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文档简介
实验4果蝇形态观察及性别鉴定
实验目的实验原理实验材料与药品实验方法注意事项实验作业实验目的了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点;区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性状特征;掌握实验果蝇的饲养、管理及实验处理方法和技术。果蝇知识简介
果蝇英文俗名fruitfly或vinegarfly,果蝇广泛地存在于全球温带及热带气候区,而且由于其主食为腐烂的水果,因此在人类的栖息地内如果园,菜市场等地区内皆可见其踪迹。除了南北极外,目前有3000个以上的果蝇物种被发现,大部分的物种以腐烂的水果或植物体为食,少部分则只取用真菌,树液或花粉为其食物。果蝇的特点容易饲养生长迅速、周期短、繁殖力强,(400-500只卵/雌蝇)突变性状多,多为形态学变异,易观察果蝇的生活史果蝇是完全变态昆虫,它的生活史包括卵、幼虫、蛹及成虫四个发育时期。果蝇生活周期及各个发育阶段的时间长短与温度关系十分密切。超过30℃,能使果蝇不育和死亡。温度降低,会使果蝇生活周期延长,生活力降低。一般在20-25℃下培养最为合适。在适宜的温度下,大约经过10-15天即可繁殖一代。果蝇的生活史果蝇的生活史1.卵2.一龄幼虫3.二龄幼虫4.三龄幼虫5.蛹6.成虫果蝇的形态结构头:一对复眼眼色:红(+)、白
形状:圆(+)、棒一对翅:长(+)、小、残、勺胸:一对平衡棒三对步足:性梳(区别雌雄)腹:具有条纹和腹片(区别雌雄)体色:灰(+)、黄、黑檀体体表:刚毛:直(+)、焦雌雄果蝇的鉴定雌果蝇雄果蝇体形较大较小性梳无有腹末端稍尖钝而圆腹片6个4个腹部背面条纹5条3条外生殖器简单复杂腹片数目雌果蝇6节,腹部底部为产卵管,呈现圆锥状凸出。雄果蝇4节,腹部底部为交尾器,呈现黑色圆形外观。雌雄果蝇图解雌雄果蝇♀♂识别果蝇♀♂识别性梳模式图性梳性梳性梳果蝇的性别决定雌雄基因平衡理论X染色体上携带决定雌性的基因,常染色体上携带决定雄性的基因,Y染色体上含有决定育性的基因,很少或不含影响性别的基因,个体的性别决定于雌雄基因的平衡。性指数:性染色体(X)与常染色体组数(A)的比值。性指数X/A<0.5,超雄
X/A=0.5,雄性
0.5<X/A<1,中间性
X/A=1,雌性
X/A>1,超雌
实验材料与药品野生型黑腹果蝇(Drosophila)及其各种突变型果蝇。乙醚实验方法1、麻醉:利用果蝇的趋光性或用毛笔把果蝇放入麻醉瓶内,向侧管棉团滴加麻醉剂乙醚,要保持棉团湿而不流2、在解剖镜下分辨雌雄,并观察突变型的特征。实验步骤1.果蝇的饲养1)培养基的配制果蝇以酵母菌为食,常采用发酵的培养基繁殖酵母菌来饲养果蝇。培养基常用玉米粉、米粉或香蕉配制,本实验采用玉米培养基,其配方如下:果蝇培养基成份(1000ml)玉米面85g红糖65g琼脂8g丙酸5ml酵母8-9g水溶琼脂—加红糖—加搅好的玉米面—煮沸—加水到1000ml—冷却—50°左右加入酵母粉—加入正丙酸(防腐剂)培养瓶的灭菌准备灭菌的培养瓶准备灭菌的棉塞准备灭菌的滤纸包好的棉塞灭菌锅121℃20min配制好的培养基2)果蝇继代培养
将果蝇转移到新配制的培养基中繁殖。转移时要注意转移的手法,不要使果蝇从两个瓶口的接缝处飞出。一般用黑纸包住带有亲本果蝇的培养瓶,使其飞入带有新培养基的培养瓶准备转移果蝇的亲本及培养基果蝇的转移幼虫化蛹时爬到瓶璧或滤纸上。2果蝇性状的观察1)果蝇的麻醉处理在果蝇的性状观察、性别鉴定以及杂交亲本接种等操作中,应先将果蝇麻醉,使其保持安静状态。麻醉方法如下:(1)准备一只与培养瓶口径相同的空瓶作为麻醉瓶,并配以脱脂棉塞。(2)去掉培养瓶棉塞,立即与麻醉瓶口相对,培养瓶在上,一手稳住两瓶,另一手轻轻震拍培养瓶,使果蝇落入麻醉瓶中。(3)滴数滴乙醚于麻醉瓶侧面棉塞内,约30s,麻醉瓶内的果蝇即处于麻醉状态。注意不能麻醉过度。若蝇翅与蝇体呈45º角翘起,表明麻醉过度,不能复苏而死亡。(4)将麻醉后的果蝇放在白瓷板或白纸板上,用毛笔刷移动检查,根据需要用肉眼、放大镜或解剖镜观察。不再用的果蝇务必倒入死蝇盛留器中及时处死,防止品系间混杂。转移到麻醉瓶中观察结果麻醉时转移果蝇手法死亡果蝇的标志
注意事项乙醚逐滴加入,避免把果蝇麻醉过度麻醉瓶要轻拿轻放,一定要水平放置。野生型直刚毛—头胸部以及复眼的周围具有平直,先端略弯的长型粗黑硬毛
横隔脉突变型:白眼果蝇棒眼果蝇勺翅及平衡棒突变型:小翅突变型:残翅突变型:残翅、黑檀体型突变型:黄体三隐性突变型
(白眼、小翅、焦刚毛)
突变性状的鉴别
影响部位突变名称基因符号性状特征染色体号数翅形残翅vg翅退化Ⅱ
小翅m翅小Ⅰ(X)
勺翅nub2翅小似勺Ⅱ
眼白眼w复眼白色Ⅰ(X)
棒眼B复眼棒状Ⅰ
体色黑檀体e体色黑亮Ⅲ
黄体y体色浅橙黄色Ⅰ
刚毛焦刚毛sn
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