WATERS液相色谱教程三四七(最全)课件

WATERS液相色谱教程三四七(最全)WATERS液相色谱教程三四七(最全)1启动液相色谱仪器的流程开启HPLC系统各个设备的电源打开泵、自动进样器、检测器电源，待设备通过自检后，打开计算机，启动色谱管理软件准备流动相过滤,脱气色谱泵排气用新配制的流动相灌注泵启动液相色谱仪器的流程开启HPLC系统各个设备的电源WATERS液相色谱教程三四七(最全)课件WATERS液相色谱教程三四七(最全)课件液相色谱对流动相的要求液相色谱仪器对流动相的要求∶与检测器匹配脱气避免用含卤素离子的缓冲盐（不锈钢系统）溶剂的粘度防止细菌的生长液相色谱对流动相的要求液相色谱仪器对流动相的要求∶流动相的脱气流动相脱气的目的使色谱泵的输液准确输液量均匀准确，并且脉动减小保留时间及色谱峰面积的重现性提高提高检测的性能防止气泡引起的尖峰基线稳定，信噪比增加溶剂的紫外吸收本底降低保护色谱柱减少死体积防止填料的氧化流动相的脱气流动相脱气的目的流动相脱气的方法加热简单，如同抽真空一起使用，其效果很好。但容易造成流动相组成的变化抽真空同上，一般在溶剂抽滤的同时，也有脱气的效果超声波振荡简单，但效果不够理想；超声时间不要太长(1分钟左右即可)通惰性气体（一般用氦气）可保持在线连续脱气，多用于低压梯度在线脱气机（in-linedegasser)可保持连续脱气，多用于低压梯度流动相脱气的方法加热流动相的保存有机溶剂流动相:室温下密封,避光保存缓冲盐流动相:当日现配现用低温下密封保存,一般不超过3天防止微生物生长有机溶剂与水（缓冲盐）混配的流动相:低温密封保存防止有机相的挥发选用适宜的容器流动相的保存有机溶剂流动相:2星期1天1星期1小时新鲜配制5101520250分保存于聚乙烯瓶中的超纯水测试条件水样:40mltraceenrichment@2.0ml/min色谱柱:C18反相柱(Waters)梯度:线性100%水－100%乙腈波长:254nm2星期1天1星期1小时新鲜配制5101520250分1天1星期新鲜配制5101520250分保存于棕色玻璃瓶中的超纯水测试条件水样:40mltraceenrichment@2.0ml/min色谱柱:C18反相柱(Waters)梯度:线性100%水－100%乙腈波长:254nm1天1星期新鲜配制5101520250分保存于棕色玻璃瓶中色谱泵的排气操作色谱泵实验前，应先确认泵头内没有气体，如有气体要按以下步骤排气：将泵入口管吸滤头放入脱过气的流动相中打开泵及在线脱气机电源开关将排液阀打开，或断开与色谱柱连接的管路设置流速到6-9ml/min,排液阀出口有液流连续流出必要时(600泵)用10ml注射器从泵入口注入流动相对于600,2695四元梯度泵,分别对所用各路溶剂进行排气操作停止泵流速,关闭排液阀,恢复断开的管路,备用注:泵排气后,应输液稳定(系统压力脉动小,一般在几十Psi以内),否则,需重做排气操作色谱泵的排气操作色谱泵实验前，应先确认泵头内没有气体，如有气Waters515泵的前面板电源开关柱塞杆清洗孔排液阀Waters515泵的前面板电源开关Waters600泵的前面板柱塞杆清洗孔电源开关排液阀泵控制器泵体泵灌注阀Waters600泵的前面板柱塞杆电源开关排液阀泵控制器泵Waters2695分离单元溶剂瓶盘注射器箱门柱温箱溶剂配比单元进入门检测器接液盘前面板显示屏和键盘软盘驱动器样品室门溶剂输送单元进入门Waters2695分离单元溶剂瓶盘注射器箱门柱温箱溶剂2695排气操作示意图面板操作:打开状态(Statas)画面按右下角DirectFunction功能键选DryPime或WetPrime命令选OK即可进行泵的排气注:当流路中充满空气时,按图示做DryPrime若只是更新流动相时,只须作WetPrime2695排气操作示意图面板操作:

关于色谱系统的反压什么是反压(backpressure)流动相流经管路及色谱柱时会有阻力,即所谓的反压,又称系统反压或系统压力Waters习惯用的压力单位是Psi(磅/平方英吋)其它单位有:Bar,Mpa影响系统反压的主要因素:流动相的溶剂组成温度流速关于色谱系统的反压什么是反压(backpressure)

反压与溶剂组成的关系流动相的粘度是产生反压的主要原因有机溶剂－水的粘度随组成而改变其压力随组成变化如下图所示反压与溶剂组成的关系流动相的粘度是产生反压的主要原因

反压与流速的关系流速对反压的影响是线性关系流速增加，反压亦增大下图的实验条件：2.1×30mmSymmetryC18柱,20℃反压与流速的关系流速对反压的影响是线性关系

反压与温度的关系温度对反压的影响是反比关系温度升高,反压降低,对某些流动相的影响更大一些

反压与温度的关系温度对反压的影响是反比关系

影响系统反压的其它因素反压与色谱柱长度成正比反压与填料颗粒度的平方成反比2.5μm填料比3.5μm填料反压高反压与管路直径的四次方成反比(1/D4)反压与管路的长度成正比影响系统反压的其它因素反压与色谱柱长度成正比色谱泵的运行排气后的色谱泵即可用于实验运行注意∶排气后，先设流速为0恢复排气时断开的部分，如:进样器、色谱柱如需要，恢复排气时断开的控制线根据色谱柱的不同，逐渐提高流速到设定值若使用缓冲盐流动相,用前和用后均需用水过渡(包括排气操作)色谱泵的运行排气后的色谱泵即可用于实验运行色谱泵的维护保养流动相要过滤常用缓冲液时，停泵前要用水清洗泵头，并用水冲洗柱塞杆清洗孔关闭排液阀时，不要太用力拧紧，以不渗液为准更换流动相时，要保证两种溶剂的互溶性,如不互溶，要用一种中间溶剂过渡色谱泵在停用时,应先用水洗去缓冲盐,然后用纯甲醇充满泵头及管路,并保存在纯甲醇中色谱泵的维护保养流动相要过滤液相色谱系统的清洗与钝化色谱泵吸滤头,进出口阀及管路(包括进样器和检测池)若被污染,应作清洗和钝化处理一般采用30％磷酸水溶液作为清洗剂，用6M硝酸作为钝化剂，先清洗再钝化清洗的目的是去除不锈钢管路及系统内的污垢钝化的目的是使不锈钢管路的内表面形成光滑均匀的氧化膜液相色谱系统的清洗与钝化色谱泵吸滤头,进出口阀及管路(包括进色谱泵及系统的清洗清洗液用30%磷酸水溶液30%磷酸配制:取85%浓磷酸35ml与65ml水混匀清洗步骤如下:取下色谱柱，用两通(Union)连接进样器和检测器用纯水灌注泵头(四元泵的A,B,C,D四路各为25%)用30%磷酸清洗液洗系统(1ml/min流速)45分钟(四元泵的A,B,C,D四路各为25%)换成清水洗至出口水pH显中性用纯甲醇过渡，浸润泵头及管路，备用色谱泵及系统的清洗清洗液用30%磷酸水溶液色谱泵及系统的钝化钝化液用6M硝酸水溶液6M硝酸的配制:取浓硝酸40ml与60ml水混匀钝化步骤如下:在清洗步骤完成后进行钝化处理确认清洗用的磷酸已基本洗净用纯水灌注泵头(四元泵的A,B,C,D四路各为25%)用6M硝酸水溶液钝化系统(1ml/min流速)45分钟换成清水洗至出口水pH显中性用纯甲醇过渡，浸润泵头及管路，备用色谱泵及系统的钝化钝化液用6M硝酸水溶液实验样品的制备标样和样品标样:又称对照品,它作为液相色谱定性和定量分析的参考标准物,一般是纯度较高的纯物质样品:待测物,一般是成分复杂的混合物液相色谱对样品(包括标样)制备的要求:必须能溶于流动相如样品的溶剂不是流动相,一定要用流动相试溶解度,以免在进样时样品在流动相中析出,堵塞管路和色谱柱样品溶液要过滤除去微粒及杂质了解样品对色谱柱的基质/填料是否有破坏作用实验样品的制备标样和样品复杂样品的预处理样品预处理的目的除去微粒减少干扰杂质浓缩微量的组份提高检测的灵敏度及选择性改善分离的效果有利于保护色谱柱及仪器复杂样品的预处理样品预处理的目的样品预处理的重要性是影响实验成败的决定性步骤占样品分析时间的比例最大样品预处理所用时间远多于色谱分离的时间占分析消耗总成本的比重最大消耗大量的溶剂及其它化学品对分析结果的重现性及准确性影响最大的环节影响实验结果好坏的最重要因素样品预处理的重要性是影响实验成败的决定性步骤样品预处理常用的方法高速离心取上清液过滤、超滤选择性沉淀衍生反应液-液萃取固相提取(SolidPhaseExtract,SPE)Oasis和Sep-Pak固相提取小柱其它样品预处理常用的方法高速离心取上清液去除微粒的方法过滤过滤膜/过滤装置有机滤膜(≤0.5µm)/水溶性滤膜(≤0.45µm)膜片可更换一次性使用的膜“Cartridge”使用方便简单，交叉污染小有更小内径，可用于微量样品的处理高速离心大于：10,000rpm去除微粒的方法过滤超滤机理超滤是一种基于分子量分离的技术目的根据分子量的不同把分子、细胞及病毒等分为不同的馏份除去小分子样品中的大分子蛋白脱盐超滤机理选择性沉淀常用于生化样品中除蛋白有机溶剂乙腈，甲醇强酸三氯乙酸，高氯酸盐50%硫酸铵10%TCA(三氯乙酸钠)选择性沉淀常用于生化样品中除蛋白样品衍生提高检测的灵敏度增加紫外基团以增强紫外检测的灵敏度增加荧光基团以便使用高灵敏度荧光检测器改变分离的选择性改变组份的基团，如：变离子型化合物为非离子型，用反相方法分离典型的例子柱前衍生氨基酸分析样品衍生提高检测的灵敏度AccQ-Tag衍生法NNOHOONO+NOR1R2HNNOOOHNH20NH2NOOOHN++AQC衍生试剂１°及２°氨基酸衍生后的氨基酸CO2N-羟基琥珀酰亚胺N-羟基琥珀酰亚胺半衰期＜1秒半衰期约15秒6-氨基喹啉AccQ-Tag衍生法NNOHOONO+NOR1R2HNN浓缩样品目的：富集微量或痕量组份浓缩样品的方法萃取/吹干沉淀/再溶解色谱法固相提取

Oasis小柱

Sep-Pak小柱浓缩样品目的：富集微量或痕量组份OasisHLB固相提取小柱亲水-亲脂平衡共聚物“亲水”使填料具有水可浸润性质降低与水的接触角“亲脂”提供对被分析物质的反相保留能力NO亲水性单体∶N-乙烯基吡咯烷酮亲脂性单体∶

二乙烯基苯OasisHLB固相提取小柱亲水-亲脂平衡共聚物“亲水”活化/平衡1ml甲醇/1ml水上样多至200ml样品冲洗废弃物1ml5%甲醇/水溶液洗脱想要的化合物1ml甲醇挥发溶剂并重新定容制备样品这是适合于分析众多基质中大多数样品的通用操作步骤建议首先使用这种通用的操作步骤如果需要进一步降低干扰物的影响，可使用二维SPE方法注:此方法于规格为3cc,60mg的Oasis®HLB小柱上开发样品预处理的通用SPE方法活化/平衡1ml甲醇/1ml水上样多至200ml样SPE处理的效果SPE处理的效果进样器的使用进样器的种类:手动进样器－7725i自动进样器－717Plus，2695样品管理系统进样器与系统的连接：进样器的入口与色谱泵的出口相连进样器的出口与色谱柱的入口相连要求：出入口方向不能接错，接头不能留有空隙进样器的连接管路：出口管路一定要用细管(内径≤0.009″),长度要短,尽量减少谱带扩展进样器的使用进样器的种类:手动进样器的使用7725i手动进样器的进样方式:固定体积进样:进样量取决于Loop的体积可变体积进样:进样量由微量注射器量取注意:固定体积进样需要用超过Loop体积5-10倍的样品量进样,以保证进样浓度不被稀释可变体积进样在注射器注入样品后,应尽快将进样器扳至Inject位置,以避免样品在Loop中的扩散进样器的清洗:每次进样前应将微量注射器清洗干净,防止样品间交叉污染,影响实验结果手动进样器的使用7725i手动进样器的进样方式:自动进样器的使用自动进样器(717Plus和2695样品管理系统):样品瓶位置和进样量由软件设定注意:样品瓶中应有超过1／3瓶高度的样品量使用内衬管(Insert)时应设定针高度为2mm(2695)或75%高度(717Plus)进样器的清洗:进样针是流路的组成部分,运行中一直由流动相清洗进样针外部由软件控制在每次进样前用洗针液清洗若注射器内出现气泡，用面板操作的PurgeInject功能清除之自动进样器的使用自动进样器(717Plus和2695样品管理自动进样器的洗针液注意∶洗针溶剂瓶(内放绿色塑料管)不要放在仪器的上部，应放于与仪器同一水平面的实验台上洗针溶剂根据流动相的不同应有不同：自动进样器的洗针液注意∶洗针溶剂根据流动相的不同应有不同：检测器的启动操作连通流路：色谱柱出口接检测器入口注意接头不要留有空隙连接管路要用细管(≤0.009″)检测器出口用适当的管路(内径,长度)通向废液瓶连通数据线路:IEEE电缆(对大多数检测器)与软件busLAC/E卡连接手动进样器的启动信号线与检测器背板上的InjectStart接口连接开启电源开关后,需待检测器通过自检后,才能被软件控制(约需5-10分钟)通流动相平衡至少30分钟后才能正常工作检测器的启动操作连通流路：Waters2487检测器Waters2487检测器2487的显示屏幕通道吸光度灯开/关波长灵敏度下一画面运行时间(分)自控/遥控诊断开/关键盘锁开/关单/双波长Shift开/关AUFS(AbsorbanceUnitFullScale):满量程吸光度单位2487的显示屏幕通道吸光度灯开/关波长灵敏度下一画面运行时2487的面板及操作回车键分屏显示键选项移动键主屏幕方法调用，A/B通道切换设置及诊断单/双波长，自动调零运行/停止键第二功能键监视色谱图屏幕对比度2487的面板及操作回车键分屏显示键选项移动键主屏幕方法调用Waters2996PDA检测器PDA(PhotoDiodeArray):光电二极管矩阵Waters2996PDA检测器PDA(PhotoDi由软件设定检测器参数只需设定如下参数即可采集数据波长范围分辨率每秒采集的光谱数操作极为简便不需费神选择参比波长及其带宽由软件设定检测器参数只需设定如下参数即可采集数据Waters2414示差折光检测器Waters2414示差折光检测器2414的显示屏幕冲洗参比池折射率极性RIU量程检测器温度下一画面运行时间(分)自控/遥控键盘锁开/关模式Shift2414的显示屏幕冲洗参比池折射率极性RIU量程检测器温度下2414的面板及操作回车键屏幕对比度选项移动键主屏幕方法调用，温度设置自动调零运行/停止键第二功能键监视色谱图冲洗参比池设置及诊断下一页2414的面板及操作回车键屏幕对比度选项移动键主屏幕方法调用2414检测器的日常操作设定检测器内、外(如有柱温箱)温度以5ml/min的流速“purge”参比池五分钟不接色谱柱！参数设置按文献值或实验决定至少需要2小时以上的平衡时间通常检测器可以在白天结束工作后不关机，保持0.1到0.5ml/min的流速循环冲洗样品池和参比池,可节省第二天的平衡时间2414检测器的日常操作设定检测器内、外(如有柱温箱)温度使用示差检测器的注意事项不能做梯度实验最大的池耐压是100psi注意保持出口管路的畅通流速范围是0.1-10ml/min此种类型检测器是压力敏感和温度敏感型检测器注意保持泵压力的平稳注意环境温度的恒定使用示差检测器的注意事项不能做梯度实验Waters2475荧光检测器Waters2475荧光检测器2475检测器的特点可调波长荧光检测器双扫描在扫描模式下(Scan)发射波长及激发波长均可扫描高灵敏度∶水的RAMAN峰S/N大于200可编程时间-波长时间-增益由RS232串行口或网线与计算机相连2475检测器的特点可调波长荧光检测器2475的主显示屏发射/能量灯开/关下一页运行时间(分)面板/软件控制键盘锁/开Shift开/关单/多波长通道选择增益波长诊断键开/关灵敏度2475的主显示屏发射/能量灯开/关下一页运行时间(分)面板2475的面板及操作回车键分屏显示键选项移动键主屏幕方法调用，通道切换设置／诊断自动调零运行/停止键第二功能键监视色谱图开／关灯屏幕亮度调节光谱扫描2475的面板及操作回车键分屏显示键选项移动键主屏幕方法调用2475荧光检测器的扫描功能扫描功能

由面板功能执行Empower

英文版亦能由软件执行2475荧光检测器的扫描功能扫描功能荧光检测器使用注意事项不是所有化合物都有荧光，有时需要衍生检测器对溶解气体及其它“淬灭”物质(如甲醇)敏感,流动相最好能在线脱气对Ex及Em的最佳，易受温度、溶剂极性和粘度、pH及样品浓度影响检测池的耐压较低,注意出口管路要畅通设置的发射波长至少要比激发波长高10nm荧光检测器使用注意事项不是所有化合物都有荧光，有时需要衍生流动相脱气与否的信号比较MinutesColumn- WatersPAHColumn, @27ºCEluentA: WaterEluentB: AcetonitrileGradient: 60%Bto100%Busing curve9in12minutes Hold11minutes BacktoinitialconditionsFlowRate 1.2ml/minInjection: 20ul Timeprogrammed wavelengthchanges20.521.022.01000MV脱气未脱气Breeze™withFluorescence1231.Benzo(b)flouranthene–400ppb2.Benzo(k)fluoranthene-200ppb3.Benzo(a)pyrene-200ppb流动相脱气与否的信号比较MinutesColumn- Wa样品浓度对激发和发射波长的影响发射激发~10–3M~10–5M在庚烷中样品浓度对激发和发射波长的影响发射激发~10–3M检测器的使用和保养 如长时间不用检测器可以关掉光源灯(UV,FL)仅在4小时以上不用时,才需关灯频繁开关灯也会影响灯寿命不要让缓冲液长期停滞在检测池内用纯水冲洗保存在纯甲醇中示差检测器及荧光检测器若与其它检测器串联使用,应将此两种检测器串在其它检测器的后面不用检测器的液晶显示屏时，应将其亮度调暗检测器的使用和保养 如长时间不用检测器可以关掉光源灯(UV,Waters中国有限公司培训中心液相色谱教程

(四)

液相色谱柱基础知识

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(四)

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(3)反相色谱柱的选择Waters中国有限公司培训中心液相色谱柱基础知识

(3)反相色谱柱的选择Waters中国液相色谱柱与分离机理的关系从色谱方法上分正相/反相离子交换分子体积排除亲合疏水回受从柱子类型上分分配/吸附离子交换凝胶亲合液相色谱柱与分离机理的关系从色谱方法上分从柱子类型上分对HPLC色谱柱的要求(1)合适的选择性满足不同的分离要求良好的色谱峰形重现性宽应用范围对HPLC色谱柱的要求(1)合适的选择性硅胶基质C18填料都相同吗？色谱实验结果揭示：疏水性不同残留硅羟基活性不同为什么？不同

C18配体键合水平（状况）配体覆盖率不同硅胶颗粒基质密度，表面积，孔径纯度硅胶基质C18填料都相同吗？色谱实验结果揭示：色谱柱品牌名称不同色谱柱“品牌名称”表示不同的硅胶基质WatersSymmetry®C18WatersNova-Pak®C18相同的“品牌名称”,不同的配体表示相同的硅胶基质，键合相不同WatersSymmetry®C18WatersSymmetry®C8注意：由于硅羟基的影响，许多情况下硅胶基质对整个键合相的性能起决定作用色谱柱品牌名称不同色谱柱“品牌名称”表示不同的硅胶基质注Minutes04812162024YMC-Pack™ProC18™YMC-Pack™ProC4™二氢苊萘对羟基苯甲酸丁酯提示:相似的选择性归因于相同的硅胶基质(同一品牌,不同键合相)配体不同的影响：C18与C4Minutes04812162024YMC-Pack™Pr品牌不同的影响:(相同配体)分45678910YMC-Pack™ODS-AQ™YMC-Pack™ProC18™酮洛芬痛灭定萘普生舒洛芬舒洛芬

萘普生酮洛芬和痛灭定注意:由于硅胶颗粒基质不同(品牌不同),分离的选择性不同品牌不同的影响:(相同配体)分45678910YMC-Pa01020304050用于浸润固定相的甲醇水溶液的比例%020406080100在1mL/min流速下的浸润率%C18键合相硅胶柱填料需要

合适的湿润度注意：需要有机溶剂来保证反相填料有合适的湿度,反之停流速后易出现“疏水塌陷”问题01020304050用于浸润固定相的甲醇水溶液的比例%02未湿润的孔湿润的孔注意：保留时间与填料表面积与配体有关。然而，如果硅胶表面未湿润，那么有效的色谱表面积会减少95%，因此，减少被分析物的保留时间即等于“疏水塌陷”，记住：几乎所有的表面积都在孔内！低比例有机溶剂或纯水溶液流动相C18硅胶什么是“疏水塌陷”？未湿润的孔湿润的孔注意：保留时间与填料表面积与配体有关。然而分0246810流动相：0.1%醋酸水溶液阿莫西林Vo：被分析物没有保留“湿润时”“去湿后”Symmetry®C8：疏水塌陷分0246810流动相：0.1%醋酸水溶液阿莫西林Vo：被停流速后(孔去湿:~3%)流动相：0.1%醋酸水溶液Minutes0246810初始时保留时间无变化阿莫西林SymmetryShield™RP8：

无疏水塌陷现象发生内嵌极性基团键合相：使用高比例水溶液流动相时色谱性能稳定停流速后(孔去湿:~3%)流动相：0.1%醋酸水溶液M带有极性基团的反相色谱填料带有极性基团的反相色谱填料内嵌极性基团配体:可能机理-极性基团增加了填料表层水的浓度降低碱性物质的保留减少了拖尾改善与水的浸润性屏蔽了带负电的硅羟基内嵌极性基团配体:可能机理-极性基团增加了填料表层水的浓度降水表面层机理水“屏蔽”层降低了碱性化合物的保留降低了拖尾现象屏蔽了带负电的硅羟基水表面层机理水“屏蔽”层降低了碱性化合物的保留屏蔽了带负电SymmetryShield™RP18TfUSP=1.1分0102030阿米替林Symmetry®C18TfUSP=1.9注意：对碱性化合物而言，可以减少保留时间并且改善色谱峰形相同硅胶基质(配体不同)内置极性基团的配体与直链烷烃配体的比较SymmetryShield™RP18分0102030阿米注:使用相同的流动相SymmetryShield™RP8Symmetry®C8选择性不同呋喃唑酮(痢特灵)杂质分析注:使用相同的流动相SymmetryShield™RP8色谱柱选择性比较表(ln[k]二氢苊)Hypersil®BDSC18Symmetry®C18Inertsil®ODS-2Inertsil®ODS-3Kromasil®C18YMC-Pack™ProC18™YMC-Pack™ODS–AQ™Nova-Pak®C18Hypersil®ODSYMCJ'sphere™ODS–H80YMCJ'sphere™ODS–M80Nucleosil®C18µBondapak™C18YMCJ'sphere™ODS–L80WatersSpherisorb®ODS1Resolve®C18WatersSpherisorb®ODS2-0.20.30.81.31.82.32.811.522.533.5疏水性增加硅羟基活性降低(ln[a]阿米替林/二氢苊)选择性变化色谱柱选择性比较表(ln[k]二氢苊)Hypersil®对HPLC色谱柱的要求(2)合适的选择性良好的色谱峰形定量精度、灵敏度与分离度重现性宽应用范围对HPLC色谱柱的要求(2)合适的选择性USP拖尾因子（TailingFactor）:

Tf＝不对称因子(AssymmetryFactor):

As＝ab峰高之5%处色谱峰对称性的衡量方法abab)(a2+USP拖尾因子（TailingFactor）:ab峰高之对称峰形的益处更准确与精确的定量结果纯度分析稳定性分析更高的灵敏度

更好的检出限与定量限（LOD和LOQ）对低浓度杂质有更强的检测能力更好的分离度更有利于相邻色谱峰的分离对称峰形的益处更准确与精确的定量结果99.6%99.8%99.9%峰面积回收率T=1.00Waters21,379由于拖尾引起的积分误差92.3%95.3%97.8%T=1.58峰面积回收率99.6%99.8%99.9%峰面积回收率T=1.由于拖尾引起的灵敏度差异

他莫昔芬0.25g/mL信噪比11.06.5AUSymmetryC18AU5.0010.00MinutesConventionalC18由于拖尾引起的灵敏度差异他莫昔芬信噪比AUSymmetry峰形对分离度的影响Rs=(t峰2–t峰1)/0.5(w4.4%

峰1+w4.4%

峰2)=(11.5-10.6)/0.5(2.0+0.5)=0.72Minutes0510152025提示:基线分离的分离度

=1.5峰形对分离度的影响Rs=(t峰2–t峰1)/不同填料的峰形比较1.二羟基丙酮2.心得安(T=1.0)3.二氢苊4.阿米替林(T=1.6)1.二羟基丙酮2.心得安(T=5.7)3.二氢苊4.阿米替林(T=7.0)AlltimaC8SymmetryC8不同填料的峰形比较1.二羟基丙酮1.二羟基丙酮Allti具有良好峰形的Symmetry柱建立高效液相色谱柱的新标准，开创新一代高品质色谱柱全新的标准：在很宽的pH范围下，对酸、碱及中性化合物均有非常好的色谱峰形极高的批间重现性独特的选择性良好的柱寿命具有良好峰形的Symmetry柱建立高效液相色谱柱的新标准，对HPLC色谱柱的要求(3)合适的选择性良好的色谱峰形重现性色谱柱间重现性批次间重现性宽应用范围对HPLC色谱柱的要求(3)合适的选择性色谱柱重现性的重要性重现性是液相色谱分析的基本要求缺乏重现性是用户最担心的问题加快方法验证(Validation)的速度更容易传递方法色谱系统之间以及实验室之间确保长期符合认证及系统适应性等要求更容易符合法规要求色谱柱重现性的重要性重现性是液相色谱分析的基本要求同一批次合成的填料—色谱柱之间的重现性柱床填充质量控制塔板数色谱峰对称性反压无选择性差异不同批次合成的填料—色谱柱批次间重现性颗粒的物理性质表面之化学性质柱间重现性与批次间重现性的区别同一批次合成的填料—色谱柱之间的重现性柱间重现性与批次间重现Symmetry—优异的重现性不同产品批号间的差别最低，充分满足各种严格的cGMP要求孔径 RSD=3%渗透性 RSD=2%特征表面积 RSD=2%平均颗粒度 RSD=2%Symmetry—优异的重现性不同产品批号间的差别最低，不同批次间重现性Symmetry®C18品牌B品牌CSymmetry®C18–45批不同批次间重现性Symmetry®C18品牌B品牌C紫杉醇中的不纯物分析:三批色谱柱所得色谱重叠图色谱柱:Symmetry

C83.5m(4.6x100mm)8

流速:1.8mL/min流动相:甲醇/乙腈/水9:34:57检测波长:UV230nm样品:25Lof1mg/mL紫杉醇0.0010.0020.0030.00Minutes

不同批次间重现性紫杉醇中的不纯物分析:三批色谱柱所得色谱重叠图色谱柱:SySymmetry™色谱柱优点优异的色谱峰形无可比拟的重现性所认证的方法置信度高容易达到法规要求认证方法的长期稳定性有利于长期符合法规要求Symmetry™色谱柱优点优异的色谱峰形对HPLC色谱柱的要求(4)合适的选择性良好的色谱峰形重现性宽应用范围pH

范围温度范围对HPLC色谱柱的要求(4)合适的选择性pH对填料稳定性的影响高pH实验pH>8时,许多C18硅胶基质过早地丧失柱效由于填料颗粒溶解,色谱柱内产生空隙随着键合相覆盖率的增加，色谱柱寿命延长低pH实验pH<2时,许多C18硅胶基质过早地丧失柱效由于键合相之水解作用,被测物丧失保留行为使用三官能团键合相可获得最佳的稳定性pH对填料稳定性的影响高pH实验XTerra色谱填料Tetraethoxysilane(TEOS)Polyethoxysilane(MPEOS)Methyltriethoxysilane(MTEOS)杂化颗粒合成(Hybridparticlesynthesis)同时含有有机和无机组分拥有介于有机与无机材料之间的性质Xterra:Waters创新的杂化填料XTerra色谱填料Tetraethoxysilane(T0102030400123456789101112pHXTerra™色谱柱硅羟基电离硅羟基不电离

弱保留

好峰形保留增加好色谱峰形必须严格控制pH方可获得良好色谱重现性pH10

去甲替林阿米替林Minutes0123Minutes0123pH2保留最强

好色谱峰形改善色谱重现性保留因子(k)碱性化合物在不同pH条件下的分离度0102030400123456789101112pHXTe灵敏度与选择性的改变色谱柱:XTerra™RP18,4.6.x150mm,3.5µm检测:254nm(相同进样量)流动相:50%乙腈/40%水/10%含100mM

CAPSO,

pH10流动相:30%乙腈/60%水/10%含100mM磷酸钠,

pH2.0MinutespH100.000.2524681012酮康唑阿司咪唑0酮康唑阿司咪唑AUpH2色谱图重叠pH2与10：阿司咪唑与酮康唑分析灵敏度与选择性的改变色谱柱:XTerra™RP18,4简化方法开发过程123456789101112pH中间pH硅胶柱低pH硅胶柱高pH聚合物基质柱宽pH范围XTerra™填料色谱柱XTerra™色谱柱之宽pH范围(以一当三)简化方法开发过程123456789101112pH中间pH温度pHXTerra®填料：高温稳定性温度pHXTerra®填料：高温稳定性Xterra:高温寿命试验PeakNumber

USPTailingFactor1.多虑平1.22.去甲替林1.13.阿米替林1.14.三甲丙咪嗪1.0AU-0.0050.10Minutes1.002.003.004.005.006.007.008.009.0010.00AU-0.020.48Minutes1.002.003.004.005.006.007.008.009.0010.001234123412341234AU0.000.26Minutes1.002.003.004.005.006.007.008.009.0010.00AU-0.0050.10Minutes1.002.003.004.005.006.007.008.009.0010.00第二十一天第二天XTerra™RP18普通硅胶C18

Conditions:Column:XTerra™RP18,5µm,4.6X150mmMobilePhase:40%pH7,10mMNa2PO4,60%ACNColumnTemp.:60°CFlowRate:1.5mL/minDetector:254nm三环抗抑郁药物分离Xterra:高温寿命试验PeakNumberXterra色谱柱的优点XTerra色谱柱为方法开发提供了极其有效且方便的工具宽pH范围良好色谱峰形高稳定性高速度WatersPatentTechnology2000R&D100AwardWinnerXterra色谱柱的优点XTerra色谱柱为方法开发提供了极最新研制的Atlantis反相柱最新研制的Atlantis反相柱新型AtlantisTM填料的性质提高极性物质保留能力的同时，改善常规反相色谱性能双官能团键合C18(dC18)端基封口平均孔径为100Å颗粒度：3,5及10m

新型AtlantisTM填料的性质提高极性物质保留能力的同新型AtlantisTM填料的特点对极性与非极性化合物的优异保留特性在100％水溶液流动相中运行保持色谱性能稳定峰形优异超低键合相流失，质谱兼容酸性条件下稳定性良好双键键合C18，使之：具有较长的色谱柱寿命低pH条件下稳定性增强极佳的色谱柱间重现性新型AtlantisTM填料的特点对极性与非极性化合物的优同时分离极性与非极性化合物极性化合物在AtlantisTM色谱柱上保留较强，而非极性物质在其上的保留时间与常规C18色谱柱相似。12345109876V0=0.98minTime(Min)1.002.003.004.005.006.007.008.009.0010.0011.0012.0013.0014.0015.00ConditionsColumn:AtlantisTM4.6x150mm,5µmMobilePhaseA:H2OMobilePhaseB:ACNMobilePhaseC:100mMNH4COOH,pH3.0Flowrate:2.0mL/minGradient:TimeProfile(min)%A%B%C0.008010

1010.0095515.00955Injectionvolume:5.0µLTemperature:30oCDetection:UV@254nmCompounds1.Uracil2.Acetanilide3.Triamcinolone4.Hydrocortisone5.2-Amino-7-chloro-5-oxo-5H-[1]-benzopyrano-[2,3-b]pyridinecarbonitrile6.6a-Methyl-17a-hydroxyprogesterone7.3-Aminofluoranthene8.2-Bromofluorene9.Perylene10.Naphthol[2,3-a]pyrene同时分离极性与非极性化合物极性化合物在AtlantisTM儿茶酚胺及其代谢产物12345109876Time(Min)2.004.006.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.00V0=1.83min化合物:1.去甲肾上腺素(NE)2.肾上腺素(E)3.3,4-二羟基苯基丙氨酸(DOPA)4.多巴胺(DA)5.3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇(MHPG)6.4-羟基-3-甲氧基苯基乙醇酸(VMA)7.5-羟色胺(5-HT)8.3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)9.5-羟基-3-吲哚乙酸(5HIAA)10.4-羟基-3-甲氧基苯乙酸(HVA)条件色谱柱: 4.6x150mm,5µm流动相A: H2O流动相B: ACN流动相C: 100mMNH4COOH,pH3.0流速 1.0mL/min梯度: 时间 流动相组成 (min) %A%B%C 0.00 90010 5.00 90010 15.0 652510 20.0 652510进样体积: 10µL温度: 30oC检测: UV@280nm儿茶酚胺及其代谢产物12345109876Time(Min水溶性维生素(Vitamins)化合物:

USP拖尾因子1.L-抗坏血酸(Vc) 1.122.烟酸 1.273.硫胺(VB1) 1.204.吡哆醛 1.135.VB6 1.046.叶酸 1.107.咖啡因 1.108.核黄素(VB2) 1.14Time(Min)1.002.003.004.005.006.007.008.009.0010.0011.0012.0013.0014.0015.0012345876V0=1.37min条件色谱柱:4.6x150mm,5µm流动相A:0.1%TFA流动相B:乙腈流速:1.4mL/min梯度: 时间 流动相组成 (min) %A%B 0.0 1000 4.0 973 6.0 8515 15.0 8020进样体积:10.0µL温度:30oC检测:UV@260nm水溶性维生素(Vitamins)化合物: 反相色谱柱的选择小结:(1)常规应用现代高纯硅胶色谱柱：SymmetryShield/Symmetry优点：峰形好，重现性高，寿命长限制：pH2-8流动相中含有大量水溶液采用Shield技术：XTerraRP或SymmetryRP填料Atlantis填料技术优点：在含有大量水溶液（100％水溶液）流动相中性能稳定：峰形好反相色谱柱的选择小结:(1)常规应用需要使用宽pH值或高温条件－如生物碱分离XTerra杂化颗粒技术：pH1-12优点：pH范围宽，高温条件下填料稳定性好，色谱峰形好，寿命长采用质谱检测器:窄内径/小颗粒/短柱XterraMSC18AtlantisSymmetryC18反相色谱柱的选择小结:(2)需要使用宽pH值或高温条件－如生物碱分离反相色谱柱的选择小需要提高极性物质的保留常规pH：AtlantisdC18极端pH：Xterra：如碱性化合物需要分析分子量较大的多肽或蛋白Symmetry300C18C4反相色谱柱的选择小结:(3)需要提高极性物质的保留反相色谱柱的选择小结:(3)结论各种品牌的C18柱皆有各自不同的选择性结论各种品牌的C18柱皆有各自不同的选择性液相色谱教程

(七)

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液相色谱常见问题分析Waters中国色谱图常见问题色谱图常见问题主要有三类:色谱峰峰形异常问题例如负峰,宽峰,肩峰,双峰,峰形不对称等色谱图中多峰少峰问题色谱图未出峰,出峰比预想的多等色谱峰保留时间问题保留时间不稳定等色谱图常见问题色谱图常见问题主要有三类:色谱图常见问题分析(一)色谱峰峰形异常问题:所有的峰均为负峰:信号电缆接反或检测器输出极性设置颠倒光学装置尚未达到平衡一个或几个峰是负峰流动相吸收本底高进样过程中进了空气离子对分离中的系统峰样品组分的吸收(RI或UV)低于流动相色谱图常见问题分析(一)色谱峰峰形异常问题:色谱图常见问题分析(一)色谱峰峰形异常问题:所有的峰都是宽峰系统未平衡或未达到化学平衡溶样的溶剂比流动相强很多色谱柱类型或尺寸不正确色谱柱或保护柱被污染或降级温度变化对色谱柱的影响色谱图常见问题分析(一)色谱峰峰形异常问题:色谱图常见问题分析(一)色谱峰峰形异常问题:较早洗脱的峰呈宽峰进样体积过大或样品浓度太高进样器有问题,定量环(Loop)大小不合适在线过滤器,保护柱,色谱柱或管路堵塞管路问题:内径不对或切管不正确管路连接问题:接头或锥箍不正确检测器时间常数不正确色谱图常见问题分析(一)色谱峰峰形异常问题:色谱图常见问题分析(一)色谱峰峰形异常问题:峰比预想的要小样品粘度过大进样器有问题或进样体积有误检测器设置不正确,定量环(Loop)体积不正确检测器输出未置零用了不正确的检测器输出信号检测池被污染检测器的灯可能有问题色谱图常见问题分析(一)色谱峰峰形异常问题:色谱图常见问题分析(一)色谱峰峰形异常问题:双峰或肩峰进样量或样品浓度过大保护柱或色谱柱进口堵塞保护柱或色谱柱污染或失效前伸峰进样量或样品浓度过大溶样的溶剂相对于流动相太强保护柱或色谱柱污染或失效色谱图常见问题分析(一)色谱峰峰形异常问题:色谱图常见问题分析(一)色谱峰峰形异常问题:平头峰检测器设置不正确进样体积太大或样品浓度太高拖尾峰保护柱或色谱柱问题:污染或失效进样问题检测器时间常数不正确色谱图常见问题分析(一)色谱峰峰形异常问题:拖尾是由什么引起的?混合型保留机理与键合相的疏水作用与带电点的离子交换作用拖尾是由什么引起的?混合型保留机理缓冲液的pH与拖尾缓冲液的pH与拖尾色谱图常见问题分析(二)色谱图多峰少峰问题:色谱图中未出峰:进样问题:未进样或样品分解流动相问题:泵未输液或流动相不正确检测器设置不正确,或检测器有问题色谱图常见问题分析(二)色谱图多峰少峰问题:色谱图常见问题分析(二)色谱图多峰少峰问题:色谱图中出峰比预想的少样品分解色谱柱分辨率丧失用错流动相梯度洗脱时平衡不足(例如,过早将手动进样器扳至(Load)位置色谱图常见问题分析(二)色谱图多峰少峰问题:色谱图常见问题分析(二)色谱图多峰少峰问题:色谱图中出峰比预想的多(鬼峰):样品分解或制样时导入了杂质流动相被污染,或用错流动相流动相中含有稳定剂或稳定剂发生变化前次进样的后流出物(某些Rt值特大的组分)进样器被污染,洗针系统出问题或注射器脏未充分平衡进样器Loop管保护柱脏,色谱柱被污染,分辨率下降色谱图常见问题分析(二)色谱图多峰少峰问题:色谱图常见问题分析(三)色谱峰保留时间问题:保留时间飘忽不定(各次运行之间)系统不稳定或未达化学平衡泵压力不稳(泵头里有气泡)进样体积过大或样品浓度过大温度波动流动相混合不均匀色谱柱被污染色谱图常见问题分析(三)色谱峰保留时间问题:色谱图常见问题分析(三)色谱峰保留时间问题:保留时间增加或减少(各次运行之间)系统不稳定或化学平衡不足泵流速变化温度变化色谱柱污染,柱效下降流动相被污染溶剂入口过滤器堵或管路堵塞系统渗漏色谱图常见问题分析(三)色谱峰保留时间问题:色谱图常见问题分析(三)色谱峰保留时间问题:保留时间改变到一个新的恒定值流动相不正确或其组成不正确泵流速变化实际输液的流速不正确(泵失灵或故障)环境温度变化；柱温不正确色谱柱尺寸或类型不正确色谱柱被污染流动相含有稳定剂或稳定剂发生变化输液系统的梯度滞后体积不正确色谱图常见问题分析(三)色谱峰保留时间问题:HPLC实验中常见问题系统压力问题压力高压力低或没有压力压力不稳流路基线噪音问题基线不稳定(不重复)长、短程振荡基线漂移噪音脉冲尖刺HPLC实验中常见问题系统压力问题HPLC常见问题分析系统压力问题压力高的原因温度太低流速太高流动相粘度大管路堵塞仪器或色谱柱堵塞压力传感器问题HPLC常见问题分析系统压力问题系统压力问题压力低或没有压力温度太高;流速太低泵关闭或保险丝断了泵未输送流动相系统内有渗漏处所用溶剂不正确自动进样器在Purge时卡住HPLC常见问题分析系统压力问题HPLC常见问题分析系统压力问题压力低或没有压力（续）储液瓶中无溶剂低压限设置不当泵未正确排气溶剂入口过滤头堵入口管路中有空气泵失效HPLC常见问题分析系统压力问题HPLC常见问题分析系统压力问题压力不稳压力传感器问题泵排气不充分泵失效流动相未正确脱气所用溶剂不混溶或易挥发HPLC常见问题分析系统压力问题HPLC常见问题分析流路基线噪音问题基线不稳定(不重复)检测池中有大的气泡流路中有小气泡流过系统未稳定或未达到化学平衡流动相被污染检测器流动池漏色谱柱污染HPLC常见问题分析流路基线噪音问题HPLC常见问题分析流路基线噪音问题基线漂移系统不稳或未化学平衡温度波动流动相未正确脱气流动相被污染;流动相中有稳定剂或稳定剂变化检测器流动池漏;系统中有渗漏色谱柱污染;固定相渗漏选用不正确的检测波长(相对于溶剂)有迟流出的组分HPLC常见问题分析流路基线噪音问题HPLC常见问题分析流路基线噪音问题短程振荡泵压不稳泵入口管松,弯或堵塞溶剂混合不充分检测池中有大气泡泵入口阀脏或失效泵柱塞杆密封垫磨损检测器出口溶液成滴状流入废液瓶HPLC常见问题分析流路基线噪音问题HPLC常见问题分析流路基线噪音问题长程振荡温度波动溶剂被循环通过系统噪音脉冲尖刺流路中有小气泡泵头有气泡空腔入口阀脏或失效检测池中有小颗粒物泵或检测器未正确接地HPLC常见问题分析流路基线噪音问题HPLC常见问题分析判断故障与故障排除的原则规则一∶确认问题至少发生两次以上。如果问题不重复出现，很难证实其确实为问题规则二∶从最简单的因素入手规则三∶一次只变化一个因素，以使你能够确认所变因素与问题之间的关联判断故障与故障排除的原则规则一∶确认问题至少发生两次以上。如判断故障与故障排除的原则规则四∶恢复原状。如果使用更换组件方法来查找问题之所在,完毕后应将原有完好组件安装回原处。否则,换下的组件将来很难再利用,会造成浪费规则五∶养成记录的好习惯。一个完整的好记录是成功地进行故障排除的关键判断故障与故障排除的原则规则四∶恢复原状。如果使用更换组件方人文科学：文学、语言学广义文科社会科学：法学，经济学，政治学，新闻学，社会学，历史学，哲学什么是文理科分科？自然科学；理学：物理学，化学；工学：建筑，土木工程，机械工程，电子工程；农学；医学数学广义理科人文科学：广义文科社会科学：法学，经济学，政治学，新闻学，社142文科：研究人、社会规律研究对象理科：研究物、自然规律文科：思辨性强，实证性弱，重归纳，总结，联系理科：思辨性弱，实证性强，重实践，内在逻辑的建立研究特点文科：研究人、社会规律研究对象理科：研究物、文科：思辨性强，143高中学习的科目理科语文数学英语物理化学生物文科语文数学英语政治历史地理高中学习的科目理科144狭义文科：历史，政治，地理高中的文理科狭义理科：物理，化学，生物文理分科核心含义文理分科最大作用区分了考试科目和报考专业确定主攻方向，能强化重点科目的学习，为科学安排时间打下基础，也直接影响高考的成败，影响将来的就业。狭义文科：高中的文理科狭义理科：文理分科核心含义文理分科最大145文科特点人才特点：以论理和表达为主要能力的形象思维。学习特点：以记忆、归纳、整理、比较为特点的学习。文科记忆量较大，理解能力要求较高。就业面：以社会为对象的事务性人才，从事媒体传播、金融财会、社会服务和教育等行业文科比较好工作：金融财会，高级翻译，法官，检察官，外交官，证券类,经济师，律师，营销师，公务员，旅游等。人才特点：以推理和研究为主要能力的逻辑思维。学习特点：以记忆、理解、推理、计算为特点的学习。理科需要推理能力强，逻辑思维能力强。就业面：以技术为对象的生产型人才，可从事的职业类型较多。理科比较好工作：光电类，医学类，会计师，公务员，工程师等。理科特点

文科特点人才特点：以论理和表达为主要能力的形象思维。人才特点146关于高考理科语文（总分150）：6月7日早上，两个半小时数学（总分150）：6月7日下午，两个小时理科综合（总分300分，物理110，化学100，生物90）：6月8日早上，两个半小时英语（总分150）：6月8日下午，两个小时关于高考理科147关于高考文科语文（总分150）：6月7日早上，两个半小时数学（总分150）：6月7日下午，两个小时文科综合（总分300分，政治100，历史100，地理100）：6月8日早上，两个半小时英语（总分150）：6月8日下午，两个小时关于高考文科148广西12-15年高考各批次录取分数线

理科文科一本二本三本一本二本三本2012528444332544473409201351041331054146739520145204073265504634042015480320530380广西12-15年高考各批次录取分数线理科文科一本二本三本一149文科、理科到底有什么专业呢！？1哲学

2社会学

3社会工作

4应用心理学

5劳动与社会保障

6汉语言文学

7新闻学

8广告学

9播音与主持艺术

10历史学

11考古学

12博物馆学

13英语

14俄语

15西班牙语

16日语

17朝鲜语

18艺术设计

19绘画

20音乐表演

21音乐学

22作曲与作曲技术理论

23社会体育

24运动训练

25经济学

26国际经济与贸易

27财政学

28金融学

29法学

30政治学与行政学

31国际政治

32行政管理

33思想政治教育文科文科、理科到底有什么专业呢！？1哲学

2社会学

3社会150文科、理科到底有什么专业呢！？理科数学与应用数学

信息与计算科学

理论与应用力学

统计学,物理学

应用物理学

光信息科学与技术

化学,应用化学

高分子材料与工程

化学工程与工艺

材料化学

生物科学,生物技术

制药工程

机械工程及自动化

工程力学,工业工程

车辆工程,工业设计

热能与动力工程

材料物理

材料科学与工程

无机非金属材料

材料成型与控制工程

金属材料工程

交通运输,交通工程

土木工程

食品科学与工程

包装工程,生物工程

农业机械化及其自动化,电子信息科学与技术,微电子技术

电子科学与技术

文科、理科到底有什么专业呢！？理科数学与应用数学151物流工程

食品质量与安全

汽车服务工程

药物制剂

医事法学

动物医学

动物科学

农学

园艺

植物保护

农业资源与环境

服装设计与工程

物流管理

农林经济管理

地下水科学与工程理科自动化,信息工程,计算机科学与技术

地质学,地理科学,资源环境与城乡规划管理

资源勘查工程,土地资源管理,地球物理学

地理信息系统,勘查技术与工程,测绘工程

环境工程,环境科学,水文学与水资源工程

预防医学,放射医学,临床医学,口腔医学

药学,护理学,软件工程,信用管理物流工程

食品质量与安全

汽车服务工程

药物制剂

医事法学

152Ⅰ经济学Ⅱ国际经济与贸易Ⅲ新闻学Ⅳ电子信息科学与技术Ⅴ财政学Ⅵ信息与计算科学Ⅶ会计学Ⅷ自动化Ⅸ档案学Ⅹ公共事业管理中国目前就业面最广的十大高考专业盘点Ⅰ经济学中国目前就业面最广的十大高考专业盘点153近年来十大热门专业1.金融2.建筑、设计3.通讯4.计算机、信息技术5.电气工程6.电子商务7.工业设计8.国际关系9.法律10.土木工程近年来十大热门专业1.金融6.电子商务154文理选科的重要性表现为三个方面：选择错位，容易让自己在最近的学业上，缺乏兴趣，欠缺激情，效率低下，效果低微，从而直接影响高考的成功。选择错位，可能使自己在高考填报志愿意中不知何从选择，造成选错专业，选错学校，进大学后学习没兴趣，甚至自己退学回家。

选择错位，可能使自己在以后的事业中，没有敬业精神，没有工作热情，工作效率低下，事业高度有限，以致深刻地影响事业的成功。文理选科的重要性表现为三个方面：选择错位，容易让自己在最近的155应尽量避免选择文理的误区

1、“墙头草”现象。班里或者学校里，哪科报的多，我就报哪科。2、根据传统观念，不认真了解现在的实际情况，自认为哪种类型好就选哪种。3、分班态度不端正，认为哪科好念就选哪科。学习好的报理科，学习差的人才学文科。智力好的报理科，智力差的人才学文科。4、过早的为将来工作寻找门路，认为哪科好赚钱就选哪科5、情感取向型。认为某某教师有魅力，某某同学和自己关系特别好，随之选择6、班级依恋症。认为目前班级好、和谐，感情深，对陌生的环境恐惧。7、和父母赌气，家长想让我学理，我偏学文。

以上这些都不是选择文理的好依据，而且常常是导致选择后学习困难的主要原因。又有70%以上的学生因为这些原因选择了不适合自己的科目，后悔莫及。

应尽量避免选择文理的误区1、“墙头草”现象。班里或者学校里156女生读文科更合适吗？

目前有一种很普遍的现象，高中文理分科时，男生偏理，女生偏文。一个文科班，五十几个学生，男生只有十来名，如何看待文科班这种“阴盛阳衰”的现象？是因为女生更适合读文科吗？女生认识上更倾向于形象思维，她们感受力、洞察力比较强，有表达上的优势，选择文科是正常的；而男生倾向于关注自然科学，喜欢技术研究、开发创新，分析力、判断力强，逻辑思维发达，选择理科也在常理之中。不过，这两者之间没有绝对的界限，关键还是前面提到的要看学生个人的兴趣爱好以及学习个性能力的倾向。如何找到和发现自己的特长、天赋、能力？这要看学生自己对学科的感觉。可能这个学生会对某个学科感觉特别好，或用相同的时间或少量的时间获得的效果与其它学科花学费多时间获得的效果相当或更好，那说明这个学生有学习这一科的特长和能力，与此同时就应该考虑，哪一科能更好地发挥和促进自己的特长发展。一些选择理科的男生如果在女生成堆的文科班里，可能会更加出类拔萃。从目前看，女生偏爱语言、文学等文科类专业，这并不是因为女生缺乏创造性思维和科学能力，而是女生教育中缺失了这部分内容，有不少人都认为这些应该让男生去做。

女生读文科更合适吗？目前有一种很普遍的现157理科生就业面更广泛？

文理分科，大家关心的另外一个问题是，针对大学毕业之后的就业，文科与理科之间到底哪一个优势更大？目前就业的情况对理科生是比较有利，企业需要的理科生比较多，但是，并不是学文科的都无法分配工作，毕业就是失业。选择了理科，并不意味着已经捧上了金饭碗；选择了文科，也同样不会注定这个人就默默无闻。重理轻文现象历来存在，但社会的发展越来越多元化，对人才的需求越来越多，只要有实力，不论是学文还是学理，都能在社会上找到自己的位置。从现在看，尽管文理科录取比例有区别，但总量还是相当庞大的。不论选文还是选理，你都有较大的升学机会。现在的关键是，你在选择之后如何适应文理科的学习要求。理科生就业面更广泛？文理分科，大家关心的另外一个问题是，针158选择文科理科是高中生活的一次重大选择，是今后人生道路的分水岭，要慎重，慎重，慎重。选文科好还是选理科？其实主要的分科标准就是好好分析一下自己，从以下几个方面来考虑：

1、你的实力。2、你的兴趣与特长。

3、你的志向。4、你的态度。5、你的家庭情况。四、怎样选择文理选择文科理科是高中生活的一次重大选择，是今后人生道路的分水岭159

有些同学认为自己实在读不了理科，而选择文科，这种现象是很多的，但高考过后才醒悟过来，后当初没有慎重选择。因此，选择文科还是选择理科，还要注意从实际出发，扬长避短。好好分析一下你的现实情况，看看你的优势在哪里。你的文理水平差多少，你的潜力在哪儿？特长于语言、写作方面还是运算、逻辑推理？在每次大考中你是凭什么取胜，又是什么拖了你的后腿，这就要认真分析，整体把握。如果你的政治、历史，远远强于你的物理化学，你就去读文科，因为成绩本身就反映了很多问题，比方你的兴趣，你的思维方式，智力优势等。

你的实力有些同学认为自己实在读不了理科，而选择文科，这种现160

1、你有较强的逻辑推断能力，动手能力较强。

2、数学、理化基础比较好，理科之间有更多相通之处，会互相促进。

3、记忆力较强，能准确记忆各类公式。

4、以后想从事理工方面的工作，比如：计算机、电子、建筑设计、土木工程、管理信息、生物工程、医学、制药、应用化学、农业等、会计师,公务员,老师,工程师；会计学、市场营销、财务管理。5、学校的理科毕业生情况总优于文科。6、各科基础薄弱、学习成绩较差、学习主动性不强、不爱看书。如果你有下面几项建议选择理科：学理科进入重点大学的条件：

数学好；

物理、化学至少有一科在前列；英语不差；不喜欢文科。

1、你有较强的逻辑推断能力，动手能力较强。

2、数学、理161如果你有下面几项建议选择文科：1、语文、数学、英语、政史地基础好，理化成绩一般，尤其语文、外语内容有很多与政史地是相通的，会互相促进

。2、记忆力强，善于联想。3、自己知识面广。4、喜欢看各类书籍。5、有一定的文化积淀。6、以后想从事以下方面的工作，比如：法官、律师、老师、营销师、公务员、旅游、证券类、国际经贸、金融学、保险学、财政学、贸易经济、物流、语言文学、新闻、广告学、考古、管理、劳动与社会保障、会计学、市场营销、财务管理、心理学等。学文科进入重点大学的条件：在文科高考中，最拉分的就是数学和英语。数学能拿出手；

英语也不差；能看得下去书，整理和记忆能力强；理化生没有很高的天赋，成绩平平。

如果你有下面几项建议选择文科：1、语文、数学、英语、政史地基162

兴趣是学好一门功课的重要因素，兴趣和爱好可以决定你的学习态度。有了兴趣，可以使高二、高三学习变得多姿多彩。有了兴趣，才可以让你全身心的投入学习，而不会抱怨声不断。因为你兴趣所在，所以你的学习是为你自己学，而不是因为是父母让你读这个科目而显得压力重重。喜欢学文，感觉学文科有优势的学生，我们建议他学文；同样，喜欢学理，逻辑能力强的学生，我们建议学理。但无论你学习文还是理,没有一定兴趣就会在竞争中丧失主动性,这在高三体现的尤为明显.07届文科班有名学生，在分班之前一直成绩平平，分班后，成绩突飞猛进，高考在区内前五名。后来她说，“我从小就钟爱文科，并一直保持到高中，所以选了文科并获得了成功”。

你的兴趣兴趣是学好一门功课的重要因素，兴趣和爱好可以决163

读文、读理，对于大家今后的志愿是