植物检疫技术-昆虫课件

第二章植物检疫性害虫的

检疫检验原理和常规技术检疫检验的目的：发现、检出和鉴定植物病原物、害虫、杂草和其他有害生物，为出证或检疫处理提供依据。检疫处理：通过中断或避免有害生物人为传播而达到保证贸易和引种正常进行的目的。第一节昆虫与螨类的检疫检验检疫检验包括现场检验与实验室检验。有害生物种类不同，适用的检验方法也不同，适用的检验技术应当符合下列基本要求：1.准确可靠，灵敏度高；2.快速、简单、方便易行；3.有标准化的操作规程，检验结果重复性好；4.安全，不扩散有害生物。一、害虫与螨类的检验方法（一）直接观察（二）过筛检验（三）解剖检验（四）加热分离检验（五）比重检验（六）染色检验（七）软X光透视检验（八）诱捕检验（九）检疫犬检查（十）其它方法（一）直接观察通过肉眼或手持扩大镜，对植物及其产品、包装材料、运载工具进行检查。适用范围：适于检验个体较大，特征较明显的害虫，或危害状明显的植物及其产品。

欧洲榆小蠹危害状瘿蚊－虫瘿（三）解剖检验

借助刀具剖开待检物品，检查是否有害虫存在。适用范围：有明显被害状、食痕或有可疑症状的种子、果实及其它植物产品，如食心虫、实蝇类危害的果实；天牛、吉丁虫为害的枝干等。用具与步骤

采用解剖刀、水果刀或剪刀。在检验中若发现有害虫的产卵孔、蛀孔、虫粪、分泌物等危害迹象时，需利用本方法进一步找到虫体。（四）加热分离检验

原理：利用害虫在受热时苏醒或变得活泼的特点。螨类检验中，利用活螨避光，怕热的习性，加热分离之。适用范围：多在冷凉季节或气温较低时用具与步骤：将样品（粮谷、豆粒等）放入磁盘或培养皿中，放在灯光或其它热源上加热，一些蛾类、小型昆虫或迟钝不动的昆虫受热后即爬动而被分离出来。3.应用举例螨类的分离1.烤螨法

将供试品放在特制的分离器或附有孔径大小适宜的筛网的普通玻璃漏斗里，在漏斗的广口上约6cm处用一个60～100W的灯泡照射1～2h。活螨可沿漏斗的底部细颈内壁下爬，漏斗下口处用小烧杯装半杯甘油水收集。2.热水漂浮法

将原糖样品置于锥形瓶中，温水（30～35℃）溶解，溶液量以刚好不溢出为宜，15～30min后，用载玻片沾取水面漂浮物，镜检观察是否有螨类爬出。（五）比重检验

根据有害籽粒和正常籽粒比重不同，用盐溶液漂检分离的方法。

适用范围通常用于检查粮谷、谷类中的害虫。2.试剂与操作步骤①将试剂（如氯化钠、硝酸铁、硝酸铵等）根据需要配成不同浓度的溶液；②将过筛后的样品倒入溶液并充分搅拌1min后静止1min，则健粒下沉、被害粒上浮；③捞出上浮样品，进一步检验。试剂和溶液浓度的选择主要考虑样品的比重。如检查谷象、米象为害的粮谷籽粒时，选用2％的硝酸铁溶液；检查豆粒等的种子，可用饱和食盐水；检查松籽中是否携带落叶松种子小蜂，用清水即可。（六）染色检验利用某些植物或器官被害虫为害后，经特殊的化学品处理后，可染上特有的颜色，以帮助检验害虫或判断害虫成活与否的方法。根据染色剂的不同，可分为高锰酸钾染色法、品红染色法、碘或碘化钾染色法和油脂浸润法。各种方法各有其一定的应用范围。1.高锰酸钾染色法（1）试剂1%高锰酸钾溶液、硫酸和过氧化氢混合液（1%硫酸100ml加3%过氧化氢液1ml）与清水。（2）步骤将15g粮粒样品放入30℃温水中浸１min；然后转移到1%高锰酸钾液内染色１min；清水漂洗；滤纸吸干多余液体并镜检，将出现直径0.5mm黑斑点的籽粒挑出剖检。染色后转入硫酸和过氧化氢混合液内处理30s，则米象的产卵处染成褐色斑点。（3）适用范围检验粮粒中的谷象、米象等。2.品红染色法主要试剂：酸性品红溶液（蒸馏水95ml，冰醋酸5ml，酸性品红0.05g）

步骤：取样品15g，30℃温水预浸1min后移入品红液中染色25min，之后取出并用清水洗净，倒在白色吸水纸上，镜检，凡有0.5mm左右樱桃红小点，即为被害粒。

适用范围：同高锰酸钾法，但也适用于植物叶片中斑潜蝇卵的检验。3.碘染色法（1）试剂1％碘化钾或2％碘酒溶液、0.5％氢氧化钾(钠)溶液。（2）步骤取代表样品50g，放入纱网或包于纱布袋中，浸入配好的碘液中染色l～1.5min；氢氧化钾溶液固定30s；清水漂洗15～20s，之后镜检。凡豆粒表面有l～2mm直径的黑色圆斑者，即为虫蛀粒，再进行剖检。（3）适用范围适于被豆象类蛀害的豆粒检验。

（七）软X光透视检验

软X光透视和摄影检验种子，首先由瑞典皇家林学院Simak、Kamra等人创造并提出。原理：利用软X光波长较长（大于0.01nm），能级较低，穿透力较弱，被检验的物体吸收率高，成像对比度强、层次清晰的特点，对种子进行透视、摄影，以判断种子、苗木及其他植物组织内钻蛀性害虫的发生情况。1.仪器与操作方法一般用Hy-35型农用软Ｘ光机。操作方法：取样品100粒，单层平铺在仪器内样品台上，开通电源，调节光强度和清晰度，通过观察窗，即可在荧屏上观察。凡健康种子，全粒均匀透明；凡有阴影斑点（块），即为虫蛀粒、空壳或内部有虫体。荧光屏直接观察对桧、杉、粟等小粒种子不适用，必须通过摄影、冲洗出底片才能正确检测。2.应用举例松籽中落叶松种子小蜂的检验软Ｘ光摄影检验事先把２号或３号放大纸在暗室用黑纸包好，把种子检验样品放在放大纸具有药膜的那一面，置于Ｘ光机载物台上拍摄。软Ｘ光照片判别种皮内颜色均为暗色者为空粒种子，种皮、种仁连为一体均为白色者是健康饱满的种子。种皮内有一个呈“Ｃ”型弯曲的幼虫影像，其余部分为暗色者为落叶松种子小蜂寄生的种子。种皮内有多个白色的影像重叠在一起，其余部分暗色者为小蜂的寄生昆虫。（八）诱器检验利用特异性诱剂，置于特制的诱捕器中诱测害虫（主要是成虫）的方法。主要用于产地、港口、车站、机场、货栈、仓库等处的现场检验与疫情监测。诱器由诱剂、诱芯和诱捕器三部分组成。苹果实蝇红色诱捕器（九）检疫犬检查检疫犬主要用于旅客携带物的现场检查。在检疫人员的带领下，检疫犬对旅客包裹进行检查，若发现可疑物品（如水果、食品或毒品等），检疫犬会立即以训练出的固定姿态告知检疫人员，检疫人员可据此要求旅客开包检查。美国、加拿大、澳大利亚、新西兰、日本等发达国家，自20世纪80年代以来，均已组建了检疫犬队，配合X光机及检疫人员，对出入境行李进行检疫，使行李检疫更快速，并使其检出率及准确率达到90%以上。我国自2002年开始在北京、上海、广州等地陆续投入使用。应用检疫犬，不仅可以作为旅客申报单、X光机等检疫措施的补充，提高检出率，还可以扩大检疫的影响力和威慑力，有效防止逃漏检。2002年9～11月投入使用以后，白云机场和天河火车站旅检现场的违禁物查获批次较往年同期增长22.8%和26.7%。

（十）其他检验方法1.饲养检验将样品定量后置温箱内，定温在25～26℃下饲养3～5d或更长时间，测定害虫含量并鉴定种类。2.塑料袋密封检验将具有一定成熟度或有产卵痕迹的果实用塑料袋密封数小时后，其中的实蝇幼虫因缺氧破果而出，可作形态鉴定或进一步饲养。3.水盆观察法将水果或蔬菜放入一个瓷盘内，支放在盛有清水的大瓷盆上，再用40目尼龙纱罩上。室温下观察7-10d，实蝇幼虫会从果中弹进大盆内。本方法主要用于新鲜成熟度不高的水果。茚三酮法原理：茚三酮对游离氨基酸反应灵敏。昆虫的幼虫和蛹有丰富的蛋白质（游离氨基酸）。当茚三酮与具有高浓度氨基酸的昆虫体液接触时就产生明显的紫红色。方法：滤纸带用茚三酮浸泡，待干后装在小型碾压器的一个钢辊上，当粮粒被二个钢辊碟压成片状时（如小型压面机），隐蔽性储粮害虫的卵、幼虫和蛹也同时被压破，害虫的体液与滤纸带接触，就和滤纸带上的茚三酮发生化学反应，滤纸上呈现明显的紫红色斑点。可根据斑点数目，计算危害程度。液相色谱尿酸测定法适用范围：适用于检查隐蔽性储粮害虫对粮食的危害程度。原理：用液相色谱测定被谷象、米象和谷蠹各发育阶段危害的小麦中尿酸的含量。若受害谷物中尿酸含量增加，说明昆虫在发育。谷象幼虫所产生的尿酸最多，其次是米象和谷蠹幼虫。这种用液相色谱测定尿酸含量的极限可少于1.0ppm。对于谷象老熟幼虫而言，可以检测到100克粮食样品中有1粒粮粒被害的水平。酶联免疫吸着测定法（ELISA）适用范围：蛀空式隐蔽害虫原理：应用抗体与昆虫所具有的肌球蛋白互相结合而产生颜色，其颜色深浅与肌球蛋白的含量成比例而设计的。其检测结果在ELISA显示器上读出。能检测隐蔽性储粮害虫对整粒谷物的危害程度，也能检测感染程度。目前，已用这种技术测定了玉米象、谷蠹等17种检疫性害虫，及其对大麦、大豆等的感染程度。该方法灵敏度高，数据可靠，检测快捷，费用很省。美国农业部，美国公职分析化学家协会和联邦谷物检验局联合举办国际性培训班，来推广这项技术。定量音响法适用范围：隐蔽性储粮害虫的检疫。原理：通过音响传感器，根据隐蔽性储粮害虫幼虫在取食时所产生声音的到达时间，来确定储粮害虫危害的位置。把1公斤谷物样品，放在一个单壁的、长方形的容器中，通过音响传感器把声音输出、检测和放大，并与微机相联。这个检测系统称之为音响定位昆虫检测器（ALFID）。二、检疫检验技术的发展趋势随着国际贸易的迅猛发展，对检疫检验速度的要求越来越高，努力提高检验效率成为目前各国检疫工作者亟待解决的问题。检验技术的发展表现出两大明显特色：（一）对策上，加强产地检疫与预检，以提高检验结果的准确性、可靠性，简化现场检验手续，提高验放速度。（二）技术层面，手段多样化、技术现代化。引进检疫犬，提高了旅检效率；针对斑潜蝇的传带特点，发展出叶片染色法等。在种类鉴定方面，生化技术、分子生物学技术的引入大大加快了鉴定速度。如，采用凝胶电泳法可快速、准确地鉴别4种多食性斑潜蝇；广州检疫局在国际上首次将SYBRGreen实时荧光PCR方法用于实蝇种类鉴定和近似种区分，使得鉴定周期从20d以上缩短到2d以内。小结害虫的检疫检验包括室内检验与现场检验。无论是直接检验、过筛检验、染色检验，还是解剖检验、X光检验、诱器检验，都是发现和检出的手段。各种方法在适用范围、精确度等方面均有不同。实践中，往往需要从实际出发，选用一种或几种方法相结合，达到检验目的。检出害虫后，还需要进一步鉴定，才能得出最终结论。第二节检疫处理检疫处理一般由检疫机关通知货主或其代理人实施，检疫机关对处理过程实施监督，以确保处理的有效性。检疫处理往往作为进境的限制条件，有时成为进出境贸易的一种技术壁垒。一、化学处理法化学处理法指利用化学药剂对有害生物进行除害处理的方法。化学处理的方法有熏蒸、喷雾、涂抹、浸泡等等。植物检疫中，最常用的是熏蒸处理，其次是喷雾法与浸泡法。（一）熏蒸处理

指利用熏蒸剂产生的有毒气体在密闭设施或容器中杀死有害生物。1.适用范围适于运输工具、贮藏所、加工厂等的消毒。适于处理粮食种子、植物无性繁殖材料、水果、蔬菜、其它动植物产品、生长期植株、工业品、土壤等。2.熏蒸方式

常压熏蒸真空熏蒸3.熏蒸剂常用熏蒸剂有溴甲烷、磷化铝、硫酰氟等。4.优点与局限性优点：快速、高效，费用低，残毒问题相对较轻。局限性：须在可密闭场所或容器内进行。参观真空熏蒸循环设备（二）喷雾主要用于运输工具、贮运场所的消毒。（三）浸泡主要用于种子、苗木或其它繁殖材料（接穗、球根、块茎等）。依法对国际航班消毒化学熏蒸技术原理在植物检疫中，货物相对集中，利用化学熏蒸处理最为理想，达到快速、高效、低成本、低残留和减少环境污染等目的。但必须注意密闭性和施药的浓度，以及工作人员和周围人畜的安全。可用药剂：氯化苦、溴甲烷、磷化氢、敌敌畏等。应注意事项：气温、密闭条件、药剂的挥发性。熏蒸剂是易于气化的液体或固体，毒气可直接通过昆虫表皮或气门进入气管，由于昆虫气管的组织结构及理化性质与表皮基本相同，因此，凡可以通过表皮的药剂，同样可以通过气管而渗透到血液，使昆虫中毒死亡。影响熏蒸效果的因素：药剂的挥发性，以药剂的蒸汽压表示：蒸汽压越高，挥发性越强，渗透力也越强。熏蒸剂本身分子量的大小，与气体的扩散及渗透到熏蒸物内部有密切的关系：分子量小的，扩散速度快，渗透能力强；分子量大的，扩散速度慢，易于聚集在地表面，难以弥散，渗透速度也慢，必须在高处使用。理想的熏蒸剂沸点低，相对密度小，蒸汽压高。但实际应用中，这些物理性质并不一定能达到理想熏蒸效果：熏蒸剂的作用，还受到被熏蒸物体表面的特殊吸附力、不同昆虫虫态及环境条件的影响。熏蒸物体的性质吸附性能强，阻碍毒气的渗入，需要时间长，药剂浓度大。沸点：沸点高，吸附力强，可考虑减压熏蒸，但减压使物体表面吸附力增强，需消耗较多的药剂。温度和湿度：温度高，药剂挥发性强，气压增大，被熏蒸物的吸附力减弱，空气中药剂浓度增大，昆虫趋于活跃，呼吸率增加，加速害虫的中毒。一般情况下，温度高于10℃时，温度升高，可提高熏蒸效果；10℃时，昆虫不活跃，呼吸率降低，熏蒸效果差；低于10℃时，熏蒸效果反而略增强，因为低温对昆虫的生理活动不利，但降低了气体的蒸发率，使昆虫表皮对气体的吸附力增加，易于中毒。湿度影响不大，为避免粮食发霉，最好在低湿度下进行熏蒸。昆虫不同种类及不同发育阶段不同种类的昆虫，因其生理和昆虫本身的结构不同，对熏蒸剂的敏感性程度差异很大。同一种昆虫的不同发育阶段，因呼吸率不同，差异更明显，对药的抵抗力：幼虫>卵>蛹>成虫。常用的熏蒸剂1、磷化氢：杀虫毒性高透力强，使用剂量低（仓库中一般3－4g/m3）无药害，在仓库中残留毒性低注意事项：熏蒸种用油、粮种子时，要注意气温的影响，高于28度时，熏蒸时间不能过长，否则影响发芽率。熏蒸时不能把药物堆放在一起，以免自燃。对人畜剧毒，放药后应立即离开。2、氯化苦（俗称三氯硝基甲烷）无色油状液体，日光下变为淡黄色，空气中可挥发成气体，但挥发速度较慢，没有燃烧和爆炸的危险。有刺激性臭味，难溶于水，易溶于酒精和煤油中，吸附力很强，在潮湿物体上可以保存较长时间。氯化苦具有杀虫、杀菌、杀线虫、杀鼠等作用，但毒杀作用比较缓慢，一般在20度以上，效果比较好。氯化苦气体进入虫体后，能生成强酸性物质，使细胞肿胀和腐烂，还可使细胞脱水和蛋白质沉淀，破坏昆虫体组织技能而死亡。对人畜剧毒，流泪、咳嗽、呕吐等，每升空气中0.2mg，10min可致死。注意事项：不能用于熏蒸成品粮，如面粉等，否则影响发酵；影响种子发芽率，应在种子含水量低于12％进行熏蒸；熏蒸温度起点为12度，最好在20度以上。散气后15天才能搬运出仓，也可用硫化物消除残余毒气；氯化苦气体比空气重，扩散、渗透也不如磷化氢，因此粮堆不能过高，要在高处均匀施药，仓库四角适当增加药量；3、溴甲烷高效中等毒性熏蒸剂，常温下无色略带甜味的气体，一般都压缩成液体，装在钢筒内。使用时打开钢筒阀门，就能自动喷出，化成气体，扩散后杀虫。渗透力强，吸附性小，容易散气，不易燃烧，不被酸碱物质所分解，在酒精碱性溶液中能起部分分解作用。液体状态时，易将脂肪、橡胶等物质溶解，熏蒸时注意防止把药液直接喷在橡胶帐幕上，对金属、棉布、丝、毛织品等无不良影响。对害虫各个不同虫期都有强的毒杀作用，并能杀死螨类。药剂进入虫体后，水解成溴化氢、甲醛等，产生积累性中毒，也可刺激昆虫神经，使之兴奋致死，也能影响呼吸酶，干扰昆虫呼吸代谢而致死。对人畜毒性较强，具麻醉作用，无警戒性，发生中毒后有潜伏期。20000/m3，可使人立即死亡，工业产品中常加入2％氯化苦。夏天熏蒸，20-30g/m3，熏蒸16h；冬天用药30-40g，熏蒸24-48h，可防治米象、谷盗、红铃虫、各种豆象等。目前主要用于植物进口果品中的检疫性害虫。注意事项：熏蒸水果时，不加氯化苦作警戒剂，必须小心，戴防毒面具；熏蒸室必须全部密闭，以免漏气；熏蒸时可在仓库四周用测溴等检查有无漏气现象。二、物理处理法（一）高温处理高温处理即热处理，包括干热处理、热水处理、蒸汽热处理、微波加热处理与高频加热处理。其原理为：利用植物材料与有害生物耐热性的差异，选择适宜的高温和处理时间以杀死有害生物而不损害植物材料。1.干热处理

主要用于处理蔬菜种子，对多种种传病毒、细菌和真菌有除害效果，但处理不当可能降低种子萌发率。也用于处理原粮、饲料、面粉、包装袋、干花、草制品、泥炭藓和土壤等。巴西豆象：55℃处理1h，或60℃处理0.5h。松墨天牛：60℃处理12h。局限性：不能用于生活的植物材料。2.蒸汽热处理采用蒸汽热处理炉。用以处理水果和蔬菜，也用于种子、苗木消毒。水果热蒸汽处理设施包括三部分：①处理前的分级、清洁、整理车间；②蒸汽热处理室；③处理后的降温、去湿、包装车间。蒸汽热处理的主要设备：热饱和蒸汽发生装置、蒸汽分配管、气体循环风扇、温度监测系统。3.热水处理用于处理植物种子和无性繁殖材料，杀死病原真菌、细菌、线虫和某些昆虫。热水浸泡处理巴西豆象：50℃，处理1h或52℃处理0.5h。4.微波加热处理

适于携带物检疫与邮寄物检疫中处理量较小的非种用材料。优点：升温快，介质内部温度往往高于外部，处理快速、安全，效果可靠，费用低。缺点：常出现被处理物品各部分温度不均匀。5.高频加热广泛用于处理粮食、种子、干果、竹木制品、中草药、贵重食品等多种农副产品。受热均匀，不宜用于含水量高于害虫含水量的物品，如鲜果、蔬菜等。（二）低温处理1.速冻在-17℃或更低的温度下急速冰冻被处理的农产品。常用于加工用水果和蔬菜，杀灭害虫。处理过程：处理时先迅速降温到－17℃以下，并保持一定时间，处理期间温度不得高于－6℃。2.冷处理

指应用持续的不低于冰点的低温控制害虫。多