J2ScientificGPC凝胶渗透色谱操作指导

J2ScientificGPC凝胶渗透色谱操作指南应用局部<软件中文操作手册>及其他以赢利为目的的商业行为均构成对本公司的侵权。凝胶渗透色谱原理简介Accuprep系统构造及工作框图留意事项如何建立适合我的应用的方法GPC柱的维护和重装填如何备份数据常见故障分析凝胶渗透色谱原理简介凝胶渗透色谱，简称GPC，是一项比较传统的分别技术，GPC的柱子由化学惰性的中空小球组成，利用空间排阻的原理对样品进展分别，详见以以下图：大分子不能从孔中通过

小分子通过填料“球”中的孔GPC净化就显得格外必要了。Accuprep系统构造及工作框图AccuprerpTM是由美国J2Scientific公司生产的凝胶渗透样品净化系统，早在上世80AccuPrepJrAccuPrep2023AccuprerpTMMPS系统，体积进一步小面。AccuprerpTM自动系统 AccuprerpTM手动系统AccuPrepMPS自动系统AccuPrepMPSAccuPrepMPS自动系统GPC系统包括几个局部：触摸屏，把握模块，输送泵，检测器，自动进样器和软件局部。让我们先来生疏一下仪器各局部：触摸屏触摸屏柱子支架自动进样器V1/V2阀柱切换阀进样环与进样阀注射泵收集架检测器输送泵样品架1。留意事项：样品在进样前必需经0.45u的微孔膜过滤。含水量大的样品在进样前须脱水。对于快速柱来说，脂肪耐受力为0.5克；传统柱为1克，那么在进样前请以此为依据来计算取样量。例如某种样品的脂肪含量为20%，那么称样量请不2.5在完成前面的样品处理后，如液液萃取，要将样品体系转换成GPC所用的流淌相，一般来说除石油醚外，其它基质如丙酮，必需进展这样的转换。而假设承受乙酸乙酯这类与水互溶的溶剂进展萃取，最好过无水硫酸钠脱水。10%。GPC柱要求流淌相与柱子规格全都，请不要任凭变更流淌相的比例及组成。PTFE严禁使用酸，碱性流淌相，严禁使用水做为流淌相，严禁使用缓冲盐。GPC分析。假设有其它不明事项，请询问我公司工程师，请勿自行尝试。如何建立适用于自己的分析方法针对一般的农药/兽药残留分析来说，样品基质中的大分子干扰物主要为色化铝柱，酸性硅胶柱等，但这类方法多数会对待测样品有不同程度对的吸咐，会引起回收率的问题。依据凝胶渗透色谱的原理，大分子干扰物会领先从柱子中流出，随后是小分GPC什么时间停顿收集。为了说明如何找到准确的收集时间，我们以50%乙酸乙酯/50GCP2ml，100ppm〔请用1：1〕到1ml10ml,做为我们的待分析样品。在软件中，编辑方法default.met,对于快速柱来说，30不选择收集流速设定为4.7ml/min,25选择记录检测器数据编辑样品序列，待序列运行完毕后进入accuchrome,导入数据，依据标样的峰来设定收集时间，为了保证回收率，一般来说会让收集时间段略宽于峰宽。4．随后我们再回到Accuprep软件，建一个方法，留意这里的时间不是保存时1012.51102的收集时间为2.5,那么这个方法建立就完成了。但是通常来说，我们的分析不会这样简洁，我们通常在一个分析中要应付多达20，乃至40到50种农药，那么我们如何建立一个方法来进展这样的净化可以了。还有一类农药，在紫外检测器上并没有明显的吸取，我们如何来确定处理方法呢？一个是找一个分子量和构造相像，紫外有吸取的化合物来代替，由于GPC原理与样品的极性等化学活性无关，只与分子量大小有关，那么一般来说这样的方法完全可以找到准确的收集时间。那么还有一种方法就是进展分段收集。首先依据分子量信息可以或许知道待测样品会在什么时间馏出，然后将这一段时间分成几段，随后将分段收集后的样品上色谱分析，来推断其所在的位臵。法的校准。GPC柱的维护与重装填一根GPC柱假设维护好的话，那么样品重现性会更好，柱效会比较高，寿GPC2ml/min的小流速平衡10分钟，再使用常规流速，并留意观看柱压的变化，直到柱压稳定并在正常的8－12psi5－8psi12psi做正常，但要留意方法的校准。当柱压第一次超过12psi时，将柱子以0.5ml/min的流速反洗1清洗后再装入，但寿命一般不会太久。柱子的重装填：请确认以下零件齐备：Frit,SS,20µm,GlassColumnFR506AO-Ring,SiliconeEncapsulatedCO408ABedSupportHolder,GlassColumnCO635A4SealTeflonCO422A5Plunger,Long,GlassColumnCO300A6Collar,GlassColumn,DelrinCO3057Cone,CompressionCO432A装填步骤：1、在确定以上零件齐备的状态下，请预备以下必需的工具：铁架台，长颈漏斗，250ML2、将柱两端的四只螺母取下，就可以将两端的封套取下，将柱子的出入口的管璃棒搅动原有的填料，将其取出。管垂直夹在铁架台上，装好柱塞的一端向下，在上端旋转漏斗。4、将预备好的填料经漏斗倒入玻璃管中，并用流淌相冲洗烧杯和玻璃棒，及玻根柱塞装入，推至柱床处旋紧。在取出和装入柱塞时，请沿柱子轴向均匀用力，CO422A5、重力装填的柱子在压力系统中需要重调整。将柱子接入系统，2ML/min流速下检查是否有泄漏，如觉察有泄漏请重复2-4步骤。随后将流速渐渐加大至将柱子的一端与大气联通，旋松柱塞，调整柱床长度至刚刚的标记即可。调整方法。[溶剂的选择]每克凝胶的膨胀体积超过2.5ML的溶剂不能用于GPCBio-BeadsS-X3溶剂 0.5小时后18四氢呋喃(THF) 5．455.45二氯甲烷-环已烷(1：1) 5.355.35甲苯 5.355.35二氯甲烷-已烷(1：1) 4.854.85二氯甲烷-环已烷(15：85)4.354.40乙酸乙酯 3.753.75环已烷 2.002.65此局部内容引自中国疾病预防把握中心吴永宁教师的《色谱在食品安全分析中的应用》如何备份数据随着时间的推移，数据越来越多，尤其是在accuchorme软件里，导入的数据列表变得越来J2GPCBACKUPTOOL来进展数据备份并将其从列表中先移除。当数据很多时，可以用以下的方法来进展批量移除：关闭Accuchrome软件，并重启电脑。在C:\programfiles\microsoftSQLSever\MSSQL将其重命名，如J2DATA2023。插入GPC软件光盘，重安装“Setupdatatables”和“InstallDBUpdates1.01”。随后进入C:\programfiles\microsoftSQLSever\MSSQL，查看名目“J2DATA”是否已经被重建立。如已经建立，则备份成功。再次翻开Accuchrome软件，此时左边的数据栏已经清空。全部的.xml文件照旧存在于data名目，此时可以将其全部备份到别的计算机了。常见问题分析与计算机无法通讯在触摸屏的hardwaretouchscreencontrolpccontrol，并重启把握模块即可。口是否工作正常。将把握模块的侧板翻开，观看通讯板上电池旁边的红色LED是否亮起？如3V。hardware菜单，请要查看firmwareVCXXX/TPXXX,XXX工程师联系。e)用万用表检查主板上保险丝是否熔断，也可以用同型号配件互换检查。2．我的收集瓶是空的V1/V2我的检测器得到了负峰a.请检查流淌相是否用完。b.是否承受了其它的流淌相。c.检查流淌相是否分层，在分析前最好摇匀。d.换用颖的流淌相，可能流淌相存储时间过长，造成吸水。4．我的收集瓶中收到的只有流淌相，没有样品请检查V4〔injectvalve〕工作是否正常请检查自动进样器位臵是否正常泵还没有开启，系统就显示有压力请在configuration菜单中对压力传感器进展重臵自动进样器不能对准收集架hardware自动进样器需要重校正，请与我公司工程师联系检测器的屏幕上显示-00000并闪耀请将流淌池取出，在光路上放臵一张白纸检查光源是否发光〔切勿用眼睛直视，会被紫外灼伤缺乏500小时我公司予以免费更换，如超过500但不到1000小时，可以半价更1000检测器的读数不稳定清洗流淌池排解气泡更换的光源用，否则请马上关闭仪器，等待工程师到场。觉察样品未被正确处理(如样品没有吸入系统，没有收集等)V1-V4觉察自动进