出凝血检查-上海交通大学医学院医学检验系课件

实验

出凝血检查上海交通大学医学院余文红实验

出凝血检查上海交通大学医学院1（一）血标本的采取应注意的问题

（一）血标本的采取应注意的问题

2

1.PT、APTT凝血实验检查均使用静脉血。采血人员应技术熟练，以防止组织损伤，外源性凝血因子进入针管。

1.PT、APTT凝血实验检查均使用静脉血。采血人员应技3

2．一般血液采集，进入容器至进行实验所用的时间越短，所分析的凝血因子被保护得越好。从输液三通管取出血的做法不可取。

4

3．取血时病人应松驰，环境温暖，防止静脉挛缩，止血带的压力要尽可能小，取血时，拉针栓的速度要慢而均匀，使血液平稳地进入注射器，防止气泡的产生。

5

4．一旦取样完毕，立即与抗凝剂充分混合，一般提倡使用真空采血管。

6

5．用硅化玻璃或塑料注射器采血。考虑结果的精确性，应将试管刻度的可能误差控制在既定体积的10%以内。

5．用硅化玻璃或塑料注射器采血。考虑结果的精确性，应将试管7

6.采血后标本在低温保存且在一定时间范围内。

8

7.国际血液学标准化委员会（ICSH）、国际血栓与止血委员会（ICTH）推荐使用3.2g/dl（含2H2O）或0.109mol/L的枸橼酸钠作为凝血因子检查的抗凝剂。7.国际血液学标准化委员会（ICSH）、国际血栓与止血委9

8.抗凝剂在血标本的绝对含量可改变血浆中钙离子浓度，进而影响试验结果，因此应根据患者红细胞比例（Hct）状况随时调整抗凝剂用量。8.抗凝剂在血标本的绝对含量可改变血浆中钙离子浓度，进10（二）应用试剂应注意

的问题

（二）应用试剂应注意

的问题

11

1.组织凝血活酶工作制剂的国际敏感指数（ISI），为了使不同敏感性的组织凝血活酶在检测PT中能得到同样的结果，必须要制定一个共同的敏感性指标。1.组织凝血活酶工作制剂的国际敏感指数（ISI），为了使不12

2.凝血活酶和部分活化凝血活酶的使用步骤必须严格按照说明书进行。通常在使用前必须充分混匀试剂，以使微粒重新均匀悬浮于液体中。2.凝血活酶和部分活化凝血活酶的使用步骤必须严格按照说明书13

3.试剂准备过程中应该使用去离子水。

14

4.正常对照血浆通常将多份健康人血标本混在一起，以弥补个体误差。

15（三）使用实验器材应注意的问题

（三）使用实验器材应注意的问题

16

1.玻璃器皿的要求：贮存和测试时应选用干净、没有划痕的试管。

17

2.温度的要求：人工测定终点法要求水浴箱的温度必须保持在（37±1）℃，并且周围照明设备要好，便于读取终点。

18（四）实验操作应注意的问题

（四）实验操作应注意的问题

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1.许多试验误差都来源于技术的错误。在实验技术、试剂、温度及pH值上很微小的变化都会导致试验结果明显的变化。

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2.手工法PT或试管法CT检查时，倾斜试管动作一定要轻，角度要小，以减少血液与管壁的接触面积。

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3.血液凝固主要是酶催化的反应，所以实验过程中要严格控制理想的pH环境和溶液的离子强度。

22

4.试验结果准确还取决于所用的反应物的量、加入顺序和不同反应物的孵育时间。

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5.APTT、PT需乏血小板血浆。

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6.试验前检查血浆是否有溶血、黄疸、脂血和出现凝块。

25

7.报告方式：以PT的秒（s）数报告。以患者PT（s）/正常对照（s）的比（PTR）报告。在口服药物治疗监控时以INR报告。ICSH规定，不再用百分比（活动度）报告。APTT以秒报告。

7.报告方式：261987年WHO提出PT值用INR（internationalnormalizedratio国际标准化比值）作为PT结果报告形式，并用以作为抗凝治疗监护的指标。

1987年WHO提出PT值用INR（internationa27

INR=［病人PT（s）/正常人平均PT（s）］ISIPTR=受检者PT（s）/正常对照PT（s）INR=PTRISIISI：国际敏感指数（internationalsensitivityindex）1～1.9INR=［病人PT（s）/正常人平均PT（s）］ISI28

CT、PT、APTT、RT、Fg、TT

29凝血时间测定CT凝血时间测定CT30目的：掌握玻璃试管法凝血时间测定的方法

目的：掌握玻璃试管法凝血时间测定的方法31原理：离体静脉血与玻璃表面接触后，血中XII因子活化并启动内源性凝血途径，最终生成纤维蛋白而使血液凝固所需的时间。原理：离体静脉血与玻璃表面接触后，血中XII因子活32器材：6mm直径玻璃试管3支静脉采血器材37℃恒温浴箱秒表器材：6mm直径玻璃试管3支33

步骤：3支试管各1ml血，每隔0.5min倾斜，第一管计时后，立即观察第二、三管并计时，直至血液凝固。结果判断：从血液刚进入注射器至第3管凝固所需时间即为凝血时间。步骤：3支试管各1ml血，每隔0.5min倾斜，第一管计时34

正常参考值：4～12分钟报告方式：CTX.Xmin（玻璃试管法）正常参考值：4～12分钟35注意事项：试管应洁净干燥，抽血应“一针见血”且血液中不含泡沫。温度恒定为37℃，倾斜试管角度应在30°左右。注意事项：试管应洁净干燥，抽血应“一针见血”且血液中不含泡沫36评价：凝血时间曾用玻片法测定，但由于毛细血管采血，易混入组织液而使凝血时间正常，属于淘汰方法。延长：严重内源性凝血途径凝血因子有缺陷；血中抗凝物质增多；肝素治疗缩短：高凝状态（DIC早期）评价：凝血时间曾用玻片法测定，但由于毛细血管采血，易混入组织37凝血酶原时间

PT

凝血酶原时间

PT38原理：

在乏血小板血浆中加入组织因子和钙离子（钙凝血活酶）后，血浆发生凝固的时间即为凝血酶原时间（PT）。

原理：在乏血小板血浆中加入组织因子和钙离子（钙凝血39步骤：取空腹静脉血1.8ml加入含有0.2ml109mmol/L枸橼酸钠的试管中混匀备用。抗凝血以3000r/min离心10min分离血浆将试剂、正常人混合血浆、待测血浆与37℃预热5min。血浆0.1ml加入混匀的试剂0.2ml，开动秒表计时。步骤：取空腹静脉血1.8ml加入含有0.2ml109mmol40

正常参考值：PT：11～13秒PTR：1±0.15INR：0.8～1.5

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报告方式：PT：X.Xs，正常人血浆X.XsPTR：X.XINR：X.X报告方式：42注意事项：试管应洁净干燥，抽血应“一针见血”，抗凝剂与血液比例（1：9）应准确。取血后4h内完成测定。钙凝血活酶必须标有国际敏感指数（ISI），ISI越接近于1.0越敏感。标本测定前应先测定正常人混合血浆，其PT值在允许范围内才能测定样本。注意事项：试管应洁净干燥，抽血应“一针见血”，抗凝剂与血液比43评价：

血浆凝血酶原是一种筛选试验，是用来证实先天性或获得性纤维蛋白原、凝血酶原和凝血因子V、VII、X的缺陷或相应抑制物的存在，也用于监测口服抗凝治疗时引起的凝血酶原和因子VII、X水平的下降。评价：血浆凝血酶原是一种筛选试验，是用44实质：

对检测样本（血浆）中存在凝血激酶时的再钙化反应，这种过程包括了因子VIIa、组织因子、磷脂、钙离子对凝血酶原的活化，凝血酶裂解纤维蛋白原和纤维蛋白单体的聚集交联。实质：对检测样本（血浆）中存在凝血激酶45活化部分凝血活酶时间测定

APTT

活化部分凝血活酶时间测定

APTT46原理：用白陶土激活XII因子、脑磷脂代替血小板磷脂，测定乏血小板血浆加入Ca2++后凝固所需时间。原理：用白陶土激活XII因子、脑磷脂代替血小板磷脂，47步骤：采血空腹静脉血1.8ml+0.2ml109mmol/L枸橼酸钠混匀。分离血浆3000r/min离心10分钟分离血浆。溶解试剂临用时加1ml蒸馏水，室温静置15min以上，混匀后使用。预温活化0.1ml血浆+APTT试剂0.1ml混匀，37℃准确孵育3min（其间轻轻摇动数次）加钙计时加入0.1ml25mmol/LCaCl2混匀并立即开动秒表计时，20s后，观察混合液流动状态。步骤：采血空腹静脉血1.8ml+0.2ml109mmo48

正常参考值：一般在33.68～40.32s（不同仪器和试剂所测之参考值有差别）报告方式：APTT：XX.Xs，正常人血浆：XX.Xs正常参考值：一般在33.68～40.32s（不同仪器和试剂49注意事项：采血时穿刺尽量一针见血，不要淤血和气泡，采血后立即与抗凝剂混合，尽快送往实验室。使用枸橼酸盐（抗凝）血浆如果不能立即测试，应尽快分离血浆，盛血浆的容器加塞，防止PH值改变血浆在2～8℃下保留7天

钙凝血活酶必须标有国际敏感指数（ISI），ISI越接近于1.0越敏感。注意事项：采血时穿刺尽量一针见血，不要淤血和气泡，采血后立即50临床意义：APTT延长：表明有内源性凝血途径有关因子的缺陷（血友病）和纤维蛋白原缺乏。纤维活力增加，如继发性，原发性纤溶以及血循环中有纤维蛋白（原）降解产物（FDP）。血循环中有抗凝物质。

临床意义：APTT延长：51

APTT缩短：高凝状态，如DIC的高凝期，促凝物质进入血液以及凝血因子的活性增高等。

APTT缩短：52评价：APTT和PT同时检测是目前二期止血缺陷的主要筛选试验组合。评价：APTT和PT同时检测是目前二期止血缺陷的主要筛选试验53在有临床出血症状的前提下：APTTPT提示正常延长因子VII的缺陷延长正常因子VIII、IX、XI缺陷正常正常怀疑因子XIII缺陷可能延长延长除因子II、V、I、X缺陷外，主要是异常抗凝物质的增多在有临床出血症状的前提下：APTTPT54血浆复钙时间

RT

血浆复钙时间

RT55原理：在去钙离子的抗凝血浆中，重新加入适量的钙后，血浆发生凝固。原理：在去钙离子的抗凝血浆中，重新加入适量的56步骤：0.2ml0.1mol/L草酸钠+静脉血1.8ml混匀，离心分离血浆。0.1ml血浆置37℃水浴中，+0.025mol/LCaCl20.1ml，立即开动秒表记录时间。步骤：0.2ml0.1mol/L草酸钠+静脉血1.8ml混57

正常参考值：2.08±0.49分（2.18~3.77分钟）正常参考值：58注意事项：不要溶血，否则时间缩短CaCl2新鲜配制分离血浆以1000转/分为宜，高速离心可使大量血小板下沉而导致复钙时间延长。注意事项：不要溶血，否则时间缩短59复钙交叉时间

RT

复钙交叉时间

RT60步骤：按下列比例准备5份待测血浆：加样量12345受检血浆（ml）－0.010.050.090.10正常血浆（ml）0.100.090.050.01－上述试管，置37℃1min，加0.025mol/LCaCl20.1ml，混匀后，记录血浆凝固时间。步骤：按下列比例准备5份待测血浆：61注意事项：所用血浆均为富含血小板血浆，分离出血浆后需在2h内检测完毕。注意事项：所用血浆均为富含血小板血浆，分离出血浆后需在2h内62临床意义：RT最早作为内源性凝血系统相关凝血因子缺陷的筛选检查，但由于这个试验不如APTT，又容易受血小板数量和功能影响，目前只用来筛选是否存在病理性抗凝物质增多。临床意义：RT最早作为内源性凝血系统相关凝血因子缺陷的筛选检63

延长的复钙时间如被1/10量的正常血浆所纠正，则表示受检血浆中缺乏内源凝血因子；如不被少量正常血浆纠正，提示存在异常抗凝物质。延长的复钙时间如被1/10量的正常血浆所纠正，则表示受检血64血浆纤维蛋白原

Fg

血浆纤维蛋白原

Fg65

纤维蛋白原的测定方法众多，大体上分三大类：基于经加凝血酶后，形成纤维蛋白的方法，即可凝固蛋白法。物理、化学测定法。免疫学测定法。

纤维蛋白原的测定方法众多，大体上分三大类：66目的和原理

目的和原理67

为了解凝血途径最后环节的状况，排除纤维蛋白原减少、异常对凝血筛选试验的影响，了解纤溶活动度等可选择本试验。为了解凝血途径最后环节的状况，排除纤维蛋白原减少68

Clauss法以凝血酶作用于受检血浆中的纤维蛋白原，使其形成纤维蛋白，血液凝固。Clauss法以凝血酶作用于受检血浆中的纤维蛋69

纤维蛋白原的量与凝固时间成负相关，检测结果与参比血浆制成的标准曲线对比可得出纤维蛋白原的含量。纤维蛋白原的量与凝固时间成负相关，检测结果与参比70步骤：将参比血浆用血浆稀释液作原倍、1：2、1：4、1：8、1：16稀释5管。取稀释血浆0.2ml于小试管中，置37℃水浴预热2分钟，再加凝血酶溶液0.1ml，记录时间。步骤：将参比血浆用血浆稀释液作原倍、1：2、1：4、1：8、71相关分析：首先先清除内存。INV+AC，浓度（log或In）XD，YD输入（如不取对数，浓度直接输入XD，YD读取值DATA输入；全部数据输入完毕，按INV+9读出相关系数r。待测读数INV+log或In→读出相关浓度。如不取对数，待测读数直接INV+ŷx→读出相关浓度。最终浓度需根据样品稀释倍数乘积。^相关分析：首先先清除内存。INV+AC，浓度（log或In）72标准曲线：t（s）25201510500.511.522.5C（g/L）标准曲线：t（s）73

如血浆纤维蛋白原含量大于4g/L时，应稀释血浆后重测，结果乘以稀释倍数。低于0.8g/L时，需将原血浆改为1∶2或1∶5稀释，在标准曲线上查得结果后，除以5或除以2。如血浆纤维蛋白原含量大于4g/L时，应稀释血74

正常参考值：2～4mg/ml正常参考值：75临床意义：纤维蛋白原增高除生理情况下的应激反应、妊娠后期外，主要出现感染、灼伤、动脉粥样硬化、急性心肌梗死、多发性骨髓瘤、糖尿病、败血症等。纤维蛋白原减少见于DIC、原发性纤溶亢进症、重症肝炎、肝硬化和溶栓治疗时。临床意义：纤维蛋白原增高除生理情况下的应激反应、妊娠后期外，76评价：Clauss方法测定的是纤维蛋白原功能，因此需纤维蛋白原结构正常，且有一定的含量，对低（无）纤维蛋白原血症和因此后纤维蛋白原血症应改用ELISA和RIA等免疫检测手段。评价：Clauss方法测定的是纤维蛋白原功能，因此77主要误差来源：血浆稀释不准。凝血酶活性不足或失效。凝血酶一般应在低温保存，稀释后在塑料(聚乙烯)试管中，置4℃可保存活性24小时。测定终点观察不准确，尤其是纤维蛋白原含量高时，往往很快即凝固，手工法重复性较差，不易做准。主要误差来源：血浆稀释不准。78血浆凝血酶时间TT

血浆凝血酶时间TT79原理以标准凝血酶溶液加入受检血浆，使凝血酶裂解血浆中的纤维蛋白原，形成纤维蛋白，造成血浆凝固，此时所需时间为凝血酶时间。原理以标准凝血酶溶液加入受检血浆，使凝血酶裂解血浆中的纤维蛋80方法：

0.1ml血浆+0.1mlTT试剂，37℃水浴中观察凝固时间。方法：0.1ml血浆+0.1mlTT试剂81正常参考值：16~18S正常参考值：82评价：时间大于正常参考值3秒：DIC、肝脏病变。评价：时间大于正常参考值3秒：DIC、肝脏病变。83

TT时间缩短，并不代表高凝状态或DIC前期，是技术原因。如操作失误，组织液混入血标本，标本在4℃环境中放置过久。TT时间缩短，并不代表高凝状态或DIC前期，是技术原因。如84实验

出凝血检查上海交通大学医学院余文红实验

出凝血检查上海交通大学医学院85（一）血标本的采取应注意的问题

（一）血标本的采取应注意的问题

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1.PT、APTT凝血实验检查均使用静脉血。采血人员应技术熟练，以防止组织损伤，外源性凝血因子进入针管。

1.PT、APTT凝血实验检查均使用静脉血。采血人员应技87

2．一般血液采集，进入容器至进行实验所用的时间越短，所分析的凝血因子被保护得越好。从输液三通管取出血的做法不可取。

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3．取血时病人应松驰，环境温暖，防止静脉挛缩，止血带的压力要尽可能小，取血时，拉针栓的速度要慢而均匀，使血液平稳地进入注射器，防止气泡的产生。

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4．一旦取样完毕，立即与抗凝剂充分混合，一般提倡使用真空采血管。

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5．用硅化玻璃或塑料注射器采血。考虑结果的精确性，应将试管刻度的可能误差控制在既定体积的10%以内。

5．用硅化玻璃或塑料注射器采血。考虑结果的精确性，应将试管91

6.采血后标本在低温保存且在一定时间范围内。

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7.国际血液学标准化委员会（ICSH）、国际血栓与止血委员会（ICTH）推荐使用3.2g/dl（含2H2O）或0.109mol/L的枸橼酸钠作为凝血因子检查的抗凝剂。7.国际血液学标准化委员会（ICSH）、国际血栓与止血委93

8.抗凝剂在血标本的绝对含量可改变血浆中钙离子浓度，进而影响试验结果，因此应根据患者红细胞比例（Hct）状况随时调整抗凝剂用量。8.抗凝剂在血标本的绝对含量可改变血浆中钙离子浓度，进94（二）应用试剂应注意

的问题

（二）应用试剂应注意

的问题

95

1.组织凝血活酶工作制剂的国际敏感指数（ISI），为了使不同敏感性的组织凝血活酶在检测PT中能得到同样的结果，必须要制定一个共同的敏感性指标。1.组织凝血活酶工作制剂的国际敏感指数（ISI），为了使不96

2.凝血活酶和部分活化凝血活酶的使用步骤必须严格按照说明书进行。通常在使用前必须充分混匀试剂，以使微粒重新均匀悬浮于液体中。2.凝血活酶和部分活化凝血活酶的使用步骤必须严格按照说明书97

3.试剂准备过程中应该使用去离子水。

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4.正常对照血浆通常将多份健康人血标本混在一起，以弥补个体误差。

99（三）使用实验器材应注意的问题

（三）使用实验器材应注意的问题

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1.玻璃器皿的要求：贮存和测试时应选用干净、没有划痕的试管。

101

2.温度的要求：人工测定终点法要求水浴箱的温度必须保持在（37±1）℃，并且周围照明设备要好，便于读取终点。

102（四）实验操作应注意的问题

（四）实验操作应注意的问题

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1.许多试验误差都来源于技术的错误。在实验技术、试剂、温度及pH值上很微小的变化都会导致试验结果明显的变化。

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2.手工法PT或试管法CT检查时，倾斜试管动作一定要轻，角度要小，以减少血液与管壁的接触面积。

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3.血液凝固主要是酶催化的反应，所以实验过程中要严格控制理想的pH环境和溶液的离子强度。

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4.试验结果准确还取决于所用的反应物的量、加入顺序和不同反应物的孵育时间。

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5.APTT、PT需乏血小板血浆。

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6.试验前检查血浆是否有溶血、黄疸、脂血和出现凝块。

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7.报告方式：以PT的秒（s）数报告。以患者PT（s）/正常对照（s）的比（PTR）报告。在口服药物治疗监控时以INR报告。ICSH规定，不再用百分比（活动度）报告。APTT以秒报告。

7.报告方式：1101987年WHO提出PT值用INR（internationalnormalizedratio国际标准化比值）作为PT结果报告形式，并用以作为抗凝治疗监护的指标。

1987年WHO提出PT值用INR（internationa111

INR=［病人PT（s）/正常人平均PT（s）］ISIPTR=受检者PT（s）/正常对照PT（s）INR=PTRISIISI：国际敏感指数（internationalsensitivityindex）1～1.9INR=［病人PT（s）/正常人平均PT（s）］ISI112

CT、PT、APTT、RT、Fg、TT

113凝血时间测定CT凝血时间测定CT114目的：掌握玻璃试管法凝血时间测定的方法

目的：掌握玻璃试管法凝血时间测定的方法115原理：离体静脉血与玻璃表面接触后，血中XII因子活化并启动内源性凝血途径，最终生成纤维蛋白而使血液凝固所需的时间。原理：离体静脉血与玻璃表面接触后，血中XII因子活116器材：6mm直径玻璃试管3支静脉采血器材37℃恒温浴箱秒表器材：6mm直径玻璃试管3支117

步骤：3支试管各1ml血，每隔0.5min倾斜，第一管计时后，立即观察第二、三管并计时，直至血液凝固。结果判断：从血液刚进入注射器至第3管凝固所需时间即为凝血时间。步骤：3支试管各1ml血，每隔0.5min倾斜，第一管计时118

正常参考值：4～12分钟报告方式：CTX.Xmin（玻璃试管法）正常参考值：4～12分钟119注意事项：试管应洁净干燥，抽血应“一针见血”且血液中不含泡沫。温度恒定为37℃，倾斜试管角度应在30°左右。注意事项：试管应洁净干燥，抽血应“一针见血”且血液中不含泡沫120评价：凝血时间曾用玻片法测定，但由于毛细血管采血，易混入组织液而使凝血时间正常，属于淘汰方法。延长：严重内源性凝血途径凝血因子有缺陷；血中抗凝物质增多；肝素治疗缩短：高凝状态（DIC早期）评价：凝血时间曾用玻片法测定，但由于毛细血管采血，易混入组织121凝血酶原时间

PT

凝血酶原时间

PT122原理：

在乏血小板血浆中加入组织因子和钙离子（钙凝血活酶）后，血浆发生凝固的时间即为凝血酶原时间（PT）。

原理：在乏血小板血浆中加入组织因子和钙离子（钙凝血123步骤：取空腹静脉血1.8ml加入含有0.2ml109mmol/L枸橼酸钠的试管中混匀备用。抗凝血以3000r/min离心10min分离血浆将试剂、正常人混合血浆、待测血浆与37℃预热5min。血浆0.1ml加入混匀的试剂0.2ml，开动秒表计时。步骤：取空腹静脉血1.8ml加入含有0.2ml109mmol124

正常参考值：PT：11～13秒PTR：1±0.15INR：0.8～1.5

125

报告方式：PT：X.Xs，正常人血浆X.XsPTR：X.XINR：X.X报告方式：126注意事项：试管应洁净干燥，抽血应“一针见血”，抗凝剂与血液比例（1：9）应准确。取血后4h内完成测定。钙凝血活酶必须标有国际敏感指数（ISI），ISI越接近于1.0越敏感。标本测定前应先测定正常人混合血浆，其PT值在允许范围内才能测定样本。注意事项：试管应洁净干燥，抽血应“一针见血”，抗凝剂与血液比127评价：

血浆凝血酶原是一种筛选试验，是用来证实先天性或获得性纤维蛋白原、凝血酶原和凝血因子V、VII、X的缺陷或相应抑制物的存在，也用于监测口服抗凝治疗时引起的凝血酶原和因子VII、X水平的下降。评价：血浆凝血酶原是一种筛选试验，是用128实质：

对检测样本（血浆）中存在凝血激酶时的再钙化反应，这种过程包括了因子VIIa、组织因子、磷脂、钙离子对凝血酶原的活化，凝血酶裂解纤维蛋白原和纤维蛋白单体的聚集交联。实质：对检测样本（血浆）中存在凝血激酶129活化部分凝血活酶时间测定

APTT

活化部分凝血活酶时间测定

APTT130原理：用白陶土激活XII因子、脑磷脂代替血小板磷脂，测定乏血小板血浆加入Ca2++后凝固所需时间。原理：用白陶土激活XII因子、脑磷脂代替血小板磷脂，131步骤：采血空腹静脉血1.8ml+0.2ml109mmol/L枸橼酸钠混匀。分离血浆3000r/min离心10分钟分离血浆。溶解试剂临用时加1ml蒸馏水，室温静置15min以上，混匀后使用。预温活化0.1ml血浆+APTT试剂0.1ml混匀，37℃准确孵育3min（其间轻轻摇动数次）加钙计时加入0.1ml25mmol/LCaCl2混匀并立即开动秒表计时，20s后，观察混合液流动状态。步骤：采血空腹静脉血1.8ml+0.2ml109mmo132

正常参考值：一般在33.68～40.32s（不同仪器和试剂所测之参考值有差别）报告方式：APTT：XX.Xs，正常人血浆：XX.Xs正常参考值：一般在33.68～40.32s（不同仪器和试剂133注意事项：采血时穿刺尽量一针见血，不要淤血和气泡，采血后立即与抗凝剂混合，尽快送往实验室。使用枸橼酸盐（抗凝）血浆如果不能立即测试，应尽快分离血浆，盛血浆的容器加塞，防止PH值改变血浆在2～8℃下保留7天

钙凝血活酶必须标有国际敏感指数（ISI），ISI越接近于1.0越敏感。注意事项：采血时穿刺尽量一针见血，不要淤血和气泡，采血后立即134临床意义：APTT延长：表明有内源性凝血途径有关因子的缺陷（血友病）和纤维蛋白原缺乏。纤维活力增加，如继发性，原发性纤溶以及血循环中有纤维蛋白（原）降解产物（FDP）。血循环中有抗凝物质。

临床意义：APTT延长：135

APTT缩短：高凝状态，如DIC的高凝期，促凝物质进入血液以及凝血因子的活性增高等。

APTT缩短：136评价：APTT和PT同时检测是目前二期止血缺陷的主要筛选试验组合。评价：APTT和PT同时检测是目前二期止血缺陷的主要筛选试验137在有临床出血症状的前提下：APTTPT提示正常延长因子VII的缺陷延长正常因子VIII、IX、XI缺陷正常正常怀疑因子XIII缺陷可能延长延长除因子II、V、I、X缺陷外，主要是异常抗凝物质的增多在有临床出血症状的前提下：APTTPT138血浆复钙时间

RT

血浆复钙时间

RT139原理：在去钙离子的抗凝血浆中，重新加入适量的钙后，血浆发生凝固。原理：在去钙离子的抗凝血浆中，重新加入适量的140步骤：0.2ml0.1mol/L草酸钠+静脉血1.8ml混匀，离心分离血浆。0.1ml血浆置37℃水浴中，+0.025mol/LCaCl20.1ml，立即开动秒表记录时间。步骤：0.2ml0.1mol/L草酸钠+静脉血1.8ml混141

正常参考值：2.08±0.49分（2.18~3.77分钟）正常参考值：142注意事项：不要溶血，否则时间缩短CaCl2新鲜配制分离血浆以1000转/分为宜，高速离心可使大量血小板下沉而导致复钙时间延长。注意事项：不要溶血，否则时间缩短143复钙交叉时间

RT

复钙交叉时间

RT144步骤：按下列比例准备5份待测血浆：加样量12345受检血浆（ml）－0.010.050.090.10正常血浆（ml）0.100.090.050.01－上述试管，置37℃1min，加0.025mol/LCaCl20.1ml，混匀后，记录血浆凝固时间。步骤：按下列比例准备5份待测血浆：145注意事项：所用血浆均为富含血小板血浆，分离出血浆后需在2h内检测完毕。注意事项：所用血浆均为富含血小板血浆，分离出血浆后需在2h内146临床意义：RT最早作为内源性凝血系统相关凝血因子缺陷的筛选检查，但由于这个试验不如APTT，又容易受血小板数量和功能影响，目前只用来筛选是否存在病理性抗凝物质增多。临床意义：RT最早作为内源性凝血系统相关凝血因子缺陷的筛选检147

延长的复钙时间如被1/10量的正常血浆所纠正，则表示受检血浆中缺乏内源凝血因子；如不被少量正常血浆纠正，提示存在异常抗凝物质。延长的复钙时间如被1/10量的正常血浆所纠正，则表示受检血148血浆纤维蛋白原

Fg

血浆纤维蛋白原

Fg149

纤维蛋白原的测定方法众多，大体上分三大类：基于经加凝血酶后，形成纤维蛋白的方法，即可凝固蛋白法。物理、化学测定法。免疫学测定法。

纤维蛋白原的测定方法众多，大体上分三大类：150目的和原理

目的和原理151

为了解凝血途径最后环节的状况，排除纤维蛋白原减少、异常对凝血筛选试验的影响，了解纤溶活动度等可选择本试验。为了解凝血途径最后环节的状况，排除纤维蛋白原减少152

Clauss法以凝血酶作用于受检血浆中的纤维蛋白原，使其形成纤维蛋白，血液凝固。Clauss法以凝血酶作用于受检血浆中的纤维蛋153

纤维蛋白原的量与凝固时间成负相关，检测结果与参比血浆制成的标准曲线对比可得出纤维蛋白原的含量。纤维蛋白原的量与凝固时间成负相关，检测结果与参比154