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文档简介
生物技术重点!!细胞工程蛋白质工程生物技术重点!!细胞工程蛋白质工程228出品质量保障谁用谁请客♦生物技术的确切定义:人们运用现代生物科学,工程学和其他基础学科的知识,按照预先的设计,对生物进行控制和改造或模拟生物及其功能,用来发展商业性加工,产品生产和社会服务的新技术领域。♦生物技术的构成基因工程发酵工程酶工程♦生物技术各构成成分之间的关系现代生物技术的核心是基因工程,而现代生物技术的基础和归宿则是发酵工程和酶工程,否则就不能获得产品和经济效益,也就体现不了基因工程和细胞工程的优越性。基因工程的定义:▼是指按照人们的意愿和设计方案,▼以分子生物学,分子遗传学,生物化学和微生物学为理论基础,▼通过将一种生物细胞的基因分离出来或人工合成新的基因,在体外进行酶切和连接并插入载体分子构成遗传物质的新组合,▼导入到自身细胞或另一种细胞中进行复制和表达等实验手段,▼有目的的实现动物,植物和微生物等物种之间的DNA重组和转移,使现有物种在短时间内趋于完善或创造出新的生物特性。发酵工程的定义
生物技术重点!!228出品质量保障谁用谁请客生物技术重点!!利用微生物的某种特性,通过现代化工程技术手段进行工业规模生产的技术.包括:①传统发酵(有时称酿造),②近代的发酵工业如酒精,如乳酸,丙酮-丁醇等③目前新兴的如抗生素,有机酸,氨基酸,酶制剂,核苷酸,生理活性物质,单细胞蛋白等的发酵生产酶工程的定义:酶工程是利用酶所特有的生物催化性能,将酶学理论与化工技术结合而成的一门生物技术。也就是利用离体酶或者直接利用微生物细胞,动植物细胞,细胞器的特定功能,借助于工程学手段来生产酶制剂并应用于相关行业的一门科学。细胞工程的定义:是利用细胞生物学和分子生物学技术,通过类似于工程学的步骤,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿改变细胞内的遗传物质已获得新型生物或特定细胞产品的一门综合性科学技术。蛋白质工程的定义:蛋白质结构和功能的研究为基础,运用遗传工程的方法,借助计算机信息处理技术的支持,从改变或合成基因入手,定向地改造天然蛋白质或设计全新的人工蛋白质使之具有特定的结构、性质和功能,能更好地为人类服务的一种生物技术。生物技术:农业生物技术、医药生物技术、食品生物技术、海洋生物
生物技术重点!!228出品质量保障谁用谁请客生物技术重点!!技术、环境生物技术、能源生物技术食品生物技术(foodbiotechnology):是生物技术在食品原料生产、加工和制造应用的一个学科。♦食品生物工程下游技术从由基因工程获得的动物、植物和微生物的有机体或器官中,从细胞工程、发酵工程和酶工程产物(发酵液、培养液)中,把目标化合物分离纯化出来,使之达到商业应用目的的过程。食品发酵和酿造等最古老的生物技术加工过程,也包括了①应用现代生物技术改良食品原料的加工品质基因,生产高质量的农产品。②制造食品添加剂。③植物和动物细胞的培养。④与食品加工和制造相关的其它生物技术,如:酶工程、蛋白质工程和酶分子进化工程等。组成DNA的基本单位是四种脱氧核苷酸,dAMP,dGMP,dCMP,dTMP通过3’,5’(3’-羟基和5,-磷酸)一一磷酸二酯键一定顺序相基因工程的最大特点1、打破生物种属界限2、进行生物种内外基因的重组、遗传信息的转移重组DNA技术:DNA克隆、分子克隆、基因克隆。基因工程核心:糖酸骨架生物技术重点!!228出品质量保障谁用谁请客基因工程的研究内容1、目的基因的获取2、构成重组DNA--目的基因与载体的重组3、将重组DNA转移或导入到受体或宿主细胞4、筛选重组转化体阳性克隆5、从筛选出的阳性克隆中提取出扩增的重组DNA分子或基因供分析和研究使用-使目的基因在受体细胞中高效表达生物技术重点!!228出品质量保障谁用谁请客OH*OH核昔一璘赢(NMP)核昔二磷酸(NDP)7核昔三璘酸(NTP)核昔及核甘酸的结构通式途中土脱氧核苔(酸)此处无氧原子,N代表任何一种核昔«3-1根酸中主要的含氮顿।植管、植智酸的名希股其代号桃音tMutkoddei核普酸fNHtckmW5M7A核群核音门械甘酸tNM曾腺嗓喳<A**adsninfJ掾r^dErtosine)脆背联1声MF)0修畛VGi良uaEiine)鸟并f^mnu£ide)鸟甘酸(GMP)胞瑞?ItCiCytufline)抱昔(的ytidinG胞昔酸0CMP1屈唐吟fu.u摩C说碰音tinidinE俄甘酸BMF)1J.NA脱氧榛节T般艮核甘酸:MNMP)臊噪吟£A■ridcniiw)脆氧腺节(deaHLyadeno^i,^e)脱铳相甘酸EAM心乌噫吟«3>SUinino)股,幅电舒tdeaK/guanosinc)腹乳鸟甘酸3GMP;胞唯嵯〔广脱气胞甘《dsM产yrlditie)脱氧胭FSVdCMPl的原普淀tT»工】kymimG脱氧梅甘<dmx/ihymidine)_限零物肯量MTMP, 注二,A、<hU、C、T除了用来代;表相应的含期械基之外•还常常就用来表示相应的核寸和穆什的,见本事行栏3在脱角枝甚触代号之前加上小学的白以羲示脱策型“228出品质量保障谁用谁请客228出品质量保障谁用谁请客1,一级结构组成口NA的基本单位是四种脱氧核甘酸一改ME,4SME照MPBMPI通过3',5,(甲舞基和5,消酸)一磷酸一酯键一定顺序相连JJ糖酸骨架\碱基从骨架侧向突出DNA的一级结构—DNA分干多核甘酸链中4种脱氧核昔酸的排列顺序喊基的排列顺序每条DNA链都有方向性二5,末端-末端5,磷酸基未形成磷酸二酯键的一端3,末端一末端3「果基未被酯化的一端基因工程工具酶一在基因工程中所用各种酶的统称其种类繁多,作用各异,主要包括如下几种酶
I「♦限制性内切核酸酶♦DNA甲基化酶♦DNA聚合酶一v♦依赖于DNA的RNA聚合醵 ♦连接醵激酶 ♦磷酸醵 ♦核酸酶生物技术重点!! 228出品质量保障谁用谁请客♦限制性内切核酸酶限制作用(Restriction)I是指一定类型的细菌可以通过其限制性内切核酸酶的作用,切的降解入侵的外源DNA(例如噬菌体DNA等)使得外源DNA入侵受到限制的现象。修饰作用(Modification)是指在DNA甲基化醇的作用下,生物体自身DNA分子在特定破基的特定位置上发生甲基化而得到修饰,从而免遭自身限制性内切核酸醒降解的现象.♦限制性内切核酸酶(restrictionendonuclease,RE)简称内切酶是指一类能够识别和切割双链DNA分子内核苷酸序列的内切核酸酶。♦DNA甲基化酶(DNAmethycase)简称甲基化酶是指一类能够识别口岫特定序列,并其特定碱基的特定位置上引入甲基而发生修饰作用的酶。※限制酶和甲基化酶主要是从多种微生物中分离纯化而来的。228出品质量保障谁用谁请客228出品质量保障谁用谁请客命名和分类工①寄主微生物属名的头个字母一大写一k组成的三字母(斜体字)②种科的前两个字母-小写一 为其基本形式气猫串曲;曲击汨泞海道或脸击潮淋道乳x&m玄虹溟踊麋通的演;曲的浙游海海;踊§I③当微生物具有特殊名称时卜则将代表该特殊名称的符号加在三个字母后面,非斜体字例如:「例如:「菌株中分离出来的前后顺序,罗马数字Hfcdllld前株中分离出来的第三个福嗜血甘苗属 流行性感冒桂园Hfcdllld前株中分离出来的第三个福掇骸设血/歌你加勃工裴.同属不同种的两种微生物的种名相同一前2个字母相同时好同助口蠹由血皮口利国Mu受0翻e(副流感嗜血杆菌〕—*胸•rno姐姐照明敏3幽瑟(副溶血嗜血杆菌)一Hph♦限制性内切醯一般以提取这类醯生物的(属)名和(种)名的第(32)个字母以及菌株(型)的(代号)来命名。如果从同一生物中先后提取到多种限制性核酸内切醇,则依次用罗马数字加以区分。例如H加。in表示从(Waemopft/(wsinfluenzae或流感嗜血杆菌)菌(英文)株(d)中分离出来的第(3)种限制性内切醇.♦EcoRI表示从(Escherichiacoli或大肠埃希氏菌)菌株RY13中分离出的第(1)种限制性内切酶。
228出品质量保障谁用谁请客228出品质量保障谁用谁请客限制性内切核酸酶分类工根据酶的性质,可将限制酶分为三个类型且切割作用点随机1型限制酶不宜K作为基因工程的工具酶I型;其切割位点距其识别位点至少1000bp且切割作用点随机1型限制酶不宜K作为基因工程的工具酶例如&qAI、箕。BI.EsDI、EcoKIo〈II型工其切割位点与其通别位点重叠或在其附近]II型限制性内切酶是
基因工程的理想工具酶I II型限制性内切酶是
基因工程的理想工具酶例如BamHI,期RI•Hindffl」l山型;其切割位点一般在距识别位点3,端24-26bp处m型限制酶在基因工程中也不常用Ey(pyrimi就四)-i]密喷类含氮碱一c或tEutpuiins)一口票岭类含氮碱fa或g切割方式:r-。形成双链平齐末端根据双链DNA被一。形成5'磷酸端2—5个核昔酸突出切割所成的末端 单链粘性末端-。形成3'羟基端2—5个核昔酸突出单链粘性末端同裂酶:在n型限制性内切核酸酶中,来源不同而识别序列和切割方式相同者称为同裂酶例如:HpanMspI,两者的识别序列都是CCGG同尾酶:虽来源及识别序列不同,但DNA经其切割后能形成相同粘性末端者称为同尾酶。基因工程载体(Vactor):质粒载体(plasmid)-细菌等生物细胞内一类能自我复制的遗传物质生物技术重点!! 228出品质量保障谁用谁请客噬菌体载体(bacteriophage)-细菌病毒的总称柯斯质粒载体(cosmidvactor)♦按照介导的作用目的分类:克隆载体、表达载体♦按照介导的受体生物分类:大肠杆菌载体(原核生物)、酵母载体(真核生物)、植物载体(病毒)、动物载体启动子(promoter):DNA转录起点部位的DNA序列增强子(enhancer):使DNA转录加速的DNA序列衰减子(attenuator):使DNA转录衰减的DNA序列终止子(terminator):使DNA转录终止的DNA序列操纵基因(operator):直接负责DNA转录开启和关闭的DNA序列理想的载体应具备的基本条件:①能自主稳定复制②应具有一个以上的单一限制性内切酹位点,以便目的基因插入③具有某些容易检测的遗传标记(如:抗药性、氨基酸合成酶,空斑形成等)④插入口的基因的幅度较宽@分子量小,拷贝数高⑥对于表达载体还应配备与寄主细胞相适应的启动子,前导序列,加尾信号,增强子等口NA调控元件10228出品质量保障谁用谁请客228出品质量保障谁用谁请客PBR322质粒的优点:①分子质量较小,易于进行重组克隆②拷贝数高一每个细胞可累计高达1000-3000个质粒拷贝「抗氨羊青毒素基因一③具有抗菌素抗性基因4L抗四环素抗性基因一ifer「如果将外源DMA插入到上述BamHI等9种或舐aI等三种限制位点上会导致施安基因或麴『基因的失活I针对这一缺陷构建PBR322衍生质粒2,质粒载体pUC19aUG一美国加利福尼亚大学(UniversityofCalifornia)的科学家构建外PBR322—使用广泛,但带的单一克隆位点较少,筛选程序还较费时间PBR322的基础上发展了质粒曲;口UC19.DUC18.OUC7广①目的基因的获取②构成重组DNA一目的基因与载体的重组基因工程的研究内容<③将重组DNA转移或导入到受体或宿主细胞@筛选重组转化体阳性克隆、5)从筛选出的阳性克隆中提取出扩增的重组DNA分子或基因供分析和研究使用-使0的基因在受体细胞中高效表达PCR技术:定义:PCR技术又称聚合酶链式反应(polymerase
生物技术重点!! 228出品质量保障谁用谁请客chainreaction),是通过模拟体内DNA复制的方式,在体外选择性地将DNA某个特殊区域扩增出来的技术。PCR技术的基本原理在微量离心管中,加入适量的缓冲液,微量的模板DNA,四种脱氧单核昔酸,耐热性多聚酶,一对合成DNA的引物,通过高温变性、低温退火和中温延伸三个阶段为一个循环的反应过程,每一次循环使特异区段的基因拷贝数放大一倍,一般样品是经过30次循环,最终使基因放大了数百万倍;扩增了特异区段的DNA带。①模板:单链或双链DNA②引物:16・30bp合成的寡核苜酸PCR基本要素③DNA聚合酶:耐热的DNA聚合酶PCR基本要素④底物:四种脱氧三磷酸核甘⑤Mg2+=DNA聚合酶的激活剂转化(transformation):是感受态的大肠杆菌细胞接受及表达质粒DNA分子的生命过程转染(transfection):是感受态的大肠杆菌细胞接受及表达噬菌体DNA分子的的生命过程ICP基因工程概念:ICP基因工程主要运用脓杆菌介导法,基因枪法等对植物进行ICP基因12生物技术重点!! 228出品质量保障谁用谁请客遗传转化,借助于伴胞晶体蛋白的毒性,达到抗虫害的目的的工程之 。r大肠杆菌转化法酵母转化法根据受体生物主要分为<植物细胞转化法:动物细胞转化法大肠杆菌转优法一|氯化钙转化症对数生长期的大肠杆菌—悬浮于冰预冷的低渗CaCIN溶液中I大使细胞膜通透性增加
I然后加入重组DNA\使DNA与钙离子形成复合物,吸附于细胞表面经42七短暂热处理促进外源DNA进入感受态细胞13生物技术重点!!ICP基因工程;228出品质量保障谁用谁请客这种蛋白被称作杀虫结晶蛋白(insecticidalcrystal四期也Xf)有活性的毒性分子(6-内毒素.也;冢1出双疝»使细胞由于渗透平衡被破坏而破裂昆虫幼虫将停止进食,最终死亡ICP基因来自于苏云金杆菌(BacillusJ■极颁照破原Rt>「在另一端形成胞晶体[苏云金杆菌的营养体发育到一定阶段后T在其_端形成芽胞;当昆虫吞噬伴胞晶体后活化后的ICP昆虫肠道上皮细胞上的特异性结合蛋白转型为毒性多肽分子一转型后的CP全部或部分的嵌合于细胞膜■细胞膜产生一些孔道基因工程在食品科学中的应用一、基因工程与动物、植物和微生物产品品质的改良(一)培育抗病虫害抗除草剂的植物新品种及抗冻动物新品种的基因工程(二)改良微生物菌种特性的基因工程(二)改良微生物菌种特性的基因工程面包酵母I-具有优良特性的酶产因转移至该菌种中使该国种含有麦芽(透性酶及麦芽糖酶比普通面包酵母制造产生的二氧化碳量也高一面包膨胀性能良好,松软可口微生物菌种在面包烘烤过程中会被杀死一利用其制造因面包食品是安全(三)改良动植物品种质量的基因工程14
生物技术重点!!228出品质量保障谁用谁请客生物技术重点!!1、改良谷物种子贮藏蛋白的基因工程2、改良脂肪酸组成的基因工程3、增加果实甜度的基因工程4、提高果实可溶性固形物含量的基因工程5、提高果实等器官组织微量元素含量的基因工程6、提高动物生长速度,增加动物营养价值的基因工程二、基因工程与植物产品的贮藏保鲜[①PG基因工程(构成反义PG基因,降解PG的活性)②AAG合成酶基因工程(反义RNA技术)“③乙烯形成酶基因工程J④ACC脱氨酶基因工程三、基因工程与食品资源的开发:非洲的应乐果蛋白第三章发酵工程原理及其在食品工业中的应用♦菌种保藏现行的菌种保藏方法有下列诸种二、低温保藏法2、低温定期移植法3、石蜡油低温保藏法,4、干燥保藏I5、甘油管保管法6、真空冷冻干燥法液态超低温保存15
生物技术重点!!228出品质量保障谁用谁请客生物技术重点!!228出品质量保障谁用谁请客AnKafl期dn(yellow)Moq^SSIO(yellow)♦菌种活化与扩大培养:是指将保存的处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面培养活化后,再经过茄子瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养而获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物又称为种子。功能性食品(Functionalfood):又称保健功能食品(Funtionalhealthfood),是指具有调节人体生理功能,适宜特定人群食用,不以治疗疾病为目的的一类食品。这类食品既具有普通食品的营养功能和感官功能,还具备调节人体生理功能的作用。功能性食品与一般食品的区别:共同点f都能提供人体生存必需的基本营养物质,都具有色,香,味,形等感官功能。区别f1.功能性食品f含有一定量的功效成分,具有调节人体机能16
228出品质量保障谁用谁请客228出品质量保障谁用谁请客的功效,而一般食品不强调其特定的生理功能。功能性食品与药品的区别:药品f是治疗疾病的物质,必须在医生的指导下使用,允许一定程度的毒副作用存在功能性食品一本质仍然是食品,它具有调节人体某种机能的作用但它不能取代药物用于治疗疾病.功能性食品*★对于生埋机能正常,想要维护健康或预防某种疾病的人群是一种营养补充剂,*必须达到现代毒理学上的基本无毒或无毒.☆无需医生的处方口左在正常摄入范围内不能带来任何的毒副作用17
生物技术重点!!228出品质量保障谁用谁请客生物技术重点!!第三节发麻工艺控制一、温度对发酵的影响以及控制二.溶解氧浓度对发酵的影响及监控三rpH对发酵的影响及控制五一基质浓度对发酵的影响及补料控制六.泡沫控制七、发酵终点判断[增强机体免疫功能抗肿瘤活性多糖的生理功能<降血脂抗衰老活性多糖的生理功能<降血脂抗衰老<抗菌、抗病毒活性肽的三种生理功能:促免疫,降血压,促进钙吸收谷胱甘肽(Glutathion,GSH)是谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸,通过肽键缩合而成的三肽化合物。谷胱甘肽的结构特点:分子中有一个特殊的肽键(谷氨酸的Y-羧基与半胱氨酸的a-氨基缩合二成肽键);谷胱甘肽中含有一个活泼的巯基(-SH)易被氧化脱氢还原型:GSH氧化型:GSHG18228出品质量保障谁用谁请客228出品质量保障谁用谁请客.咨胱甘肽的生理功能二①GSH可以清除自由基,能起到强有力的保护作用②GSH对于放射线.放射线药物或由于抗肿搐药物所引起的白细胞减少等症状能够起到弓虽有力的保护作用:③GSH与进入机体的有毒化合物、重金属离子或致癌物械等相结合并促进排出体外,起到了中和解毒的作用,临床上已应用GSH来解除丙烯造、氟化物、一氧化族(CO)、重金属、有机试剂等的中毒现象;④GSH可以阻止H2O2的氧化血红细胞f保证血红蛋白能持续发挥输氧功能⑤GSH还能保护含前基醒分子中的・SH基f有利于醒活性的发挥,并且能恢复已被破坏的醒分子中的-SH的活性功能一使能重新恢复活性:©GSH述可以抑制乙醇侵害肝脏产生脂肪肝.降血压肽降血压肽调节血压活性过程如下.血管¥素原 肾素广体血管紧张素I 肾素 (血管紧张素转移酶)JY ACE(iBjpteDiinconvertingenzyme)血管紧张素n(使末端血管收缩)抑带ACE活性导致血压升高降血压肽(图二pip二prpjjfe-p「o-p「。)B■酪蛋白Lactobacillus 阅图媛(瑞士乳杆菌)19生物技术重点!! 228出品质量保障谁用谁请客甘酸酸(GfccU娱) 丙氨酸(AJ骸缴氨酸(YalinQ亮氨酸。加可口0) 异亮甘酸(laoteMine)脯氨酸(ErWin。苯丙氨酸(Phenylalanine) 酪氨酸(TyrosM)色氨酸(Tntntostwi:半胱氨酸(Cysteine)甲硫氨酸或蛋氨酸(MKWanine)丝氨酸(Serine)苏氨酸(Ibl做曲娱)赖氨酸(Lysine)精氨峻(Aigjnij媛) 组氨酸(bktidin爰天冬氨酸(Asparticacid)天冬酰胺(人0期第批照)谷氨酸(期式掰nfcacid)咎氨酰胺(G1M炮nmiQg).酪蛋白磷酸肽(CaseinphQ黄phQr*RtidaCPP)促钙吸收肽》牛乳酪蛋白为原料经单一酶或复合酶水解,再经分离纯化而得到的,含有成串的磷酸第氨基的肽.来自口•酪蛋白的称为口-CPP 它们主要含有来自P•酪蛋白的称为D・CPP 成串的璘酸丝氨酸(班膜PhQ战口愿)CPP与钙、铁一起配合使用:L促进儿童骨骼发育、牙齿生长:Y预防和改善骨质疏松症:I促进骨骼患者康复和预防贫血;常用乳杆菌的种类:乳杆菌属(Lactobacillus链球菌属(Streptococcus)(增强机体免疫力)明串珠球菌属(Pediococcus)20生物技术重点!! 228出品质量保障谁用谁请客「嗜酸乳杆菌4斑烛感飒微生态制剂中常用的菌种==c?保加利亚乳杆菌()〔植物乳杆菌CLsfatOaiw)四、发酵法生产功能微量元素硒、错—人体必需的微量元素一|天然食品中硒、错有机物(有活性)的形式存在,但含量很低矿物质亚硒酸钠等无机硒一对人体的毒性太大,只能用于医药达到治疗的目的不能用于食品达到补充营养的目的有机褚—有明显的生理活性通过生物转化一^无机硒有机硒可以提高硒的生理活性与吸收率,并降低其毒性r有机硒的生理功能—抗氧化,提高免疫力,降低癌症的发病率有机错的生理功能—具有抗氧化,降低血脂等作用的记载,但对人体的生理调节作用没有有机硒明显黄原胶的发酵法生产:生产菌种:野油菜黄单胞菌:◊发酵工艺流程◊分离、提取V纯化「饮料、冷食.调味料、奶制品中可作为乳化稳定剂黄原胶在食品工业中的应用T〔并可改进口感和增强风味结冷胶的发酵法生产少动鞘脂单孢菌(SpningomonascampestriS21生物技术重点!! 228出品质量保障谁用谁请客结冷胶在食品工业中的应用结冷胶不仅作为一种胶海剂◊更重要的是可以赋予食品优良的质地和口感O通常可与多种食品股配合使用.使产品获得最佳的产品结构和稳定性主要应用于糖果,果冻,果酱,馅饼,布丁类等食品的加工海藻糖在食品工业中的应用:用作食品添加剂或食品甜味剂,可使某些干燥食品在重新得水后仍保持原有的形状22
228出品质量保障谁用谁请客228出品质量保障谁用谁请客第四章酶工程酶工程:(enzymeengieering)是又称酶技术,就是利用酶催化作用,在一定的生物反应器中将相应的原料转化成所需要的产品的过程,它是酶学理论与化工技术结合而成的一种新技术。酶活性中心:组成具有特定空间结构的区域,能与底物特意结合并底物转化为产物,这一区域从称为酶的活性中心。酶活性中心内的必需基团「结合基团一与底物相结合使底物与酶形成复合物催化基团f影响底物中某些化学键的稳定性催化底物发生化学反应并使之转化为产物固定化酶的制备方法:共价键结合法吸附法交联法包埋法机械破碎法记种类:胞外酶一分泌透过细胞壁到细胞外部的酶一胞外酷则无需破碎胞内酶—存在于细胞内部的酹一胞内酶的提取,需要破碎技术酶溶法,化学渗透法—非机械破碎法Ir高压匀浆法,珠磨法,超声破碎法—机械破碎法酶的提取:是指在一定条件下,用适当的溶剂处理含酶原料,使酶充分溶解到溶剂中的过程,也称作酶的抽提,酶的初步纯化。「①盐溶液提取酶提取的常用方法②酸溶液提取③碱溶液提取、④有机溶剂提取酶提取的常用方法凝胶过滤法中常用的凝胶交联葡聚糖凝胶(Sephadex)交联琼脂糖凝胶(Sepharose)聚丙烯酰胺凝胶(Biogel)23生物技术重点!!228出品质量保障谁用谁请客酶命冬其滤0融B嘱commission)—>国际睥学委员会国际分类法:某一种海f都有其一定的系统编号—采用四码结号方法I每个号码之间用胭点"第一个号码f表示该醮属于六大类中的某一类第二个号码f属F该类中的某一亚类四码端号一><第三个号码一属于该亚类中的某一小类J第四个号码f表示该小类中的序号淀粉糖加工利用的4种淀粉酶-氧化还原酯(Oxidoreductases)转移酶类(Transferases)水解酶类(Hydro旧等es)一、聚含蹄类(Lya£H5)或裂和悔异构酶类(惶口m白的“幻、连接幅类(Ligase)a-淀粉酶从淀粉分子的内部切开a-1.4糖昔键,但不能水解a-1.6糖昔键和及靠近a-1.6糖背键的几个a-1.4糖背键。B-淀粉酶从淀粉分子的非还原末端逐个切下麦芽糖单位,但不能水解a-1.6糖背键和及靠近a-1.6糖背键的几个a-1.4糖背键。葡萄糖淀粉酶从淀粉分子的非还原末端逐个切下葡萄糖单位,它既能水解a-1.4糖昔键,也能水解a-1.6糖背键。由于形成的产物几乎都是葡萄糖,因此称为糖化酶。异淀粉酶专一水解a-1.6糖昔键。因此能切开支链淀粉的分支。DE、DP值♦低聚糖的功能在工业中分解淀粉时以dextrg更右旋糖,葡萄糖)的当量(隹quNaient}D,£来表示口1.促使双岐杆曲的憎值,调节肠道血群2,抑制内毒素,保护肝脏功能口E二 淀粉水解物中的还原中《以葡萄播计)全体固形物成分果胶酶一果汁澄清,果酒澄清,DPfdegneeofpolymerization) 重合度,聚合度3,调节胃肠功能,防止便秘和腹泻X10 4.激活免疫,抗衰老和抗肿瘤柑去囊衣年:二清胆防-1r口二6,合成维生素工低能量或无能量,不会引起踽齿直连淀粉分子内的a•葡萄糖的数量第五章细胞工程原理及其在食品工业中的应用细胞工程(Cellengineering)的概念:细胞工程是利用细胞生物学和分子生物学技术,通过类似于工程学的步骤,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或特定细胞产品的一门综合性科学技术。细胞融合的定义:是利用自然或人工的方法使两个或几个不同细胞融合为一个细胞,用于制造新的物种或品系及产生单克隆抗体等。细胞拆分的定义:细胞拆分又称细胞质工程,是通过物理或化学方法将细胞质与细胞核分开,再进行不同细胞间核质的重新组合,重建成新细胞,也包括各种细胞器的分离和重新组合,可用于研究细胞核与细胞质的关系的基础研究和育种工作。24
228出品质量保障谁用谁请客228出品质量保障谁用谁请客核移植技术:定义一一是指将不同发育时期的胚胎或成体动物的细胞核,利用显微技术和细胞融合方法一移植到去核卵母细胞中一重新组成胚胎并使之发育成熟的过程。举例说明(P269):O鲤鱼和鲸鱼一两种常见的鱼一鲫鱼(特点)T味道鲜美,容易繁殖和饲养,但个体小[F-鲤鱼T生长迅速,个体大,但是肉质粗厚,味道差二这两种鱼问的杂甘于远掾杂交因此用传统的方%很少能获得成功采用核移植技术将鲤鱼的胚土细胞核移植到鲫鱼的去核卵中获得第一手鲤肥移核个体这种鱼非长到性成熟,并能产生后代目前已经获得了第四代移核鱼产生长速度快一士肌肉蛋盲质含量比细鱼高&7弱q脂肪含量比鲤鱼低5一50%动物细胞培养:Cellculturemethod2.冷冻cell操作工1.MediapreparationDMEM(5(X)ml)+DMEM(5(X)ml)+FBS(50ml)+Antibiotics(5ml)tOtoWimumessentialmedium)dMEM(Du|begggJsmodifiedEaglesmedium)国剑演Ibovineserum)FBS:冷冻贮藏一解派后在50+60Ej30-40mininactivation♦warnn-upmediaat37七Jn50mltube 20ml♦髓脓匐)f用手搓f解每一用块时添加到,迷mediacentriftigeat1500『pmfor3min..pellet+newmedia(6ml)-100mmplate分注+media(6nnii)incubationat37T,5%C02for2-3daysubcultureofcell卬:解M-E□丁A顼先解冻.PBSwith7。舟alcohol.Mediadiscard7-lOinlPBSwashing0.25%Xj55in-tl>TA3nilAdd--W7minin5QmltubeMedia7mlAddcentrifneeMediadiscardnewmediaAddplate分注十mediaAddinw由Uqd沛37£ -for2day&DTA(Ethylene第3tetraacetic总cid,乙—改匹乙酸)植物细胞工程及其在食品工程中的应用(简答或论述P275)25生物技术重点!! 228出品质量保障谁用谁请客植物细胞工程是细胞工程的一个重要组成部分,主要包括,植物细胞培养技术,细胞遗传操作技术,细胞保藏技术,细胞培养技术等。研究起步较早,各种培养物的制备及其他很多操作方法已经基本成熟和规范化.♦植物细胞培养及其在食品中的应用二人们已知的3万多种这类天然产物中有80%来源于高等植物,如色素,香料,调味品.蛋白酶抑制剂和植物肿瘤抑制剂等需求量增长很快一《植;I::;'}这些物质的供应受到严重限制原生质体融合:通过酶解作用将两个亲株的细胞壁去除,在高渗条件下释放出只有原生质膜包被着的球状原生质体。然后将两个亲株的原生质体在高渗条件下混合,加入融合促进剂聚乙二醇,仙台病毒(生物)或电融合等助融,使它们相互凝集。通过细胞质融合,促使两套基因组之间的接触,交换,遗传重组,在适宜条件下使细胞再生,在再生的细胞中获得重组体。原生质体融合技术的特点:.重组频率较高。由于没有细胞壁的阻碍,且在原生质体融合时又加入融合促进剂,所以微生物的原生质体间的杂交频率明显高于常规的杂交方法。.受接合型或致育性的限制较小。两亲株中任何一株都可能起受体或供体的作用,因而有利于不同属间微生物的杂交。另外,原生质体融合是和性无关的杂交,所以受接合型或致育性的限制比较小。.重组体种类较多。由于原生质体融合后,两个亲株的整个基因之间发生相互接触,有机会发生多次交换,产生各种各样的基因组而得到多种类型的重组子;参与融合的亲株不限于两株,这是常规的杂交所达不到的。第六章蛋白质工程蛋白质工程的定义:蛋白质结构和功能的研究为基础,运用遗传工程的方法,借助计算机信息处理技术的支持,从改变或合成基因入手,定向地改造天然蛋白质或设计全新的人工蛋白质使之具有特定的结构、性质和功能,能更好地为人类服务的一种生物技术。蛋白质工程举例一葡萄糖异构酶(P310)_最冠pH70—9.0——>微偏瞳性糖不稳定j1荀萄糖异■构普 易工化使苣金率下降’、最适温度70—80TC高温条件一>有利于反应进程的加快和平衡点的向果糖方向移动 “26
228出品质量保障谁用谁请客228出品质量保障谁用谁请客生物工程下游技术生物工程下游技术7^[也叫下游工程(downstr日3mprocessing)、或生物活性物质分离纯化(andpurificationofbi
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