《细胞工程》（理论）考核方式

PAGEPAGE14山东师范大学生命科学学院细胞工程课程考试大纲考试基本要求1．理论知识方面重点掌握本学科的基本原理和基本技术。即细胞全能性学说在细胞工程中的指导作用；细胞工程的基本技术；动物细胞工程和植物细胞工程的主要技术、原理及应用。了解细胞工程的各类技术在现代生物学与生物技术领域的应用途径与发展潜力。实践技能重点掌握细胞工程的基本操作技术——无菌操作；掌握细胞融合与单克隆抗体技术、愈伤组织和胚状体诱导、器官发生调控等基本技术及植物的快速繁殖技术；了解细胞大批量培养方法、转基因动物技术、胚胎工程技术、干细胞与组织工程技术、核移植与动物克隆反术、转基因动物与动物生物反应器技术、动物染色体工程技术、原生质体分离与体细胞杂交技术、体外单倍体诱导与单倍体育种技术、体细胞胚胎发生和人工种子、植物染色体工程和植物转基因技术等。考试形式。细胞工程考试采用闭卷笔试形式，试卷满分为100分，考试时间为120分钟。三、适用专业。生物技术本科专业。四、考试内容和考试要求（一）第1章绪论考试内容1细胞工程简介2细胞工程的发展史考试要求了解细胞工程的主要研究内容和技术方法。了解细胞工程的发展历史和应用前景。（二）第2章细胞工程的技术基础考试内容1.1细胞工程实验室的设置1.1.1动物细胞工程实验室的设置1.1.2植物细胞工程实验室的设置1.2常用仪器与设备1.2.1动物与植物细胞工程实验室通用的仪器设备1.2.2动物细胞工程实验室常用仪器与设备1.2.3植物细胞工程实验室常用仪器与设备1.3实验室的生物安全2.1清洗2.1.1玻璃器皿的清洗2.1.2胶塞的清洗2.1.3塑料制品的清洗2.1.4G2.1.5不锈钢除菌滤器的清洗2.1.6包装2.2消毒2.2.1物理消毒法2.2.2化学消毒法2.2.3抗生素消毒法考试要求1.了解细胞工程实验室的主要设施的设置以及细胞工程实验室所需的基本条件。2.掌握细胞工程实验室常用设备的使用方法及注意事项。3．了解并掌握细胞工程实验室内各种常用器皿的清洗方法。4．掌握三种消毒方法的特点和适用对象。（三）第3章细胞工程的理论基础考试内容：1培养细胞的生物学特征1.1体外培养细胞的分型1.2培养细胞的生长特点1.3培养细胞的生长与增值过程1.4培养细胞的遗传学特征1.5体内外细胞的差异及培养细胞的分化2细胞系和细胞株的建立2.1细胞系和细胞株的种类2.2建立细胞系（或株）的要求2.3细胞系和细胞株的鉴定考试要求：了解并掌握培养细胞的生物学特征，包括培养细胞的贴壁型和悬浮型及其各自特点；培养细胞的生长、增殖以及遗传学特性；接触抑制的概念；了解体内外细胞的差异及培养细胞的分化。掌握原代和传代的概念。了解细胞株与细胞系的建立与鉴定常识。（四）第4章细胞培养的基本技术考试内容1无菌操作技术1.1实验器具和材料的准备1.2培养室和超净台的消毒1.3洗手和着装1.4无菌培养操作2培养细胞的观察2.1相差显微镜观察2.2培养细胞的观察3细胞培养常用技术3.1原代细胞培养3.2传代细胞培养3.3细胞计数3.4细胞的冷冻和复苏4细胞培养中常用的染色方法4.1活体染色4.2染料排除检测法5细胞培养的污染和镜检5.1污染途径5.2污染对培养细胞的影响及检测5.3污染的预防5.4污染的排除考试要求：掌握无菌操作技术的方法。掌握利用倒置显微镜对培养的细胞进行直接观察的方法。掌握细胞培养的常用技术。掌握细胞的活体染色技术。了解常见微生物污染的排除和预防方法。（五）第5章细胞融合与单克隆抗体考试内容1细胞融合1.1细胞融合的原理1.2细胞融合的方法1.3细胞融合的应用2单克隆抗体技术2.1单克隆抗体技术的原理2.2杂交瘤制备2.3单克隆抗体的大量制备2.4人源性单克隆抗体制备2.5EB病毒转化技术2.6细胞工程单克隆抗体技术2.7人单抗制备技术的发展2.8单克隆抗体在医学上的应用2.9单克隆抗体靶向制剂2.10单克隆抗体在肿瘤诊断与治疗中的应用考试要求：掌握细胞融合的概念和细胞融合的意义及其应用――单克隆抗体技术。了解细胞融合的研究历程。了解细胞融合的机制。掌握单克隆抗体技术的原理和制备方法。掌握杂交瘤的制备方法和筛选原理。了解人源单克隆抗体的制备和应用前景。了解单克隆抗体在生命科学的基础研究和临床医学中的应用，如肿瘤诊断与治疗中的应用等。（六）第6章转基因动物与动物生物反应器考试内容：1转基因动物的培育技术1.1基因显微注射法1.2逆转录病毒感染法1.3胚胎干细胞介导法1.4精子载体导入法1.5YAC介导的基因转移1.6细胞核移植技术培育转基因动物2转基因动物的应用2.1改良动物品种，提高动物产品的产量和质量及抗病性2.2生物制药2.3建立诊断和治疗人类疾病的动物模型2.4生产可用于人体器官移植的动物器官2.5基因治疗2.6基因打靶3动物生物反应器3.1动物血液生物反应器3.2动物膀胱生物反应器3.3动物乳腺生物反应器3.4动物生物反应器存在的问题考试要求：掌握转基因动物的概念和原理。了解转基因动物的研究历程和应用前景。掌握转基因动物的方法和各自的优缺点。掌握用核移植技术生产转基因动物的原理。掌握动物生物反应器的概念和原理。了解目前常见的三种动物生物反应器：动物血液生物反应器、动物膀胱生物反应器和动物乳腺生物反应器及其各自存在的问题。（七）第7章核移植技术与动物克隆考试内容：1核移植技术的发展简史2核移植技术2.1核移植技术的类型2.2核移植技术的一般操作程序3核移植技术的应用3.1核移植技术的应用3.2核移植技术存在的问题考试要求：了解核移植技术的研究历史掌握核移植技术的方法步骤和基本原理。了解核移植技术的应用了解并掌握多莉羊的产生步骤、技术创新及其意义所在。通过多莉羊的产生以及多莉羊存在的问题，了解核移植技术存在的问题，以及解决这些问题的方法和措施。（八）第8章干细胞与组织工程考试内容：1胚胎干细胞1.1胚胎干细胞的研究概况1.2胚胎干细胞的生物学特性1.3胚胎干细胞的建系1.4ES细胞的鉴定1.5ES细胞的应用前景及面临的难题2成体干细胞2.1造血干细胞2.2神经干细胞2.3胰岛干细胞2.4皮肤干细胞3组织工程.3.1组织工程化皮肤3.2组织工程化骨骼3.3组织工程化血管3.4其他管状器官的组织工程3.5组织工程化器官考试要求：了解干细胞研究的研究历史、前沿进展和应用前景。掌握干细胞、胚胎干细胞的概念、生物学特征、鉴定方法等。了解胚胎干细胞的应用过程面临的难题，包括技术方面的和社会伦理方面的。了解常见的几种成体干细胞的特点和各自的研究与应用。（九）第9章动物染色体工程考试内容：1动物染色体倍性改造1.1动物的多倍体育种1.2动物的单倍体育种2动物染色体结构的改造2.1染色体片段的删除和重排2.2染色体的易位工程3人工染色体3.1酵母人工染色体3.2细菌人工染色体3.3哺乳类人工染色体3.4人工染色体的应用考试要求：了解动物染色体倍性改造的概念以及多倍体和单倍体育种的知识。了解动物染色体结构的改造。了解酵母人工染色体（YAC）的基本结构及其在人类基因组中的应用。了解细菌人工染色体（BAC）的基本结构及其应用。（十）第10章胚胎工程考试内容：1胚胎发育的基本过程和机制1.1胚胎发育的基本过程1.2胚胎发育的基本机制2体外受精2.1体外受精的研究历史2.2体外受精技术3胚胎移植技术3.1胚胎移植的研究历史3.2胚胎移植技术4胚胎分割技术4.1胚胎分割的方法4.2分割胚的培养4.3胚胎分割目前存在的问题和发展前景5早期胚胎的体外培养5.1胚胎的发育阻滞5.2克服胚胎发育阻滞的方法6胚胎冷冻保存技术6.1抗冻保护剂和冷冻溶液6.2胚胎的冷冻方法7动物的性别控制7.1动物的性别决定7.2性别控制的方法与技术7.3性别控制的意义考试要求：1.了解胚胎发育的基本过程和细胞分化的基本机制。2.在了解受精过程的机制的基础上，掌握体外受精技术的原理与技术关键。3.掌握胚胎移植技术的主要步骤和一般原理。4.了解胚胎分割技术的一般原理与应用前景。5.了解胚胎冷冻保存技术的方法。6.了解动物性别分化的原理，掌握动物性别控制的技术原理。（十一）第11章植物细胞工程的理论基础考试内容：1外植体脱分化1.1外植体脱分化的原理1.2外植体脱分化的条件2愈伤组织2.1愈伤组织的定义及特点2.2愈伤组织的形成过程2.3愈伤组织的诱导与繁殖3细胞分化和组织分化3.1导管分子的分化及其影响因素3.2细胞分化的过程及其机理3.3拟分生组织和维管组织考试要求：掌握外植体脱分化的原理及条件及外植体的选择。掌握愈伤组织的形成过程。掌握细胞分化中导管分化的影响因素；了解拟分生组织和维管组织在器官形成中的作用（十二）第12章植物组织培养考试内容：1实验材料的清洗和消毒2培养基3接种4种质保存5植物细胞的大规模培养技术考试要求：了解植物组织培养的实验程序和技术要点，外植体的选择及相应灭菌剂的选择。了解植物细胞大规模培养的支术。（十三）第13章植物的快速繁殖考试内容：1植物快速无性繁殖2植物脱毒3植物快速繁殖和试管苗工厂化生产中的注意事项考试要求：1掌握植物快速繁殖技术的主要步骤。2了解如何调整培养基配方惟促进根和芽的分化。3了解影响茎尖培养的脱毒效果的因素。（十四）第14章体外单倍体诱导与单倍体育种考试内容：1植物小孢子发育过程2花药和花粉培养2.1花药培养2.2花粉培养2.3小孢子母细胞培养3花药与花粉培养方法3.1材料的选择3.2材料的预处理3.3培养基3.4接种与再生植株的培育4单倍体育种在生产实践中的应用考试要求：1掌握花药与花粉培养的方法及培养过程。2了解单倍体育种在生产实践中的应用。（十五）第15章植物胚胎培养考试内容：1胚培养1.1成熟胚培养1.2幼胚培养1.3胚培养的意义2子房培养3被子植物的胚乳培养3.1植物胚乳的发育特性3.2影响胚乳培养的因素3.3胚乳培养的意义考试要求：1掌握幼胚培养方法，了解幼胚培养时胚的不同发育时期对培养基和培养条件的要求。2了解成熟胚和胚乳的培养的方法及应用。（十六）第16章体细胞胚胎发生和人工种子考试内容：1愈伤组织与体细胞胚胎发生1.1愈伤组织的诱导1.2愈伤组织器官的发生2人工种子2.1人工种子的制备2.2人工种子的研究现状考试要求：掌握愈伤组织的诱导方法。掌握人工种子的构建方法，了解人工种子的应用。（十七）第17章植物原生质体融合技术考试内容：1植物原生质体的制备1.1植物原生质体的分离1.2影响植物原生质体数量和活力的因素1.3植物原生质体的纯化1.4植物原生质体的培养方法2植物原生质体的融合2.1植物原生质体的融合技术2.2融合体3杂种细胞的筛选3.1遗传互补选择法3.2可见标记法4体细胞杂种的鉴定5体细胞融合的意义考试要求：掌握植物原生质体的制备方法。掌握植物原生质体融合的技术。了解植物原生质体融合的意义（十八）第18章植物转基因技术考试内容：1直接转化2介导转化2.1重组DNA2.2质粒载体2.3转化及重组子筛选鉴定2.4土壤农杆菌的转化机理考试要求：1了解直接转化方法及其特点。2掌握介导转化法的原理，掌握介导转化法的过程。五、主要参考书目殷红.细胞工程.北京：化学工业出版社，2013。安利国.细胞工程.北京：科学出版社，2009。LiZhiyong.CellEngin