实验数据-p姓名

森病（Parkinson’s

disease,PD）病理特征：黑质致密部多巴胺能神经元缺失；小体的形成发病机制:氧化应激、线粒体功能、凋亡、炎症、蛋白质异常2白编码的一种含140个氨基酸的蛋白质由突触PD特征

理标志Lewy小体的主要成分可能是一种朊 样蛋白（Prion-likeproteins），通过胞吞和胞吐作用在细胞与细胞间传递α-突触

白3α-突触

白具有单体、寡聚体和多聚体三种形式，其中寡聚体毒性最大。α-突触

白的聚合4PD黑质区单个神经元内的铁含量增高黑质铁的水平与PD的进程相关α-突触

白的异常铁能够促进α-突触往往伴有铁的沉积白的Oakleyet

al.,

Neurology,

2007Orly

Weinreb,2013Golts

et

al.,2002++++++++

++++

+

+++++++

+++++

++++

++++铁与α-突触

白5中枢神经系统中数量最多的细胞；能够摄取胞外的α-突触 白；进入到星形胶质细胞的α-突触白的促进促炎和化学因子的

。Uptake

of

neuronal

cell-derived-synuclein

from

conditioned

medium

by

astrocytes.He-Jin

Lee

et

al.,

2010

6星形胶质细胞内质网是真核细胞中除核酸以外的重要生物大分子的α-突触；白异常

可引起内质网应激，在森病发病过程中起重要的作用；细胞间

的α-突触白对ER

stress的影响极少研究

。内质网应激（ER

stress）Miao

Wang

and

Randal

J.Kaufman,Nature,20167腹侧中脑神经元、星形胶质细胞α-syn铁ERstress阻断剂实验思路8白引起的星形胶质细胞和神经元的损1.铁对细胞外α-突触伤有什么影响？白引起的损伤变化，机制与ER

stress2.铁对细胞外α-突触是否相关？铁对细胞外α-突触 白引起的损伤变化中，星形胶质细胞和神经元的变化有什么区别？原代培养的腹侧中脑（VM）星形胶质细胞：取自新生24

h

Wistar乳鼠原代培养的腹侧中脑(Vm)神经元：取自孕14天Wistar大鼠C6

细胞系：大鼠胶质瘤细胞实验目的9α-syn铁注：用不同浓度（5μM,10μM)和摇过不同天数(0d,3d)的α-syn处理细胞，挑选合适浓度和药物形式。ERstress阻断剂α-syn的摄取（电镜、confocal）IL-1β、TNF-α

mRNA的变化(Real-time

PCR、ELISA)ER

Stress相关的蛋白水平(western

blot)实验技术路线线粒体膜电位、ROS(流式细胞仪)腹侧中脑神经元腹侧中脑星形胶质细胞10实验结果111.GFAP免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞纯度图1.GFAP免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞纯度HochestGFAPMerge12图2.α-突触α-突触 白浓度（μg/ml)白对星形胶质细胞IL-1β的mRNA水平的影响*P<0.05,

****P<0.0001,

compared

with

control;#P<0.05,

compared

with

5(0d)

group;^P<0.05,compared

with

10(0d)group。Ratio

of

IL-1β/GAPDH

mRNA

levels2.α-突触白增加细胞IL-1β的mRNA水平05

01

0

01

5

0*************#^133.α-突触白增加细胞TNF-α的mRNA水平Ratio

of

TNF-α/GAPDH

mRNA

levels02468**************#^图3.α-突触alpha-突触 白浓度（μg/ml)白对星形胶质细胞TNF-α的mRNA水平的影响**P<0.01,

****P<0.0001,

compared

with

control;#P<0.05,

compared

with

5(0d)

group;^P<0.05,compared

with

10(0d)group。1402

04

06

0*****#4.FAC可增加α-突触白诱导的细胞IL-1β的mRNA水平图4.

FAC对α-突触 白诱导的细胞IL-1β的

mRNA水平的影响**P<0.01,

***P<0.001,

compared

with

control;#P<0.05,compared

with

α-syn。Ratio

of

TNF-α/GAPDH

mRNA

levels150246****#5.FAC可增加α-突触白诱导的细胞TNF-α的mRNA水平Ratio

of

TNF-α/GAPDH

mRNA

levels图5.

FAC对α-突触 白诱导的细胞TNF-α

mRNA水平的影响*P<0.05,

***P<0.001,

compared

with

control;#P<0.05,compared

with

α-syn。16Ratio

of

CHOP/β-actin

protein

levels

Control

5μg/ml(0d)

10μg/ml(0d)CHOPβ-actin*P<pared

with

control

.图6.α-突触白对细胞CHOP蛋白水平的影响0

.06.α-突触 白上调CHOP的蛋白表达17ATF-4β-actinRatio

of

ATF-4/β-actin

proteinlevels

Control

5μg/ml(0d)

10μg/ml(0d)图7.α-突触白对细胞ATF-4蛋白水平的影响**P<pared

with

control

.0

.00

.57.α-突触 白上调ATF-4的蛋白表达18XBP-1sβ-actinRatio

of

XBP-1s/β-actin

proteinlevels

Control

5μg/ml(0d)

10μg/ml(0d)图8.α-突触 白对细胞XBP-1s蛋白水平的影响*P<0.05;

**P<0.01,

compared

with

control

.0

.00

.51

.01

.5