金花葵不同部位中黄酮类物质提取条件优化

检测时间：2018-06-1217:10:03 ◎中国主要会议特色数据◎台文献资◎◎时间范围：1989-01-01至2018-06-◎◎IPUB作全文总相似比：30.77%（总相似比=复写率+他引率+自引率）自写率：69.23%（内容占全文的）复写率：29.46%（相似或疑似重复内容占全文的,含专业用语）他引率：1.31%（他人的部分占全文的，请正确标注）自引率：0%（自己已部分占全文的，请正确标注 （公式定理、法律条文、行业用语等占全文 期刊：52博硕：12外文：3综合：0自建库：10互联网专业用语（公式定理、法律条文、行业用语等2014专业生物科学本人的是在指导教师杨香瑜讲师的指导下独立撰写完成的。经检测，重复率为11.4%。剽窃、、等违反学术道德、学术规范和的行为，本人愿意承担由此产生的各种，直至，并愿意通过网络接受公众的监督。特此郑重。年月日的花中总黄酮含量9.63%，最佳提取工艺条件：乙醇浓度65%，料液比1:30，时间2h，提取温度50时，提取5次，提取率为85.28%，得率8.14%。茎叶中总黄酮含量2.87%，最佳提取工艺条件：乙醇浓度60%，料液比1:28.25，时间1h，提取温度50，提取5次，提取率20%，得率2.59%。经重复验证，实验结果重复性良好。OptimizationofExtractionConditionsofFlavonoidsinDifferentPartsofHibiscusmanihotChunxiGuoDirectedbyLecturerXiangyuInordertorealizethecomprehensiveutilizationofdifferentpartsoftherawmaterialsofHibiscusmanihotinCixiancounty,thesubjecttakestheflowersandstemsandleavesofHibiscusmanihotastheresearchobject,adoptstheresponsesurfaceexperimentaldesignmethod,andfocusesonthedetectionofflavonoidsinthestemsandleavesofHibiscusmanihot.TheextractionprocesswasstudiedinordertoevaluatetheeconomicvalueofthedevelopmentofflavonoidsindifferentpartsofHibiscusmanihot.Theresultsshowedthatthecontentoftotalflavonoidswas9.63%indriedflowersofHibiscusmanihotinHandan.TheoptimumconditionsforethanolextractionofflavonoidsfromHibiscusmanihot:ethanolconcentrationswere65%,solid-liquidratiowere1:30,extractiontimeswere2hours,temperatureswere50C,andextractiontimeswere5times.Theextractionratewas8.14%,whichwas85.28%ofthebestextractioneffect.Thecontentoftotalflavonoidsinstemsandleaveswas2.87%.Theoptimumextractionconditionswereasfollows:ethanolconcentrationsare60%,solid-liquidratioare1:28.25,extractiontimeswere1h,temperatureswere50C,extractiontimeswere5times,Theextractionratewas2.59%,whichwas90.20%ofthebestextractioneffect.Afterrepeatedverification,theexperimentalresultsarereproducibleKeywordsHibiscusmanihot,flower,stemsandleaves,flavonoids,ethanolextraction,responsesurface 金花葵概述金花葵茎叶、花中有效成分对比分析国内外研究现状立题依据与目的意义2材料与方法实验研究材料实验仪器及试剂标准曲线的绘制金花葵花中黄酮含量检测金花葵花中总黄酮超声提取金花葵花中总黄酮含量检测的正交实验金花葵茎叶中黄酮含量检测金花葵茎叶提取单因素实验乙醇浓度对金花葵茎叶中黄酮提取影响提取时间对金花葵茎叶中黄酮提取影响料液比对金花葵茎叶中黄酮提取影响提取温度对金花葵茎叶中黄酮提取影响响应面实验设计3结果与分析芦丁标准曲线的绘制金花葵花中总黄酮提取金花葵花中总黄酮的超声提取结果正交实验结果分析3.1.2提取工艺的验证实验金花葵茎叶总黄酮超声提取金花葵茎叶提取单因素对提取率的影响乙醇浓度对金花葵茎叶中黄酮提取影响提取时间对金花葵茎叶中黄酮提取影响料液比对金花葵茎叶中黄酮提取影响提取温度对金花葵茎叶中黄酮提取影响响应面分析法优化金花葵茎叶中黄酮类物质提取工艺响应面实验结果金花葵茎叶中黄酮类物质的提取影响因子方差分析3.3.3四因素三水平影响黄酮提取率的RAS响应面曲面分析4结论参考文献致谢金花葵作为邯郸地区优势种植资源。文献金花葵花中含有多种生理活性成分，其相关提取分离工艺的研究相对较多。关于茎叶的清除体内的氧基，细胞的、衰老以及的发生，同时改善血液循环，可以降低胆固醇，从而降低心脑血管疾病的发病金花葵自然分布在河北、、山西等地，曾经濒临，后因其功效被发现，出现了很多种植，晋中晋南地区。金花葵的嫩果可食，富含所需的多种氨基酸和微量元素，金花葵的根、茎、叶可全部过细目筛后做成称为“榆皮面”的面粉，营养价值很高，经常食用可预防心脑血管疾病。金花葵在食品、品等领域具有广阔的市场前景。文 为3949.62±326.07μg/g，与根和果皮中甘露醇含量相差不大；总皂苷在花、茎叶、根、果皮和 中分布无显著差异，平均含量在1000012000μg/g；金花葵花中总黄酮含量最高，达22299.62μg/g，其余部位总黄酮含量均低于4000.00μg/g，好的总黄酮来源[4]。在检测的8种核苷类成分中，金花葵花的核苷类成分总量最高，达1937.731μg/g。同时Q－花葵花的化学成分含量与其他部位区别较高。另外有研究表明，金花葵不同部位金丝桃苷含量花中最多，茎叶排第三[5]；而 中的微量元素含量普遍高于花[6]。 金花葵花含有多种具有生物活性的化学成分，主要包括黄酮类成分和挥发油成分[8]。目前已鉴定出金丝桃苷(Hyp)、槲皮素in)、山萘酚（kaempferol）等化合物[9,10]，以及不饱和脂肪酸、维生素E、多种微量元素、酪氨酸酶等[11-13]痛、免疫调节、调节血脂及护肝、抗氧化、抗衰老等方面均有明显效果[14-21]。金花葵是植物界中天然黄酮含量较高的品种，其总黄酮含量高于目前常用银杏、大豆等原料的数十倍[17]。 为了有效开发和利用金花葵药材资源，本课题发现，邯郸地区金花葵茎叶多作为废弃物丢弃或者直接饲喂牲畜，考虑到植物原料 表1实验材料及来源Table1Material 氢氧化钠 市永大化学试 ，批号 HH-6数显恒温水浴锅（常州市国旺仪器制造）精确称取芦丁标准品10.0mg，用95%乙醇溶解，定容于10mL容量瓶中，制得浓度为1mg/mL的对照品溶液。取其4mL溶液，用95%乙醇定根据同组实验 张秀温的研究，发现金花葵花中总黄酮的提取率，随乙醇浓度升高而先升高后缓慢降低，在65%左右达到峰值；料液比对金花葵花中总黄酮的提取率的影响则是先升高后持平，自1:25后基本持平；浸泡时间对金花葵花中总黄酮的提取率影响则是在2-2.5h之间达到最高，之后有所下降；由于生产实践中的耗能和黄酮产品的稳定性，选取提取温度不宜高于50总黄酮的提取将按照下图进行正交实验。表2Table2OrthogonaltestAB/(g/mL)C/hD165%1:201.5270%1:252375%1:302.5准确称取1.00g金花葵茎叶粉末于250mL锥形瓶中，加入20mL的80%乙醇，用膜封住，在40超声提取25分钟，取上清液。滤渣再重表3乙醇浓度单因素实验Table3Ethanolconcentrationsinglefactor150%1.5h502345表4提取时间单因素实验Table4Extractiontimesinglefactor10.5h70%50表5料液比单因素实验Table5materialandliquidratiosinglefactor11:1070%502345表6Table6Extractiontemperaturesinglefactor13070%1:25续表23570%1:25345表7Table7Responsesurfaceexperimentalschemeandexperimental170.0050.0025.00270.0045.0025.00380.0045.0020.00480.0045.0020.00570.0050.0020.0080.0045.0030.0060.0045.0020.0060.0045.0030.0070.0040.0020.0060.0045.0025.0080.0050.0020.0070.0040.0025.0070.0050.0020.0060.0040.0020.0070.0050.0030.0070.0045.0020.0060.0050.0020.0060.0045.0020.00续表70.0040.0030.0080.0040.0020.0070.0045.0025.0070.0045.0030.0070.0045.0030.0070.0040.0020.0070.0045.0020.0070.0045.0020.0070.0045.0020.0070.0050.0020.0080.0045.0025.00图1芦丁标准曲线Figure1RutinStandard表8金花葵花中总黄酮超声提取结果Table8Ultrasonicextractionresultsoftotalflavonoidsin次数/次取液/mL黄酮质量/mg10.184.3610215.904832.52.1961442.4231550.8975650.5262总计96.3087结果发现，采用接近无限次提取的方式，将金花葵花提取6次，分别检测总黄酮量，直至基本不能检出，金花葵花中总黄酮含量表9正交实验设计及结果分析Table9Orthogonalexperimentaldesignand 试验号ABCD1111212231334212522362317313续表ABCD83219332K10.19060.2256K20.23630.2292K30.25190.2240k10.06350.0752k20.07880.0764k30.08400.0747R0.00980.02040.0017表10 ysisofIIIdfF模型894.683a999.4092622.166温度1.69020.84522.283时间0.03220.0160.424料液比4.27722.13956.410乙醇浓度1.07520.53814.181误差0.3419总计895.024a.R方=1.000（调整R方=3.1.2为了进一步提取工艺的稳定性，将最佳提取工艺条件再重复三次。结果如下：表11最佳工艺的验证实验Table11Validationexperimentsforthebest序号提取率平均值18.10%8.17%23表12Table12Ultrasonicextractionofflavonoidsfromstemsandleavesofthe10.111221.38461748.19%20.128200.58159430.21220.35936240.243210.19423250.363230.19103560.227210.10882270.113210.053832图2乙醇浓度对金花葵中黄酮提取影响Figure2EffectofethanolconcentrationonextractionofflavonoidsfromHibiscusFigure3EffectofextractiontimeonextractionofflavonoidsfromstemsandleavesofHibiscus 图4料液比对金花葵茎叶中黄酮提取影响Figure4Effectofliquid-to-liquidratioontheextractionofflavonoidsfromstemsandleavesofHibiscus 图5提取温度对金花葵茎叶中黄酮提取影响Figure5EffectofextractiontemperatureonflavonoidsextractionfromstemsandleavesofHibiscus 表13响应面实验结果Table13Responsesurfaceexperiment/h1251.522513201420252026301.572018301.59202101.5111.5121.5131.5141.5151.5161.5171.5182191.5208040201.5217045252227045301237045302247040201257045201.5267045201.5277045201.5续表/h287050201298045251.5表14黄酮类物质的提取影响因子二次回归模型方差分析 ysisofflavonoidsextractionfactorquadratic ysisof来源平方 度均方Fp-模型0.85140.0612.21A-乙醇浓度0.08810.0883.19B-提取温度0.05810.0582.09C-料液比0.1310.134.73D-提取时间0.02210.0220.810.03310.0331.205.858E-00315.858E-0030.210.02610.0260.940.03010.0301.080.1210.124.470.01110.0110.41A^20.01510.0150.55B^20.03610.0361.31C^20.09210.0923.33D^21.875E-00311.875E-0030.068残差0.39140.38110.03520.890.0146纯误差4.978E-00331.659E-003总计1.2428+5.67662-0.035340A-0.33641B+0.24816C+2.46141D+1.81800E-003AB-5.78571E-004AC+0.016085AD+2.57831E-003BC-0.070220BD-图6乙醇浓度和料液比交互响应面图Figure6Interactiveresponsesurfacediagramofethanolconcentrationandsolid-liquid图7Figure7Interactiveresponsesurfacemapofethanolconcentrationandextraction图8Figure8Interactiveresponsesurfacemapofextractiontemperatureandmaterial-liquid图9Figure9Interactiveresponsesurfacemapofmaterial-liquidratioandextraction图10Figure10Extractiontemperatureandextractiontimeinteractiveresponsesurface图11Figure11Interactionresponsesurfacediagramofethanolconcentrationandextraction4情况而确定的，并不在最优点的两侧，这很可能导致响应面实验。并且，本人认为，茎叶的程度也影响了实验结果，此次实验的原材料过了60目筛，而不是选用60-80目筛，这使得原材料中有一部分的程度很高，从而使得结果出现了偏差。总黄酮的最佳提取工艺条件为乙醇浓度60%，料液比1:28.25，时间1h，提取温度50，提取5次，得率能够达到2.59％。这也就证明了金花葵茎叶具有一定的开发价值。从而促进金花葵资源的广泛种植与开发利用。李芸,杨秀松,何计国.金花葵黄酮对高脂血症大鼠血脂的影响[J].食品科学,2012,33（1）:24-KongFL,ZhangMW,KuangRB,etal.AntioxidantactivitiesofdifferentfractionsofplysaccharidepurifiedfrompericarptissueofLitchi(LitchiChinensisSonn)[J].Carbohydratepolymers,2010,81(3):612-616.ChenＲZ,MengFL,LiuZQ,etal.AntitumoractivitiesofdifferentfractionsofpolysaccharidepurifiedfromOrnithogalumcaudatumAit[J].Carbohydratepolymers,2010,80(3):845-851.曹东怡,虞泓,曾文波,仝晶晶,杨俊媛,刘绍坤.金花葵不同部位化学成分分析[J]. 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