扫描电镜样品制备技术教学课件

扫描电子显微镜样品制备1常规样品制备技术2冷冻割断技术3离子蚀刻技术4铸型技术5聚焦离子束技术扫描电子显微镜样品制备1常规样品制备技术1扫描电镜是研究样品的表面结构，要求样品的表面不变形、无污染、导电好、干燥好，结构清晰、无损坏。对于金属样品或较硬的组织来说样品处理比较简单。对于生物的软组织来说，就需要进行较为复杂的样品处理过程。下面主要介绍生物组织的样品制备技术。扫描电镜是研究样品的表面结构，2生物样品的常规处理方法1取材2表面结构的清洗、暴露3组织固定4组织脱水5组织干燥6组织表面导电处理7组织干燥保存生物样品的常规处理方法1取材3取材取材速度要快，刀片要锋利，避免组织挤压，将要观察的区域用刀片切开暴露，组织块可大至40×40×10mm3,一般5×5×3mm3为宜。取材4清洗对要观察的组织表面用缓冲液或生理盐水进行快速冲洗，除掉表面的粘液、组织液、血液等附着物，尽量将组织表面清洗干净，以利于电镜观察。对于载玻片上的培养细胞要注意冲洗力量，防止细胞脱落。对于难以冲掉的附着物，也可在固定后仔细冲洗。清洗5固定将清洗好的组织迅速放入2%戊二醛固定液中2小时，0.1M磷酸缓冲液清洗5分钟，然后放入1%的锇酸中后固定液1小时，0.1M磷酸缓冲液清洗5分钟。固定64组织脱水固定好的组织清洗后用酒精或丙酮进行梯度脱水，30%，50%，70%，90%，100%各15分钟。4组织脱水固定好的组织清洗后用75组织干燥临界点干燥法：中间液，液态二氧化碳，加压，升温，真空干燥。冰冻干燥法：乙醚，液氮冷冻，真空干燥。

乙腈真空干燥法：脱水后的组织进行50%，70%，90%，100%乙腈置换，各15分钟，然后放入真空镀膜台的钟罩中真空干燥5组织干燥临界点干燥法：中间液，液态二氧化碳，加压，86导电处理真空蒸镀金属膜：离子镀膜（溅射镀膜）：6导电处理真空蒸镀金属膜：9其他样品制备方法1冷冻割断法：离子蚀刻法：铸型技术：离子聚焦束IFB其他样品制备方法1冷冻割断法：10扫描电镜样品制备技术教学课件11扫描电镜样品制备技术教学课件12扫描电镜样品制备技术教学课件13冠状动脉内皮冠状动脉内皮14扫描电镜样品制备技术教学课件15扫描电镜样品制备技术教学课件16扫描电镜样品制备技术教学课件17扫描电镜样品制备技术教学课件18耳蜗毛细胞耳蜗毛细胞19扫描电镜样品制备技术教学课件20扫描电镜样品制备技术教学课件21扫描电子显微镜样品制备1常规样品制备技术2冷冻割断技术3离子蚀刻技术4铸型技术5聚焦离子束技术扫描电子显微镜样品制备1常规样品制备技术22扫描电镜是研究样品的表面结构，要求样品的表面不变形、无污染、导电好、干燥好，结构清晰、无损坏。对于金属样品或较硬的组织来说样品处理比较简单。对于生物的软组织来说，就需要进行较为复杂的样品处理过程。下面主要介绍生物组织的样品制备技术。扫描电镜是研究样品的表面结构，23生物样品的常规处理方法1取材2表面结构的清洗、暴露3组织固定4组织脱水5组织干燥6组织表面导电处理7组织干燥保存生物样品的常规处理方法1取材24取材取材速度要快，刀片要锋利，避免组织挤压，将要观察的区域用刀片切开暴露，组织块可大至40×40×10mm3,一般5×5×3mm3为宜。取材25清洗对要观察的组织表面用缓冲液或生理盐水进行快速冲洗，除掉表面的粘液、组织液、血液等附着物，尽量将组织表面清洗干净，以利于电镜观察。对于载玻片上的培养细胞要注意冲洗力量，防止细胞脱落。对于难以冲掉的附着物，也可在固定后仔细冲洗。清洗26固定将清洗好的组织迅速放入2%戊二醛固定液中2小时，0.1M磷酸缓冲液清洗5分钟，然后放入1%的锇酸中后固定液1小时，0.1M磷酸缓冲液清洗5分钟。固定274组织脱水固定好的组织清洗后用酒精或丙酮进行梯度脱水，30%，50%，70%，90%，100%各15分钟。4组织脱水固定好的组织清洗后用285组织干燥临界点干燥法：中间液，液态二氧化碳，加压，升温，真空干燥。冰冻干燥法：乙醚，液氮冷冻，真空干燥。

乙腈真空干燥法：脱水后的组织进行50%，70%，90%，100%乙腈置换，各15分钟，然后放入真空镀膜台的钟罩中真空干燥5组织干燥临界点干燥法：中间液，液态二氧化碳，加压，296导电处理真空蒸镀金属膜：离子镀膜（溅射镀膜）：6导电处理真空蒸镀金属膜：30其他样品制备方法1冷冻割断法：离子蚀刻法：铸型技术：离子聚焦束IFB其他样品制备方法1冷冻割断法：31扫描电镜样品制备技术教学课件32扫描电镜样品制备技术教学课件33扫描电镜样品制备技术教学课件34冠状动