实验五gus染色检测基因瞬时表达_第1页
实验五gus染色检测基因瞬时表达_第2页
实验五gus染色检测基因瞬时表达_第3页
实验五gus染色检测基因瞬时表达_第4页
实验五gus染色检测基因瞬时表达_第5页
已阅读5页，还剩1页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

试验五

GUS染色检测基因瞬时表示王欢欢二零一二.九实验五gus染色检测基因瞬时表达第1页汇报基因gus基因（β-葡萄糖苷酸酶基因）是当前转基因植物中应用最为广泛汇报基因。β-葡萄糖苷酸酶是一个水解酶，以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物，其反应产物能够用各种方法检测出来。绝大多数植物没有葡萄糖苷酸酶背景活性，所以gus作为汇报基因广泛应用在植物基因工程中。标识基因为gus惯用商业载体：pBI121实验五gus染色检测基因瞬时表达第2页组织化学法检测

以5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸（X-Gluc）作为反应底物，将被检材料用含有底物缓冲液浸泡。若组织细胞被转入了gus基因，并表示出Gus，适宜条件下，该酶就可将X-Gluc水解生成蓝色产物。这是由其初始产物经氧化二聚作用形成靛蓝染料，它使具Gus活性部位或位点展现蓝色，用肉眼或在显微镜下可看到，且在一定程度下依据染色深浅可反应出Gus活性。所以利用该方法可观察到外源基因在特定器官、组织，甚至单个细胞内表示情况。gus基因转拟南芥GUS检测结果实验五gus染色检测基因瞬时表达第3页Gus染色

将拟南芥幼苗或成年植株组织浸泡于染色缓冲液中，置于真空罐中0.5Mbar抽真空10min，使染液充分渗透到组织内部，然后置于37℃浸泡过夜。移去染液，用0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.0)冲洗2-3次。再用70%乙醇脱色，更换乙醇2-3次，统计并拍照。

侵染后烟草叶片和注射烟草叶片也用一样方法处理实验五gus染色检测基因瞬时表达第4页瞬时表示与稳定表示W38侵染叶片NB侵染叶片NB侵染下胚轴NB注射叶片拟南芥1拟南芥2拟南芥3拟南芥4拟南芥5瞬时表示稳定表示实验五gus染色检测基因瞬时表达第5页试验汇报实验目实验原理（简略写）实验方法实验结果及分析（最重要）思考题（最后一

人人文库> 全部分类> 应用文书 > 技术指导

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论