DB15T 2725-2022规模化牛场细菌性腹泻防控技术规范

ICS65.020.30CCSICS65.020.30CCSB41内蒙古自治区地方标准DB15/T2725—2022规模化牛场细菌性腹泻防控技术规范Technicalspecificationforbacterialdiarrheapreventionandcontrolinlarge-scalecattlefarms2022-07-292022-07-292022-08-29内蒙古自治区市场监督管理局发布前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC19）归口。规模化牛场细菌性腹泻防控技术规程范围本文件规定了规模化牛场细菌性腹泻的诊断和防治。本文件适用于奶牛饲养场（户）、肉牛饲养场（户）和动物诊疗机构对致病性大肠杆菌、沙门菌、副结核分枝杆菌引起牛腹泻疾病的防控。（GB4789.4食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验GB4789.6食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验GB/T16568奶牛场卫生规范GB/T27401实验室质量控制规范动物检疫GB/T27637副结核分枝杆菌实时荧光PCR检测方法NY5047无公害食品奶牛饲养兽医防疫准则NY/T5049无公害食品奶牛饲养管理准则3术语和定义GB/T27401实验室质量控制规范动物检疫GB/T27637副结核分枝杆菌实时荧光PCR检测方法NY5047无公害食品奶牛饲养兽医防疫准则NY/T5049无公害食品奶牛饲养管理准则3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。细菌性腹泻（bacterialdiarrhea）4生物安全措施样品处理的生物安全措施符合GB19489的规定。样品采集的生物安全措施符合GB/T27401的规定。5病原致病性大肠杆菌革兰染色阴性杆菌，大小为0.4µm～0.7µm×2µm～3µm，两端钝圆。沙门菌革兰染色阴性杆菌，大小为0.7µm～1.5µm×2µm～5µm。革兰染色阳性短杆菌，大小为0.2µm～0.5µm×0.5µm～1.5µm，抗酸染色红色。6诊断1～5月犊白痢41℃～42主要由鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌引起。40℃～41℃，h5d～7d12h～24h2～5犊白痢2～30符合6.1.1、6.1.2、6.1.3，可判定为牛细菌性腹泻疑似病例。37℃恒温细菌培养箱、倒置显微镜、PCR仪、PCR管、电泳仪、凝胶成像仪。生理盐水、细菌微量生化反应管及指示剂、Taq酶、TAE电泳缓冲液、DNAMarker。生理盐水、细菌微量生化反应管及指示剂、Taq酶、TAE电泳缓冲液、DNAMarker。3mL取病死牛肠道、肝、脾、淋巴结、胃、脐带等，置于无菌密封袋或采样杯内。大肠杆菌在伊红美蓝琼脂上形成黑色带金属光泽的菌落；麦康凯琼脂培养基上形成红色菌落。SS4H2SO4或2%NaOH处理，挑取SS培养基、HE琼脂培养基和去氧胆盐钠-枸橼酸盐培养基上的沙门菌特征性菌落涂片，进行革兰染色，镜下可观察到粉红色的杆菌。挑取Dubods培养基和HEYM培养基上的副结核分枝杆菌特征性菌落涂片，进行抗酸染色，镜下可观察到红色成丛、两端钝圆的杆菌。根据伯杰细菌手册对细菌性病原进行生化特性鉴定。V-PV-P沙门菌V-P（）V-P按照GB4789.6对致病性大肠杆菌进行血清学鉴定及结果判定。按照GB4789.4对沙门菌进行血清学鉴定及结果判定。PCRDNA将采集的样品进行处理，按DNA提取试剂盒方法提取核酸。在-20℃条件下可短时间保存，若需长期保存，应置于-70℃以下条件，避免反复冻融。PCR按照GB4789.6对致病性大肠杆菌进行PCR检测及结果判定。PCRinv。25µL反应体系配制：模板2µL，上下游引物各1µL，Taq酶12.5µL，RNase-FreeH2O8.5µL。反应参数：95℃15min；94℃1min，54℃30s，72℃1min，35个循环；72℃10min。电泳检测样品PCR产物片段长度为464bp，即判定为沙门菌。PCR按照GB/T27637对副结核分枝杆菌进行PCR检测及结果判定。疑似疑似符合6.1.1、6.1.2、6.1.3，可判定为牛细菌性腹泻疑似病例。确诊符合6.1.16.1.2（PCR7预防GB/T16568NY/T5049避免应激，消除可能降低机体抵抗力的各种应激因素。分娩时，落地犊牛口鼻切勿接触脏污。1h4L36℃～38℃，12h2。哺乳犊牛给予开食料，补充微量元素，饲料配比适当。牛群防疫按照NY5047的规定。病死或死因不明牛按照《病死及病害动物无害化处理技术规范》及《病死畜禽和病害畜禽产品无害化处理管理办法》的规定处理。8治疗抗菌药物治疗根据细菌学诊断及药敏试验结果选择敏感抗生素进行治疗。微生态制剂治疗改善机体消化道内环境，调节微生态平衡。对症治疗用收敛止泻剂止泻，内服保护剂和吸附剂，保护肠黏膜.根据临床症状进行静脉补液或口服补液，根据脱水状况，调节补液速度，纠正休克和机体