罗氏试剂盒说明书 Digoxin

1、Digoxin地高辛11820796 322100测试主要用途用于体外定量检测人体血清、血浆中的地高辛。该检测用于诊断与治疗地高辛过量以及监测地高辛的疗效，以确保合理的治疗。Elecsys及cobas e 系列免疫分析仪工作原理是电化学发光免疫测定法“ECLIA”。临床应用地高辛广泛用于治疗充血性心衰和多种心律失调。使用地高辛治疗可增强心肌收缩力，有助于提高心输出量、减小心脏大小、降低静脉压力和减小血容量。地高辛治疗也能稳定和降低心室脉搏1。尽管晶体地高辛的使用使药物剂量标准化成为可能，但治疗给药稍一马虎就会引起地高辛中毒。尤其是地高辛中毒症状类似心律不齐，而地高辛本身用于治疗心律不齐。血清或

2、血浆中地高辛治疗浓度范围是0.9-2.0 ng/ml2。人地高辛中毒症状通常仅出现在浓度超过2.0 ng/ml时，但也有报道称浓度在1.4 ng/ml时也可能发生中毒3。基于“2008 欧洲心脏学会关于急慢性心脏疾病诊断指南”中的相关内容，推荐的地高辛治疗浓度为0.6-1.2ng/ml。4当地高辛浓度超过1.2ng/ml时，死亡风险上升。5地高辛中毒表现在下述几个方面：a 药物治疗比率低（如治疗和中毒剂量很接近，差异小）；b. 不同个体对地高辛反应不同；c. 不同制剂的地高辛吸收率存在差异，最大相差两倍6,7；d. 随年龄增大洋地黄苷中毒可能性明显升高。结合其他临床信息，血清或血浆地高辛浓度监

3、测可为临床医师提供有用的信息，有助于调整患者剂量和获得最佳治疗效果，同时避免药物剂量过低和药物剂量过高导致中毒8。Elecsys 地高辛测定采用竞争性检测原理，使用的单克隆抗体能特异性作用地高辛。标本中地高辛与添加的生物素标记的地高辛衍生物竞争结合钌标记抗体复合物的位点a。*Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三联吡啶钌检测原理竞争原理。总测定时间：18分钟第一次孵育：10l标本和一份钌复合物标记抗地高辛特异性单克隆抗体一起孵育，反应形成复合体，复合体量取决于标本中反应物浓度。第二次孵育：添加生物素标记的地高辛衍生物和链酶亲和素包被

4、的微粒后，钌复合物标记抗体空闲位点结合抗原，反应生成一“抗体半抗原”样复合体，并在生物素和链酶亲和素的相互作用下结合到固相载体上。将反应液吸入检测池中，检测池中的微粒通过电磁作用吸附在电极表面。未结合的物质通过ProCell除去。在电极上加以一定的电压，使复合体化学发光，用光电倍增器检测发光的强度。通过检测仪的定标曲线得到最后的检测结果，定标曲线是通过2点定标点和试剂条形码上获得的主曲线生成的。试剂工作溶液M 链酶亲和素包被的微粒（透明瓶盖）每瓶6.5ml。链酶亲和素包被的微粒，0.72mg/ml； 结合力：470ng生物素/mg微粒；防腐剂。R1 抗地高辛特异性抗体（灰色瓶盖），每瓶10ml

5、：钌复合物标记的单克隆抗地高辛抗体（鼠）：15g/L；磷酸盐缓冲液：100 mmol/L，PH值7.0；防腐剂。R2 生物素化地高辛衍生物（黑色瓶盖），每瓶10ml：生物素化地高辛 1.06 ng/L；生物素15g/L；磷酸盐缓冲液：100 mmol/L，PH值7.0；防腐剂。注意事项仅用于体外诊断。在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。避免与任何形式的试剂或任何形式的样本（样品、定标品和质控）形成泡沫。试剂处理本试剂盒的任何一种试剂只可与试剂盒的其它试剂联合使用，不可单独使用。可从试剂条形码读取有关如何正确使用该试剂的所有信息。储存及稳定性

6、存放于28。请垂直摆放Elecsys 地高辛试剂盒，以确保使用前自动混合过程中微粒完全有效。稳定性：28（未开封）：有效期内均可使用。开封后，28：可存放12周。在MODULAR ANALYTICS E170及cobas e系列分析仪上： 可保存8周。在Elecsy 2010及cobas e 411分析仪上：可保存8周。在Elecsy 1010分析仪上：可保存8周（存放在冰箱内或分析仪上，温度2025）；彻底暴露情况下可保存20小时。标本的采集和准备地高辛检测的样本须在用药后68个小时内收集。9只有按如下方法收集的标本才适合用本试剂盒检测。血清必须用标准试管收集。内有分离胶的试管不适用于治疗药

7、物监测。请注意厂商提供的数据。肝素锂、肝素钠、肝素胺、草酸钠、K3-EDTA血浆、柠檬酸钠。（标准：回收率90110或斜率0.91.1+截距0.95）.稳定性： 28C可保存48小时；在-20C可保存6月，只可冻溶一次。7，8选择检测时市场上能获得的标本收集试管收集标本和检测，不是所有能获得的厂商的试管均可用于检测。不同厂商标本收集系统可能含有不同材料，某些情况下会影响检测结果。在使用原始试管处理标本时，应遵循试管生产商所提供的指导。如标本中有沉淀出现，必须先作离心处理再进行分析。已经加热失活的标本无法分析。使用叠氮化物作为稳定剂的标本或质控液无法分析。检测前，请确保患者标本、定标液及质控液放

8、置在2025C的环境中。由于蒸发因素的影响，标本、定标液及质控液在放入分析仪后请在2小时内完成测定。提供的物品参阅“试剂工作溶液”章节。需要的物品（未提供）货号11820907，Elecsys Digoxin CalSet, 4 x 1.5 mL货号03530477, Elecsys PreciControl Cardiac, 2 x 2 mL各含 PreciControl Cardiac 1和2货号11732277, Elecsys Diluent Universal, 2 x 18 mL样品稀释液或货号03183971, Elecsys Diluent Universal, 2 x 40

9、mL常规实验设备Elecsys 1010/2010，MODULAR ANALYTICS E170或cobas e系列免疫分析仪 Elecsys 1010/2010及cobas e 411分析仪所需材料: 货号11662988122, Elecsys ProCell, 6 x 380 mL ,系统缓冲液货号11662970122, Elecsys CleanCell, 6 x 380 mL,检测池洗液 货号11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL 附加洗液 货号11933159001, SysClean 适配器 货号11706829001, Elecsys

10、 1010 分析杯, 12 x 32 反应管，或货号11706802001, Elecsys 2010分析杯,60 x 60反应管 货号11706799001, Elecsys 2010 分吸吸头, 30 x 120 移液管吸头 Modular Analytics E170及cobas e 601免疫分析仪所需材料: 货号12135019190, ProCell M, 1 x 2 L 系统缓冲液 货号12135027190, CleanCell M, 1 x 2 L 检测池洗液货号03023141001, PC/CC杯, 50杯用于在测定前预热Procell M及Cleancell M。货号0

11、3005712190,ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于在检测完毕后或更换试剂时清洗系统。货号12102137001,分析杯/分析吸头 组合装 M, 48 分析杯x 84 反应管或加液器吸头,废物袋 货号03023150001, WasteLiner,废物袋 货号03027651001, SysClean 适配器 M 三种分析仪均需要的材料: 货号11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系统清洗液 检测要获得最佳的测定结果，请遵照本说明书中有关分析仪的相关指导，并参照分析仪特定检测的操作手册。MODULAR ANALYTIC

12、S E170及cobas e 601分析仪：需要PreClean M。在使用前分析仪自动使微粒处于悬浮状态。通过各试剂条形码可读取其详细实验参数。在少数情况下，分析仪无法自动读取信息时，请输入标签上的15位数字序列。MODULAR ANALYTICS E170，Elecsys2010及cobas e系列分析仪：将各试剂降温至20C左右，放到分析仪的试剂盘（20C）上，避免泡沫产生。分析仪将自动调节反应温度及各试剂瓶瓶盖的开关状态。Elecsys 1010分析仪：将各试剂降温至2025C左右，放到分析仪的试剂盘上（环境温度2025C），避免泡沫产生。在测定过程中需手动开关各试剂瓶的瓶盖。使用后储

13、存于28C。定标溯源性：本测定方法已按照参考标准定标标准化，即将美国药典（USP）地高辛参考品加入无分析成分的人血清，。每批Elecsys地高辛试剂都有条形码标记，条形码含有特定批次试剂对应的特定定标信息。预先定义的主曲线适用于使用Elecsys Digoxin CalSet的分析仪。定校间隔：每批不同试剂须重新进行定标（例如在试剂盒被分析仪识别后的24小时内）。除此之外，以下情况必须重新进行定标：MODULAR ANALYTICS E170,Elecsys 2010及cobas e系列分析仪：同一批号的试剂盒在分析仪上使用超过1个月（28天）。同一试剂盒在分析仪上使用超过7天Elecsys

14、1010分析仪：每换一个试剂盒就要定标一次。系统温度在2025C时7天定标一次。所有分析仪：根据需要：如质控数据超过额定的限度。质控Elecsys PreciControl Cardiac,1和2试剂和其它适合的试剂均可作为测定时的质控液。在测定时，对于不同浓度范围的标本，每24小时内必须进行一次质控测试。每次更换试剂盒或进行定标后也须进行质控测试。每个实验室须根据各自的情况确定合适的质控间隔和范围。测定值必须处于规定的范围内。若测定值不在规定的范围内，则每个试验室必须建立相应的矫正方法。计算分析仪自动计算得出每份标本的测定浓度（单位可为nmol/L 或 ng/mL).换算公式nmol/L x

15、 0.78 = ng/mLng/mL x 1.28 = nmol/L干扰因素下列情况不影响测定结果：黄疸（胆红素浓度小于1112 umol/l或65 mg/dL），溶血（血红蛋白小于0.621mmol/L 或1.0 g/dL），脂血（脂类乳剂小于1500 mg/dL），和生物素（小于409 nmol/L 或100ng/mL）。标准：地高辛浓度小于1.5 ng/mL （1.92 nmol/L）时，重现性 0.15 ng/mL ；或地高辛浓度大于1.5 ng/mL （1.92nmol/L）时，重现性10初始值。对于因某些疾病需要而接受高剂量生物素治疗的患者（ 5mg/天），必须在末次生物素治疗8小

16、时后采集标本。浓度达1630IU/ml的风湿因子对测定无影响。体外对69种常用药物进行试验未发现有药物影响检测结果。乌扎拉和萘丁美酮可能会导致假性地高辛结果偏高。安体舒通和坎利酮当结果低于3 ng/mL的检测范围内，可能会出现假性结果偏高。肾衰、肝脏衰竭患者和怀孕晚期妇女血中存在地高辛类似免疫反应物质（DLIS）。研究发现使用商业免疫试剂测定地高辛时，标本中DLIS会使地高辛检测结果偏高10,11,12。地高辛免疫FAb（抗体片断治疗）制造商认为只能用免疫技术定量测定来自这种治疗患者血清中的地高辛11。由于检测试剂中含有单克隆抗体，因此某些接受单克隆鼠抗体治疗或诊断的患者标本检测结果可能有误。

17、试剂盒附带有试剂添加剂以减少以上不良影响。少数病例中极高浓度的链霉抗生物素蛋白和钌抗体会影响测定结果。必须结合患者病史，各项实验室检查及其它临床资料来综合评估测定结果。检测范围0.15-5.0 ng/mL 或 0.19-6.4 nmol/L（由系统主曲线的最低限和最高限决定）。地高辛浓度低于检测最低限则报告为0.15ng/mL或 5.0 ng/mL或 6.4 nmol/L,或最多2倍稀释10.0 ng/mL 或 12.8 nmol/L。稀释若标本中地高辛浓度超过测定范围，则可使用Elecsys Diluent Universal稀释标本。推荐的稀释倍数是1：2（MODULAR ANALYTIC

18、S E170，Elecsys 1010/2010及cobas e系列分析仪自动或手动稀释）。稀释标本的浓度必须大于2.5ng/mL 或3.2 nmol/L。手动稀释后，则结果需乘以稀释倍数。使用分析仪自动稀释，则MODULAR ANALYTICS E170，Elecsys 1010/2010及cobas e系列分析仪计算标本浓度时会自动考虑稀释因素。参考范围地高辛一般治疗范围是0.9-2.0 ng/ml(1.2-2.6 nmol/l)。浓度大于2.0 ng/ml(2.6 nmol/l)通常被认为中毒14。也有报道认为中毒和非中毒值范围有重叠3。因此，临床诊断必须根据临床和实验室结果。每个实验室

19、必须调查各自患者群体的参考范围变异性，必要时根据具体情况制订自己的参考范围。特殊性能指标分析仪的代表性试验数据如下。各实验室由于具体情况不同，所得出的数据可能会稍有差异。精密度根据NCCLS（全国临床实验室规范化操作委员会）制订的改良试验计划(EP5-A)，应用Elecsys试剂盒、人血液标本和质控液验证Elecsys 地高辛试剂盒检测重复性。每日测6 次共10 日（n60）；在E170 分析仪上的批内精密度（n21），得结果如下：分析灵敏度（最低浓度检测限）0.15 ng/mL (0.19 nmol/L)检测限制定义为可以区别零浓度定标液的最低可测浓度值，计算公式为定标液最小浓度2SD（标准差）（系统定标，定标液最小浓度2SD，组间精密度范围之内，标本数21）。方法学比较将Elecsys Digoxin试剂按照USP参考品（y）和Elecsys Digoxin试剂旧版本（x）进行比较，检测相