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文档简介
血液抹片及染色法BloodSmearandStainingTechniques血液抹片之製作(PreparationforBloodSmear)以血液抹片做各種染色檢查.可以獲知許多血液的病歷資料.以幫助診斷.而抹片的應用如下:1.白血球分類計數2.網狀紅血球計數3.紅血球型態4.血小板計數5.骨髓檢查6.細胞化學之研究7.LE細胞製作*檢體1.微血管血液-1分鐘內使用2.剛採集之靜脈血-3~10分鐘內使用3.新鮮加EDTA血液-1~2小時內使用4.骨髓穿刺液一.載玻片法(SlideMethod)*材料1.載玻片Slide2.推片Spreader(標準推片實際上只是去角的載玻片。)3.少量血液半滴約0.025ml*操作取半滴或一小滴血液置於載玻片一端,再以另一張推片靠血滴前方接觸,使血液沿兩張玻璃片間擴散後,呈30度,緩緩定速推向另一端,立即快乾(來回搖晃或微風下吹乾)。※注意*血液是在推片後邊被「拖」著走,速度要放慢而穩定,否則較輕的WBC如monocyte、neutrophil會集中在抹片兩側邊緣及末端,lymphocyte則集中在中央。*血清蛋白增加或ESR升高之血液抹片,會有錢鏈樣形成(rouleauxformation)。*抹片快乾可以獲得坦平血球效果,不可求快而以強風扇吹乾,會影響血球型態變形,譬如淋巴球變大而成多角型、偽足狀。*反之,若任其自然風乾,則RBC、WBC都會縮小,尤其會影響WBC細部結構和細胞核觀察。*完整之血液抹片:均勻、前端厚、厚端較薄、兩側留空白、至少涵蓋2/3載玻片。*不良之血液抹片:太厚或太薄、波狀、節狀、空洞二、蓋玻片法(CoverglassMethod)*操作蓋玻片法多用於製作骨髓抹片。以小吸管吸取一小滴骨髓穿刺液於22×22mm之蓋玻片上,另取一張蓋玻片以「對角」覆蓋於其上。以兩手持玻片,平行拉開,迅速搖乾。染色後以封蓋劑(permount)黏於載玻片上,以利鏡檢與保存。抹片製作:蓋玻片法三、自動抹片機(AutomatedSpunSmear)*自動抹片機作成抹片,均勻一致,目有:Miniprep、cytocentrifuge、東亞sysmexSP-100等廠牌。SP-100除抹片製作依據血液標本之Hct設定5級推速外,尚包括全套自動化染色,將另述於後。*抹片之保存抹片標本做完後應立即染色事先以methanol固定後,可以保存更久
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