行高高灵敏度度检测,并通过过绘制整整个酶反反应曲线线避开延延滞期和和非线性性反应期期,只在在线性反反应期测测定最大大反应初初速度。由于仪仪器的高高精密度度,连续续监测法法能在很很短时间间,甚至至在1分钟反应应时间内内就能准准确测定定出活性性的抑制制率。技 术指指标标CL-BIII八通道道残留农农药测定定仪的技技术指标标:测测量波长长:410nm通通道数:8检检测用样样品器皿皿:10mm比比色皿光光电流漂漂移:0.5%(3min)暗暗电流漂漂移:0.5%(3min)抑抑制率显显示范围围:0-100%抑抑制率测测量范围围:10-100%农农药检测测:(用

6、用甲胺磷磷农药标标样测试试)抑抑制率示示值误差差:10%抑抑制率重重复性误误差:5%第一部分分试试剂配制制第二部分分联联机使用用第三部分分单单机使用用第四部分分相相关技巧巧与常识识目录录第一部分分试剂配制制1、试剂剂的配制制提取液:把提取取液甲乙乙粉末倒倒入大玻玻璃瓶中中,并加加入510ml蒸馏水溶溶解。酶试剂:用移液液枪取3.1ml提取液,加入酶酶试剂瓶瓶中。显色剂:用移液液枪取20ml提取液,加入显显色剂瓶瓶,溶解后倒入入棕色瓶瓶中。底物物:用移液液枪取3.1ml蒸馏水,加入底底物瓶中中。2、试剂剂的保存存及注意意事项返回目录1、本试试剂适用用的国家家标准为为:GB/T5009.199-2

7、003。2、未配配制的试试剂,要要保存在在0以以下的冷冷冻箱里里。(保质质期可达达1年)3、配制制好的酶酶和底物物试剂,要保存存在4的冷藏藏箱内。(保质期期为一周周)4、配制制好的提提取液常常温下可可以长期期保存。5、配制制好的显显色剂需需避光保保存;常常温或冷冷藏,可可以保保存1年年。第二部分分联机使用用第一步仪仪器连连接1、连接接电源将仪器的的电源接接头和数数据信号号线接好好。如如图:2、连接接电脑把数据信信号线(串口线线)接入入电脑主主机背后后的COM口(串口)上,然然后把数数据信号号线与仪仪器联接接起来,这样就就完成了了仪器与与电脑的的硬件连连接。第二步软软件安安装安装“农农产品质质量

8、安全全检测软软件”把“农产产品质量量安全检检测软件件”光盘盘放入电电脑光驱驱中,等等自动读读取或在在光盘目目录下找找到并双双击“setup”后后,按提提示点击击“下一一步”安安装。安安装完成成以后,桌面上上会出现现“食品品质量安安全检测测平台”的图标标。安装完成桌面上出现的图标第三步仪仪器器设置仪器设置置打开仪器器电源,按仪器器“确认认”键2次,然然后按1次“设设置”键键,再按按 “确确定”键键,选择择 “受受控”后后再按1次“确确定”键键。出现现“现正正处于受受控工作作模式”即可。打开检测测软件,检测软软件的用用户名默默认为“管理员员”,密密码是“111111”。 检测软件登陆设置为受受控状

9、态态调0/100注:以上上是一个个检测窗窗口的步步骤,其其他七个个窗口都都是如此此。等待10-15秒 按“确定” 放入黑块 等待10-15秒 按“确定” 拿出黑块 按“ ”键按“ ”键按“ ”键 按“ ”键第四步空空白对对照空白对照照用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中 用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中 用小移液枪取0.1ml底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比色皿 放入比色池 按“开始对照分析”键 等待对照结束 用大移液液枪抽取取2.5ml提取液放放入试管管中装入对照照按“装入入对照分分析”键键选择所需对照选择需要装入对照的通道号(在通道号码前) 按“读取”键完成装入工作 注:对照照结束

10、后后,对照照曲线会会自动保保存.(标准对对照库中中已有30种蔬菜的的对照,在做这这30种蔬菜时时,请参参照这些些对照。)装入标准准对照库库按“装入入对照分分析”键键选择所需的空白对照和相应的样品修正值选择需要装入对照的通道号(在通道号码前) 按“读取”键完成装入工作 第五步样样品检检测用天平称取1克果蔬剪成2cm见方 放入烧杯中,用大移液枪抽取5ml提取液加入到烧杯中 静置15分钟(或震荡1分钟) 用大移液枪从烧杯中抽取2.5ml浸泡液移至空试管中 用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中 用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中静置15分钟 用小移液枪取0.1ml底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比

11、色皿 放入比色池 按“开始样品分析”键 等待检测结果 第六步保保存检检测结果果保存检测测结果样品结束束后,系系统自动动弹出“检测结结果”对对话框选择该通道所测蔬菜名 填写(选择)检测单位 按“退出”键 填写(选择)被检单位和生产单位 按“保存”键,保存检测结果 备注注“统计分分析”中中的“农残检检测数据据查询统统计”对对话框有有所有保保存过的的检测数数据,在在该对话话框中有有“开始始日期“、“结结束日期期”、“果蔬品品种”、“被检检单位”等九项项选项,对这些些选项进进行组合合选择后后,再按按“查询询”键,就可以以将您需需要的信信息从所所有的数数据中筛筛选出来来。另外,“农残检检测数据据查询统统

12、计”对对话框中中还有“统计分分析”和和“转存存”等功功能,当当选择出出需要的的检测数数据后,就可以以按“统统计分析析”键或或者“转转存”键键,对数数据进行行统计分分析或制制成相应应报表。如果需要要打印单单项检测测结果,则点选选该结果果后,按按“打印印当前记记录”键键,浏览览打印效效果,再再按打印印键后打打印。检测结果果上传打开“设设置”项项下的“系统选选项”在“系统选项”中在“注册ID号”处填入ID号 及ID密码 通过右半边的条件选择,查询出需要上传的数据点击“发送”下的“发送查询的数据” 当检测结束后需要发送数据时,打开“统计汇总”中的“农残检测数据查询统计” 返回目录第三部分分单机使用用第

13、一步设设置置仪器1、连接接电源将仪器电电源连接接好,(如需打打印,则则要将专专用打印印机连接接到仪器器的打印印接口上上。)如如图:2、仪器设置置打开仪器器开关后后,按提提示进入入仪器操操作主界界面。按按“设置置”键进进入仪器器设置功功能,在在“设置置”里可可以对“日期期”、“打印方方式”、“对照照查询”等进行行设置。设置完完成后再再按“设设置”键键退回到到主界面面。3、调0/100在主界面面状态下下,按0/100键,根据据屏幕提提示逐一一调1-8通道的100值,最后后按“确确定”键键结束。第二步空空白白对照空白对照照注:对照照的时间间默认为为3分钟,如如需修改改,则先先要在“设置”中进行行设置

14、。用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中 用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中 用小移液枪取0.1ml底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比色皿 放入第一通道的比色池 按“对照”键,并选择“新建” 等待对照结束 用大移液液枪抽取取2.5ml提取液放放入试管管中第三步样样品检检测用天平称取1克果蔬剪成2cm见方 放入烧杯中,用大移液枪抽取5ml提取液加入到烧杯中 静置15分钟 用大移液枪从烧杯中抽取2.5ml浸泡液移至空试管中 用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中 用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中静置15分钟 用小移液枪取0.1ml底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比色皿 放入比色池 按“样品”

15、键 等待检测结果 注:按“样品”键后,会从1-8通道依次次提示是是否准备备好开始始进行检检测,如如果该通通道不需需要进行行检测,则选择择“不用用”。第四步数数据打打印及退退出数据打印印及退出出返回目录按“打印印”键按“确定”键 用/键选择检测数据的编号 按“打印”键进行打印 按“确定”键退出打印状态 第四部分分相关技巧巧与常识识常见问题题及相关关技巧11.仪器联机机操作的的情况下下,在检检测过程程中或者者开始检检测时,电脑出出现“没没有检测测到指定定的设备备”,是怎么么回事?一般来说说出现这这种提示示说明您您的检测测仪与电电脑硬件件连接出出现问题题,检查查的步骤骤如下:第一步、确定检检测软件件

16、的设备备设置中中相关设设置与硬硬件连接接相匹配配;第二步、电脑串串口通讯讯故障,检测方方法:重重新启动动电脑,确认是是否故障障依然存存在,如如果故障障依然存存在,检检查下一一步;第三步、更换一一下电脑脑串口,并在检检测软件件的设备备设置中中进行相相应的改改动,或或者换一一台电脑脑,确认认故障是是否存在在,如果果故障解解决,则则表明是是电脑本本身的问问题,否否则可进进行下一一步检查查;第四步、更换RS232485转换器,确认问问题是否否存在,如果故障障解决,则表明明为RS232485转换器连连接不通通。常见问题题及相关关技巧22.仪器联机机操作的的情况下下,调100时看不到到红线是是怎么回回事?

17、首先我们们要学会会看图谱谱,图谱谱的横坐坐标为时时间,纵纵坐标为为投射比比,我们们所所的的调100准确的所所是指将将投射比比值调整整为100。图谱在没没有拖拉拉的情况况下,最最高只能能显示到到100,如果在在调100的过程中中,其投投射比值值大于100,那样就就看不到到红线了了,但图图谱右边边的小白白框中有有数字显显示,你你只要正正常的调调0/100就可以了了。另外,对对于小白白框内数数字,显显示的是是当前的的投射比比值。在在做对照照或调0/100时,小白白框内的的数字前前有一短短红线,在做样样品时则则为短绿绿线。大家不要要把这个个短线认认为是负负号。常见问题题及相关关技巧33.如何检测测仪器

18、的的重现性性?做一空白白对照后后,做一个双双倍量的的样品,然后一一分为二二,先后或或同时做做检测,即:取取2克样品,加10ml提取液浸浸泡,然然后取5ml检液,分分别加0.2ml的酶、显显色剂,15分钟后,如果直直接加0.2ml底物,然然后一分分为二在在两个通通道中同同时做检检测,则则是检查查不同通通道的重重现性;如果15分钟后先先将溶液液一分为为二,先先后加入入0.1ml底物做检检测,则则是检查查同一通通道的重重现性。4.如何添加加品种名名称?一般来说说有两种种添加方方法:A.可以在基基础数据据维护中中进行添添加。B.在检测结结果弹出出是,通通过进进行行添加。另外,在在添加时时一定要要按“增增加”键键,填好好相关信信息后按按“保存存”完成成。常见问题题及相关关技巧45.如何升级级检测软软件?对于检测测软件的的升级有有两种方方法:A.在线升级级:打开开检测软软件并连连接因特特网,然然后在帮帮助中选选择在线线升级。B.本地升级级:执行行新版检检测软件件的安装装程序,选择“修复或或升级”项,然然后按照照提示完完成安装装即可。6.如何上传传数据?上传数据据有三个个步骤:1)打开“设备”菜单中中的“系系统选项项”,并并将注册册ID号和ID密码填写写好;2)打开“统计汇汇总”菜菜单中的的“农残残检测数数据查询询统计”,通过过查询项项将需要要上传的的数据查查询出来来;3)按“上上传”键键完

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