实验三精液品质常规评定、精子密度的计算2

实验二

精液品质常规评定、精子密度的计算直观检查查项目射精量色泽气味云雾状PH值美兰退色色试验微观检查查项目精子活力力估测精子活力力计数密度测定定:计数数板计数数、比色色计测定定畸形率：：形态畸畸形率、、顶体畸畸形率(1)射射精量的的测定方方法概念:射射精量量是指每每次射精精的体积积测定:以以连续续3次以以上正常常采集到到的精液液的平均均值代表表测定方法法:可用用体积测测量容器器如刻度度试管或或量筒,,也可用用电子秤秤称重近近似代表表体积1射精精量(2)公公畜的正正常射精精量影响射精精量的因因素:种类、睾睾丸大小小质地、、季节、、健康状状况（3）射射精量不不正常的的原因2.色色泽泽指精液的的颜色及及其浓厚厚程度，，它某种种程度反反应精液液是否正正常，精精子的浓浓度高低低。正常的精精液：猪：浅灰灰白至白白色牛羊：乳乳白色或或乳黄色色不正常精精液原因因分析4.云云雾状是指新鲜鲜精液在在33--35℃℃温度度下，精精子成群群运动所所产生的的上下翻翻卷的现现象。云雾状的的明显程程度代表表高浓度度的精液液中精子子活力的的高低。。云雾状分分级标准准+++翻翻明明显而且且较快++翻翻明显但但较慢+仔仔细看看才能看看到精液液的移动动-无无精精液移动动3.气气味味正常的精精液：应应没有很很浓的气气味，或或略带动动物特有有的腥膻膻味腥味：有有脓液臊味：有有尿液或或包皮液液1.活力的估估测(1)概概念:37℃下,精精液中前进运动动精子占占总精子子数的百百分率(2)主主要测定定方法::估测法法（二）微微观项目目检查(1)密密度的概概念及表表示方法法单位体积积精液中中所含的的精子数数表示方法法:个//ml或或亿/ml2.精子子的密度度检查精子密度度检查（（估测法）取一小滴滴精液滴滴在清洁洁载玻片片上，用用另一载载玻片轻轻推，使使精液成成一薄层层，400××镜下观观察密：视野野中精子子密度很很大，彼彼此间隙隙很小，，看不清清楚各精精子运动动状况（（约≥10亿亿/ml)中：精子子间空隙隙明显，，彼此间间约有一一个精子子长度的的空隙（（约2亿～10亿//ml)稀：精子子间空隙隙超过1个精子子长度（（约≤2亿//ml）(2)各各种家畜畜精液的的精子密密度(4)精精子密度度的测定定方法精子密度度计数板板(器))简介精液的稀稀释精液注入入计数室室精子计数数精子密度度计算精子密度度计数板板(器))简介精子计数数室长宽宽各1mm,面积1mm2高度0..1mm,体积0..1mm3由双线或或三线组组成25个(5X5)中方格每个中方方格内有有16个个小方格格(4X4)共计400个小小方格精子密度度计数板板(器)简介精子计数数室长宽宽各1mm,面面积1mm2高度0..1mm,体积积0.1mm3由双线或或三线组组成25个(5X5)中方格每个中方方格内有有16个个小方格格(4X4)共计400个小小方格精子计数数室及一一个中方方格返回密度测定定之精液液稀释将精液注注入计数数室前必必须对精精液进行行稀释,,以便于于计数稀释的比比例根据据动物精精液的密密度范围围确定稀释方法法:用5-25ul移移液器和和100-1000移移液器,,在小试试管中进进行组合合不同的的稀释..如牛精精液稀释释100倍,为为5ul原精++500ul稀稀释液稀释液::3%氯氯化钠溶溶液,用用以杀死死精子,,便于计计数注入计数数室前各种家畜畜精液建建议稀释释比例返回精液注入入计数室室将洁净的的计数板板放在载载物台上上固定好好,盖上上干净的的盖玻片片取25ul稀释释后的精精液,将将吸咀放放于盖玻玻片与计计数板的的接缝处处缓慢注入入精液,,使精液液依靠毛毛细作用用吸入计计数室注意：让让稀释后后的精液液通过毛毛细作用用自行吸吸入！用吸管稀稀释后精精液注入入计数室室共有两个个对称的的计数室室用移液器器注入精精液精子计数数将计数板板固定在在显微镜镜的推进进器内，，用100倍放放大找到到计数室室，再用用400倍找到到计数室室的第一一个中方方格。计数左上上角至右右下角五五个中方方格的总总精子数数，以精精子的头头部为准准，依数数上不数数下，数数左不数数右的原原则进行行计数格格线上的的精子。。进行精子子计数的的中方格格数可以以是四角角一中心心共5个中方格格也可以是是从左角角到右下下角五个个中方格格以图示次次序计数数，精子子的头部部为准，，依数上上不数下下，数左左不数右右的原则则进行计计数格线线上的精精子。白白色精子子不计数数计算精子子密度精子密度度=5个中方方格总精精子数××5×10×1000×稀稀释倍倍数例：牛精精子密度度测定程程序放计数板板于载物台台上取样稀释精液精液注入入计数室镜检精子计数数密度计算算计数板和和盖玻片片一定要要清洁取500ul3%氯化钠于于小试管管中,加入5ul原精液,混合均匀匀取25ul小心地从从计数板板与盖玻玻片的接接缝中加加入,使其自行行吸入计计数室中中用100倍和400倍观察计数五个个中方格格的总精精子数,计数以头头部为准准,在格线上上的数上上不数下下,数左不数数右精子密度度=5个中方格格总精子子数5×10×1000××100结束精子畸形形率检查查精子畸形形率：是是指畸形形精子占占视野中中总精子子数的百百分率。。精子畸形形分为四四类：头部畸形形：头部部巨大、、瘦小、、细长、、缺损、、双头、、皱缩等等。颈部畸形形：颈部部膨胀大大、纤细细、曲折折、双颈颈等。中段畸形形：膨大大、纤细细、带有有原生质质滴等。。主段畸形形：弯曲曲、曲折折、回旋旋、双尾尾等。精子畸形形率猪不不超过18%，羊不超超过14%，马不超超过12%。如果畸畸形率超超过20%，则视为为精液品品质不良良，不能能用做输输精。双头双尾精子畸形形率检测测过程用细玻璃璃棒蘸