《大肠杆菌的培养和分离》教学-完整版课件

实验1大肠杆菌的培养和分离1.进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。2.进行大肠杆菌的分离，用固体培养基进行细菌的划线培养。3.说明大肠杆菌培养的条件和操作要求。学习目标霉菌细菌新课导入酵母菌放线菌上图都是一些常见的微生物，微生物是结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物，与人类关系密切。人工的培养和分离，使得我们更进一步认识微生物。今天我们就来学习如何培养和分离大肠杆菌！本课栏目开关基础知识实验操作自我检测微生物1培养基2无菌技术31基础知识微生物11.特点：结构都相当简单,个体多数十分微小，通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构，且体内一般不含有叶绿素，不能进行光合作用。本课栏目开关基础知识实验操作自我检测2.微生物包括五类病毒细菌放线菌真菌原生动物本课栏目开关基础知识实验操作自我检测培养基2培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。本课栏目开关基础知识实验操作自我检测固体培养基液体培养基半固体培养基1.培养基的类型成分区别：琼脂本课栏目开关基础知识实验操作自我检测2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方细菌喜荤，霉菌喜素大肠杆菌配方酵母提取物：0.25g蛋白胨：0.5gNacl：0.5g琼脂：1g水：50ml本课栏目开关基础知识实验操作自我检测3.培养基内所含的基本物质①一般营养物质水、碳源、氮源、无机盐②其他物质pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。本课栏目开关基础知识实验操作自我检测4.培养基的用途液体培养基：扩增细菌、工业生产固体培养基：纯化（分离），鉴定、保藏菌种本课栏目开关基础知识实验操作自我检测无菌技术31.无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。无菌操作是培养微生物成功的关键！本课栏目开关基础知识实验操作自我检测（1）消毒定义：2.消毒与灭菌的概念及两者的区别（2）灭菌的定义：是指杀灭病原微生物的方法。是指杀灭或清除环境中一切微生物（包括芽胞、孢子）的方法本课栏目开关基础知识实验操作自我检测a.灼烧灭菌3.常用灭菌的方法本课栏目开关基础知识实验操作自我检测b.干热灭菌：160-170℃下加热1-2h。c.高压蒸气灭菌：100kPa、121℃下维持15-30min.本课栏目开关基础知识实验操作自我检测培养基的配置与灭菌1倒平板2大肠杆菌的扩大培养3大肠杆菌的划线分离4大肠杆菌分离后保存5本课栏目开关基础知识实验操作自我检测实验操作2取2个250ml的三角瓶中分别装入50mlLB液体培养基和50mlLB固体培养基（刚配好，尚未凝固），加上封口膜，牛皮纸包装后高压锅灭菌15min。LB液体培养基——细菌的扩大培养LB固体培养基——细菌的划线分离培养基的配置与灭菌1本课栏目开关基础知识实验操作自我检测倒平板2灭菌后的培养基在无菌操作台上倒入4个培养皿中，倒后立即置于水平位置上，轻轻晃动，使培养基铺满平皿底部，待凝，使之形成平面。本课栏目开关基础知识实验操作自我检测将斜面上培养的大肠杆菌菌种接种到灭菌后的液体培养基中，使其在37℃摇床培养12小时。注意事项:1.火焰旁从斜面上用接种环取菌；2.取菌前接种环要用酒精灯灼烧灭菌，冷却后方能取菌；3.取菌后封口膜和棉塞复原。大肠杆菌的扩大培养3本课栏目开关基础知识实验操作自我检测本课栏目开关基础知识实验操作自我检测大肠杆菌的划线分离4

1）灼烧接种环；

2）接种环冷却后，蘸取带菌培养物；

3）在近火焰处，让带菌接种环在固体培养基上划线。本课栏目开关基础知识实验操作自我检测注意事项:1.接种环只蘸一次菌液，但要在培养基不同位置连续划线多次。2.划线首尾不能相接。3.划线后，培养皿倒置培养12~24h。本课栏目开关基础知识实验操作自我检测11.线条不重叠22-3.从上次的末端开始，交叉2~3条线344.最后的划线不能与第一区相连。本课栏目开关基础知识实验操作自我检测分离后，一个菌体便会形成一个菌落，这是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选菌株的最简便方法之一。本课栏目开关基础知识实验操作自我检测1.临时保藏：接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。2.长期保存：甘油冷冻管藏法大肠杆菌分离后保存5本课栏目开关基础知识实验操作自我检测大肠杆菌的培养和分离过程总结菌种保存培养基的配制灭菌超净工件台倒平板接种液体培养划线分离培养本课栏目开关基础知识实验操作自我检测1．关微生物营养物质的叙述中，正确的是（）

A.是碳源的物质不可能同时是氮源

B.凡碳源都提供能量

C.除水以外的无机物只提供无机盐

D.无机氮源也能提供能量D本课栏目开关基础知识实验操作自我检测