基因工程 考核方式

1、基因工程 考试大纲 一、课程考核的有关说明和实施要求 基因工程是湖南师范大学生命科学院基地班和生物技术专业本科生的必修专业课程。考核教材是目前在使用的由袁婺洲主编、北京化学工业出版社2010年出版的基因工程。学生可参考使用基因工程课程网站有关课件和录像以及课堂讲授的内容进行考试复习。 本课程主要考核学生对基因工程的基本概念、基本原理、基本技能等的了解与掌握程度。理论课考试要求掌握基因工程相关的基本概念，基因工程操作的基本流程，常规基因工程技术的基本原理、基本流程与主要应用，基因功能研究的基本技术，转基因植物与转基因动物的基本制作方法，基因治疗与蛋白质工程的基本原理等。理论课考核由两部分组成，期

2、末考试占成绩权重的80%，课堂平时表现与平时作业占成绩权重的20%。期末考试的基本题型包括名词解释、单项选择题、多项选择题、简答题（含辨析题）、论述题（含案例分析），各题型所占分数比例分别为20、10、10、20和40。 本课程期末考试时间为120分钟。 二、基因工程理论课考核内容与考核目标基因工程概述 基因工程的基本概念，基因工程的基本流程，基因工程诞生的条件与标志，基因工程的发展简史以及基因工程有哪些主要应用。基因工程的工具酶和载体 基因工程工具酶包括哪些类型？限制性内切核酸酶的特点与使用注意事项，DNA聚合酶和Klenow大片段的作用，DNA连接酶的作用及连接过程，碱性磷酸酶的作用及用途

3、，末端脱氧核苷酸转移酶的用途和作用等。基因工程载体必须满足的基本条件，质粒载体的主要特征和主要类型，噬菌体载体的类型和特点，不同载体的携带能力，人工微小染色体的概念、类型和获得途径。表达载体的概念以及典型的常见的高效表达系统如T7噬菌体启动子系统、融合蛋白表达系统、分泌表达系统以及甲醇酵母系统和真核表达系统的载体组成、高效表达的实现条件与优点等。各种载体的结构特征与各结构的作用等。目的基因的制备与鉴定 基因组文库的概念和构建方法， cDNA文库的概念和构建流程，构建cDNA文库需要用到哪些工具酶，合成cDNA第二条链有哪些方法等等；PCR技术的基本原理；PCR反应体系的主要成分与主要程序；提高

4、PCR反应特异性的因素和措施；逆转录PCR、巢式、反向PCR、多重PCR及荧光定量PCR的概念和应用；基因组数据库的概念，蛋白质工程的原理与概念，PCR介导定点突变的原理。目的基因的常用鉴定方法，酶切电泳图谱的识别，核酸分子杂交的概念，探针的类型与标记方法；掌握Southern杂交、Northern杂交、Western杂交及菌落（嗜菌斑）原位杂交的基本原理、流程与主要目的； Sanger双脱氧链终止法DNA测序和Maxam-Gilbert化学修饰法测序的基本原理，DNA自动测序的基本原理等等。基因工程在基因功能研究中的应用 胚胎原位杂交、胚胎抗体染色的概念，基因芯片的概念与类型，基因芯片的流程

5、与应用；转座子诱变的原理与优点；基因敲除的概念与流程，条件基因敲除的原理与优点，RNA干扰的概念与分子机制，RNA干扰的优点与应用，MO干扰的概念。基因过表达系统的组成，UAS-GAL4系统的组成与优点。凝胶迁移阻滞实验的原理与应用，酵母双杂交系统的原理与组成、酵母双杂交系统的应用，免疫共沉淀的原理等。转基因植物 植物转基因技术的基本路线；植物转基因的受体系统的类型；外源基因导入植物的方法； Ti质粒的结构特点、 Ti质粒介导植物基因转移的过程。植物转基因载体的报告基因， 提高外源基因在植物体内表达水平的策略。抗虫转基因植物的概念，抗病毒转基因作物，抗细菌和真菌的转基因作物、抗除草剂转基因作物

6、、抗非生物胁迫的转基因作物的概念等。植物生物反应器的概念。转基因生物的安全性和主要影响因素等。转基因动物 转基因动物的概念，显微注射法制备转基因动物的主要过程。逆转录病毒法制备转基因动物的主要过程。胚胎干细胞的概念。胚胎干细胞制备转基因动物的流程。精子载体法及其制备转基因动物的主要优点。体细胞核移植法和主要流程。动物器官生物反应器的概念。转基因动物的应用。转基因动物在医药科学研究中的应用。转基因小鼠的鉴定方法。显微注射法制备转基因动物需要的设备与装置。逆转录病毒的结构与基因组特点。 基因治疗 基因治疗的概念，基因治疗的基本策略，基因治疗的载体类型。 逆转录病毒、腺病毒与腺伴随病毒载体怎么构建、各有什么优缺点等。体外基因治疗与体内基因治疗的比较。单基因遗传病的基因治疗策略，肿瘤基