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文档简介
PAGE1毕业设计(论文)设计(论文)题目苦参与甘草配伍的工艺研究重庆邮电大学本科毕业设计(论文)-PAGE45-摘要目的:通过甘草和苦参配伍工艺研究,观察甘草和苦参在不同比例下(1:1、1:2、2:1)主要成分苦参碱的变化。方法:对甘草粗粉采用水提法进行煎煮,煎煮液浓缩,甘草酸水提浓缩液中加入200mL无水乙醇,静置1h,离心,将离心上清液旋转蒸发浓缩至稠膏状,加1%稀氨水200mL使之复溶,再加6%稀盐酸100mL,静置20h离心,0℃冰水洗至pH5-6,冷冻干燥,得甘草酸粗品,称重计算甘草酸粗品得率,并用大孔吸附树脂法进行精制甘草酸。对苦参粗粉采用水提法进行煎煮,煎煮液浓缩,精确苦参碱浓缩液2mL,加5mLpH=7.6的溴麝草酚兰缓冲溶液和10mL氯仿,密塞,振摇2min,移入50mL分液漏斗中,静置30min,分出氯仿层于具塞比塞管中。在波长410nm处测定苦参碱的A值。重复3次,取其平均值。根据标准曲线方程求出提取物中苦参碱的含量,计算出苦参碱得率。最后将苦参碱和甘草酸按照1:1、2:1、1:2三种不同的比例进行煎煮20分钟,通过紫外分光光度法研究配伍之后的苦参碱的变化。结果:苦参碱和甘草酸按照1:1、2:1、1:2三种不同的比例进行煎煮1h,提取苦参碱,经紫外分光光度法测定,苦参碱的含量为2.563%、4.239%、4.206%。结论:苦参碱和甘草酸按照1:1、2:1、1:2三种不同的比例进行煎煮1h,表明苦参与甘草配伍之后,主要成分苦参碱发生了变化,含量较配伍前呈上升趋势,且苦参碱与甘草酸配比2:1时,得率最高。苦参和甘草分别对乙肝病毒都有很好的疗效,但是单独使用效果不理想,因为配伍使用含量呈上升趋势,故配伍使用将成为苦参碱的使用趋势。【关键词】苦参甘草配伍紫外分光光度法
ABSTRACTObjective:licoriceandSophoracompatibilitytechnologyresearch,licoriceandSophoraobservedindifferentproportions(1:1,1:2,2:1)themaincomponentofmatrinechanges.Methods:formulationsoflicoricewithwaterdecoctionofcoarse,decoctionconcentratedacidhydrolysislicoriceextractconcentratewasadded200mLofethanol,allowedtostandfor1h,centrifuged,andthesupernatantwasconcentratedbyrotaryevaporationtoathickpaste,plus1%diluteaqueousammoniatomake200mLreconstitution,dilutehydrochloricacidwascoupledwith6%100mL,standing20hcentrifugation,0℃icewateruntilpH5-6,andlyophilizedtoobtaincrudeglycyrrhizicacid,glycyrrhizicacid,thecrudeproductweighedcalculatedyieldandwithmacroporousresinmethodforpurificationofglycyrrhizin.Sophoramealtobeusingboilingwaterextraction,boilingliquidconcentrate,concentrateaccuratelymatrine2mL,add5mLpH=bromophenolbluemuskgrassbuffersolution7.6and10mLchloroform,Mesa,shaking2min,clocked50mLseparatoryfunnelandallowedtostand30min,thechloroformlayerwasseparatedinaSeBisaitube.Avaluemeasuredatawavelengthof410nmatmatrine.Repeatthreetimesandaveraged.Accordingtothestandardcurveequation,Matrineextract,matrinecalculatedyield.Finally,accordingto1:1,2:1,1:2matrineglycyrrhizinthreedifferentproportionsboilingfor20minutes,byUVspectrophotometrychangeaftermatrinecompatibilitystudies.Results:Matrineandlicoriceacidaccordingtothreedifferentproportions1:1,2:1,1:2boiling1h,extractingmatrinebyUVspectrophotometry,matrinecontentof2.563%,4.239%,4.206%.
Conclusion:Matrine1:1,2:1,1:2andglycyrrhizicacidafterboilinginthreedifferentproportions1h,showinvolvementLicoriceaccordingbitter,matrinemaincomponentchanges,thecompatibilityofcontentthanbeforewhenanupwardtrend,andmatrineandlicoriceacidratioof2:1,thehighestyield.SophoraandlicoricearehepatitisBvirushasagoodeffect,butaloneisnotsatisfactory,becausethecompatibilityoftheuseofthecontentontherise,itwillbecometheusagetrendsusingcompatibilitymatrine.【Keywords】SophoraLicoriceCompatibilityUVspectrophotometry
目录摘要………………...I目录………………III前言…………………………..……1第一章绪论 ………………..………………2第一节苦参……………..……………2一、苦参的主要药理作用概述 ………2二、苦参的主要成分、结构及生药材鉴定概述…………5第二节甘草…………………6一、甘草的主要药理作用概述…………7二、甘草的主要成分、结构及生药材鉴定概述………8第三节苦参和甘草配伍研究的意义………………9第四节本章小结………………9第二章苦参碱和甘草酸的制备方法学研究………9一、先加酸水提法………9二、先加醇水提法 …………………….10三、稀氨水提取法 ……………..………….10四、无水乙醇提取法………...10五、氨性无水乙醇提取法……………..…..……...10六、重结晶法精制甘草酸………………10七、二次沉淀法精制甘草酸……11八、静态吸附法………………..…11HYPERLINK第二节苦参碱的提取、精制方法学研究…………………11HYPERLINK一、溶剂提取法…………11HYPERLINK二、离子交换法…………12HYPERLINK三、树脂吸附法…………12四、超临界流体萃取技术.……………13第三节本章小结……………13第三章苦参与甘草配伍研究……………14第一节与设备……………..14第二节甘草酸的提取……………15HYPERLINK第三节苦参碱的提取……………16第四节苦参与甘草配伍研究(1:1、2:1、1:2)……………17第五节本章小结……………17第四章HYPERLINK实验结果……………18第一节甘草酸的提取……………18第二节苦参碱标准品曲线……………18一、苦参碱的最大吸收波长选择……………18二、标准曲线绘制……………19三、苦参碱样品的测定……………20第三节苦参与甘草配伍研(1:1、2:1、1:2)……………20第四节本章小结 ……………21结束语 ……………23致谢 ……………24参考文献……………25附录 ……………26一、英文原文 ……………26二、英文翻译……………37TOC\o"1-3"\h\u前言生物碱是指从植物中分离出的一类含氮杂环的有机物,具有碱性和显著的生理活性。目前从植物中分离出的生物碱有5000-6000种,一些生物碱因其具有K抗病毒等作用,被开发为植物源药产品,并成为近年来研究的热点。苦参,别名野槐根、山槐根、干人参、苦骨。双子叶植物纲,豆科。落叶亚港灌木。根黄色、奇数羽状复叶,夏季开花,碟形花冠,淡黄色。中医学上以根入药。根呈圆柱形,微扭曲,外表棕黄色,粗糙,有明显的纵皱纹,皮孔突出,皮薄易脱落,多破碎向外反卷,断面黄色,显纤维,有粉质,中心部微菊花心,味极苦。主产于西昌、德昌、甘洛等县市,年产量10万多公斤,功能清热燥湿,杀虫利尿,主治各种传染性皮肤病和痢疾,痔血、湿热黄痘、是配制各种治疗皮肤药品的主要原料,可根据其药用价值、进一步开发加工增值。甘草一般指豆科植物乌拉尔甘草、胀果甘草或光果甘草的干燥根及根茎。它主要分布在西北、华北、东北地区。甘草历来享有“中草药之王”的美誉,具有广泛的生理活性。主要用作抗炎、抗病毒、保肝解毒及增强免疫功能等作用。近年来临床上还用于治疗各种急慢性肝炎、肝纤维化、支气管炎和艾滋病等疾病。
第一章绪论第一节苦参苦参碱苦参(学名:Sophoraflavescensvar.flavescens)为豆科苦参属的变种。分布于俄罗斯、日本、印度、朝鲜以及中国大陆等地,生长于海拔1,500米的地区,多生在山坡、沙地草坡灌木林中及田野附近,目前尚未由人工引种栽培,用于热痢,便血,黄疸尿闭,赤白带下,阴肿阴痒,湿疹,湿疮,皮肤瘙痒,疥癣麻风;外治滴虫性阴道炎。一、苦参的主要药理作用概述1、美容护肤作用苦参性寒,有清热燥湿,杀虫的功效,苦参浴能够清除下焦湿热,并且杀虫止痒,对皮肤瘙痒有很好的缓解作用,植物中草药能够平衡油脂分泌,疏通并收敛毛孔,清除皮肤内毒素杂质,丰富的本草营养,促进受损血管神经细胞的生长和修复,恢复皮下毛细血管细胞活力,肌肤重现紧致细滑,起到美容护肤的作用。2、抗菌作用苦参醚提物及醇提物对金黄色葡萄球菌有较强的抑菌作用;苦参水浸剂对堇色毛癣菌、同心性毛癣菌、许兰毛癣菌、奥杜盎小芽孢癣菌等有抑制作用。抗肿瘤作用苦参碱具有抗癌活性,小鼠腹腔注射500μg.d组2mo存活率为40%,而对照组在23天内全部死亡。氧化苦参碱则对此无作用。苦参碱在体外具有降低小鼠腹腔巨噬细胞抑制P815肿瘤细胞增殖的效应。槐果碱(Sophocarpine)亦有抗癌活性,在实验小鼠体内对S-180、U-14.ECA、L等瘤株均表现明显的抑制作用。苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱及其不同比例混合的A、B、C碱对S-180实体瘤均有不同程度的抑制作用,各单体生物碱的抑瘤率均在35%以上,经不同比例混合的C碱剂量在113mg/(kg·d)时,连续腹腔注射给药10天抑瘤率达61.38%,比总碱提高23.5%,与单纯苦参碱相比,有显着差异(P<0.01)。苦参碱对慢性粒细胞白血病外周多向造血祖细胞集落产生率有显着的抑制作用,抑制率达0.76,最佳抑制浓度为100mg/L。苦参水煎液作用于体外培养的人早幼粒白血病细胞,在剂量为8mg/ml时,可显着地诱导白血病细胞向单核巨噬细胞方向分化。4、升白作用氧化苦参碱可防止小鼠因MMC、环磷酰胺所致小鼠白细胞减少症,静脉注射或肌肉注射30mg/kg苦参总碱和100mg/kg氧化苦参碱对正常家兔外周血白细胞数有明显的升高作用,而且氧化苦参碱对正常家兔升白作用的显效时间、维持时间和白细胞计数峰值与苦参总碱相比,在给药后的18天内基本是一致的,升白效果优于鲨肝醇。在苦参总碱、氧化苦参碱、苦参碱对家兔X线600伦照射后引起的白细胞减少症的治疗实验中,苦参总碱组从给药5天后到第19天,白细胞计数基本保持在6000/mm3以上,而对照组直到22天才恢复上述水平;氧化苦参碱的升白效价不高于总碱,苦参碱则未见治疗效果。氧化苦参碱对家兔经60钴r-射线500伦全身照射后引起的白细胞减少症,剂量率为31伦/min,显示一定防治作用,在剂量率为120伦/min无防治作用。5、抗炎作用苦参碱对小鼠巴豆油引起的耳廓肿胀、醋酸引起的小鼠腹腔渗出增加、大鼠角叉菜胶性足垫肿胀,均有抑制作用。6、抗心律不齐作用苦参碱能对抗氯仿-肾上腺素诱发的猫室性纤颤;也对抗乌头碱诱发的大鼠心律失常及哇巴因诱发的豚鼠室性纤颤.对氯仿吸入所致的小鼠心室纤颤、乌头碱诱发的大鼠心律失常、氯仿-肾上腺素诱发的兔心律失常有明显对抗作用;苦参总黄酮并能对抗心肌细胞团自发及哇巴因诱发的搏动节律失常.此外,苦参有明显的利尿作用;苦参生物碱尚有安定、平喘、免疫抑制作用。7、平喘祛痰作用苦参碱主要是通过兴奋β受体,尤其是兴奋中枢的β受体,解除支气管痉挛及抑制抗体和慢反应物质的释放而产生平喘作用的。苦参碱在有钙或无钙克氏营养液中,均能对抗乙酰胆碱氯化钡兴奋离体豚鼠、大鼠气管和肠管的作用。苦参总碱、氧化苦参碱对组胺致喘豚鼠的平喘效果与氨茶碱基本相似,1小时平喘率都在90%以上,而对照组在15%左右;平喘时间上,氨茶碱在6小时平喘率是55%,苦参总碱则在80%以上。槐果碱Ach的致喘作用比氨茶碱强,其平喘作用可能是通过兴奋中脑的β-受体而起作用。酚红排泌法证明、小鼠灌胃苦参总碱、黄酮0.8g/kg,有明显祛谈作用。8、安定作用苦参总碱50-100mg/kg能明显抑制小鼠的自由活动;400mg/kg对小鼠被动活动明显抑制;100-200mg/kg能抑制孤独小鼠的欧斗攻击行为;苦参总碱25-40mg/kg与冬眠灵(5mg/kg)合用,可致小鼠翻正反射消失,100-200mg/kg苦参总碱能明显加强0.5mg/kg利血平对小鼠自发活动的抑制作用;苦参总碱50-200mg/kg与腹腔注射阈下剂量的戊巴比妥钠20-25mg/kg合用,可致小鼠入睡;分别与硫喷妥钠(腹腔注射,40mg/kg)、水合氯醛(腹腔注射,200mg/kg)合用,能显着加强其中枢抑制作用。亦能明显对抗中枢兴奋剂苯丙胺(腹腔注射,4-6mg/kg)及咖啡因(50mg/kg)所致的精神运动性兴奋;苦参总碱对士的宁及戊四氮所致的惊厥不但无对抗作用,反而使其惊厥增强和增加其动物死亡数;苦参总碱单独使用有轻度的镇痛作用,与阈剂量吗啡合用,可显着增加其镇痛百分率。9、抗过敏作用苦参碱可降低过敏介质的释放,为免疫抑制剂,其抑制50%T细胞增殖的浓度为0.55-0.56mg/ml;抑制IL-2产量的浓度为0.1mg/kg。10、免疫抑制作用苦参碱、氧化苦参碱在1/5LD50剂量下对小鼠免疫功能均有抑制作用。兔、大鼠肌肉注射氧化苦参碱150mg/kg或100mg/kg对被动或主动皮肤过敏反应均有明显抑制作用,并对兔血清IgE抗体形成有明显抑制作用。腹腔注射氧化苦参碱200mg/kg·d,共21天,对小鼠速发型变态反应引起的死亡有保护作用。11、其它作用肌肉注射氧化苦参碱能明显对抗巴豆油、角叉菜胶(大鼠)和冰醋酸(小鼠)诱发的渗出性炎症。兔灌胃、皮下注射、静脉注射、腹腔注射和肌肉注射苦参煎剂、苦参注射液及苦参碱均有利尿作用,尿中氯化钠量有显着增加。苦参50%甲醇浸膏具有抗盐酸乙醇所致的溃疡作用,其活性成分为苦参酮(Kurarinone)。此外,苦参碱体内外均有抗菌作用,体内作用强度与氯霉素相当,醇浸膏体外有抗滴虫作用,其强度与蛇麻子相近。二、苦参的主要成分、结构及生药材鉴定概述1、苦参的主要成分、结构国外早在30年代初苏联开始研究,国内开始于1972年,国内外研究的重点均放在生物碱上,目前国内自苦参植物中提取、分离、鉴定的生物碱主要有氧化苦参碱(oxymatrine,C15H24N2O2),苦参碱(Matrine,C15H24N2O),异苦参碱(Iosmatrine,C15H24N2O),羟基苦参碱(sophor-anol),槐果碱(Sophocarpine,C15H22N2O)、氧化槐果碱(N-oxysophocarpine,C15H22N2O2),槐胺碱、槐啶碱(Sophoridine,C15H24N2O)、苦豆碱(Aloperine),金雀花碱(sparteine),N-甲基金雀花碱(N-methylcytisine),安那吉碱(anagyrine),膺靛叶碱(bap-iifoline)、脱氢苦参碱(sophocarpine),d-苦参碱(d-Matrine),d-异苦参碱(d-isomatrine),d-氧化苦参碱(d-Oxymatrine),l-臭豆碱(l-Anagyrine),l-甲基金花碱(l-Methyleytisine),l-穿叶赝靛碱(Baptifoline),苦参啶(kurarid-in),槐醇(Sophoranol,C15H24N2O2),氧化槐醇碱(SophoranholN-oxide,C15H24N2O3),N甲基野靛碱(N-methylcytisine,C12H16N2O),等生物碱。黄酮类化合物:苦参所含黄酮类化合物多为二氢黄酮及二氢黄酮醇类,亦有黄酮,异黄酮,查尔酮等,从总黄酮分离的黄酮类化合物见下表:去甲苦参酮(降苦参酮,norkurarinone,C25H28O6)、苦参啶醇(kuraridinol),苦参醇(kurarinol),新苦参醇(neo-kurarinol),去甲苦参醇(norkurarinol),异苦参酮(isokurarinon,C26H30O6);高丽槐素(maackiain,C16H12O5);4-甲氧基高丽槐素(4-methoxy-maackiain,C17H14O6);三叶豆紫檀甙(trifolirhizin,C22H22O10);降脱水淫羊藿素(nor-anhydroicaritin,C20H18O6);槐属二氢黄酮B(sophoraflavanoneB,C20H20O5);芒柄花素(formoronetin,C16H12O4);黄腐醇(Xanthohumol),异黄腐醇(Isoxanthohunol),3,4`5-三羟-7-甲氧-8-异戊烯基山柰酚(3,4`5-Tri-7-Meth-8-prenylkeamferol;)等。茎、叶含木犀草素-7-葡萄糖甙(Luteolin-7-glucoside).脂肪酸和挥发油:从苦参中已鉴定出20种脂肪酸成份,主要为不饱和脂肪酸,其含量占脂肪酸总量的72.79%,其中亚油酸相对含量为48.95%,苦参挥发油已鉴定出47个成份。2、苦参的药材鉴定eq\o\ac(○,1)取该品横切片,加氢氧化钠试液数滴,栓皮即呈橙红色,渐变为血红色,久置不消失.木质部不呈现颜色反应.eq\o\ac(○,2)取该品粗粉1g,加含0.5%盐酸乙醇溶液20ml,加热回流1小时,滤过,滤液加氨试液使呈中性,蒸干,残渣加1%盐酸溶液1Oml使溶解,滤过,取滤液分置三支试管中,一管中加碘化铋钾试液,生成红棕色沉淀;一管中加碘化汞钾试液,生成黄白色沉淀;另一管中加碘化钾碘试液,生成棕褐色沉淀.eq\o\ac(○,3)取该品粉末0.5g,加甲醇10ml,加热回流10分钟,滤过.取滤液lml,置试管中,加镁粉少量与盐酸3~4滴,加热,显红色;另取滤液点于滤纸上,喷以5%三氯化铝乙醇溶液,晾干,置紫外光灯(254nm)下观察,显黄绿色荧光.eq\o\ac(○,4)取该品粉末0.5g,加氯仿25ml、浓氨试液0.3ml,放置过夜,滤过,滤液蒸干,残渣加氯仿0.5ml使溶解,作为供试品溶液.另取氧化苦参碱和槐定碱对照品,加乙醇制成每1ml各含0.2mg的混合溶液,作为对照品溶液.吸取上述两种溶液各4μ1,分别点于同一用2%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上,以本一丙酮一甲醇(8:3:0.5)为展开剂,展开,展距约8cm,取出,晾干,再以甲苯一醋酸乙酷一甲醇一水(2:4:2:1)10℃以下放置后的上层溶液为展开剂,展开,展距同上,取出,晾干,依次喷以碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇试液.供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同的两个橙色斑点。第二节甘草甘草酸甘草酸 甘草(学名:Glycyrrhizauralensis),又名乌拉尔甘草,多年生草本植物,属豆科。是一种补益中草药。药用部位是根及根茎,药材性状根呈圆柱形,长25~l00cm,直径0.6~3.5cm。外皮松紧不一,表面红棕色或灰棕色。根茎呈圆柱形,表面有芽痕,断面中部有髓。气微,味甜而特殊。功能主治清热解毒,祛痰止咳、脘腹等。喜阴暗潮湿,日照长气温低的干燥气候。甘草多生长在干旱、半干旱的荒漠草原、沙漠边缘和黄土丘陵地带。根和根状茎供药用。一、甘草的主要药理作用概述西医药理发现,甘草剂有抗炎和抗变态反映的功能,因此在西医临床上主要作为缓和剂。缓解咳嗽,祛痰,治疗咽痛喉炎;甘草或甘草次酸有去氧皮质酮类作用,对慢性肾上腺皮质功能减退症有良好功效;甘草制剂能促进胃部粘液形成和分泌,延长上皮细胞寿命,有抗炎活性,常用于慢性溃疡和十二指肠溃疡的治疗;甘草的黄酮具有消炎、解痉和抗酸作用;甘草也是人丹的主要原料之一。甘草还广泛应用于食品工业,精制糖果、蜜饯和口香糖。甘草浸膏是制造巧克力的乳化剂,还能增加啤酒的酒味及香味,提高黑啤酒的稠度和色泽,制作某些软性饮料和甜酒;香烟矫味。在化工、印染工业中,甘草也广有用途。1、对消化系统的作用除去甘草甜素的浸膏及甘草中黄酮甙类对大鼠实验性溃疡有明显保护作用。2、肾上腺皮质激素样作用甘草浸膏、甘草甜素及甘草次酸对健康人及动物都有促进钠,水潴留的作用;小剂量甘草甜素(每只100ug)能使大鼠胸腺萎缩及肾上腺重量增加,产生糖皮质激素可的松样作用。大剂量时则糖皮质激素样作用不明显,只呈现盐皮质激素样作用。3、解毒作用甘草浸膏及甘草甜素对某些药物中毒、食物中毒、体内代谢产物中毒都有一定的解毒能力。解毒作用的有效成份为甘草甜素,解毒机制为甘草甜素对毒物有吸附作用,甘草甜素水解产物葡萄糖醛酸能与毒物结合,以及甘草甜素有肾上腺皮质激素样作用,增强肝脏的解毒能力等方面因素综合作用的结果。4、止咳平喘作用甘草次酸有明显的中枢性镇咳作用,大剂量的甘草次酸可使小鼠呼吸抑制。此外甘草甜素、甘草次酸盐尚有抗炎症及抗过敏、抗肝损伤、抗促癌、抗菌、抗艾滋病毒(甘草甜素)作用。5.调节机体免疫功能,抗心律失常二、甘草的主要成分、结构及药材鉴定概述1、甘草的主要成分、结构甘草的主要成分含甘草甜素(glycyrrhizin)、甘草酸(glycyrrhinicacid)、甘草次酸(glycyrrheticacid,glycyrrhetinicacid)、甘草黄甙(甘草甙,liquiritin)、甘草素(liquiritigenin)、甘草苦甙(glycyamarin)、异甘草黄甙(iso-liquiritin)、二羟基甘草次酸(dihydroxyglycyrrheticacid,即grabricacid)、甘草西定(licoricidin)、甘草醇(glycyrol)、5-0-甲基甘草醇(5-0-methylglycerol)、异甘草醇(iso-glycyrol)。2、甘草的药材鉴定eq\o\ac(○,1)取本品粉末置白瓷板上,加80%(V/V)硫酸数滴,显黄色,渐变橙黄色(甘草甜素反应)。eq\o\ac(○,2)薄层层析样品液:取本品粉末1g,加乙醚40ml加热回流1小时,过滤,药渣加甲醇30ml加热回流1小时,过滤,滤液蒸干,残渣加水40ml使溶解,用水饱和的正丁醇提取3次,合并提取液,用水洗涤3次后,蒸干,残渣加甲醇2ml溶解。对照品液:甘草酸加甲醇制成每1ml含2mg的溶液。展开:硅胶G薄层板,点样5(l,以酯酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(30∶2∶2∶4)为展开剂,展距8cm。显色:以硫酸乙醇液喷雾,105℃加热,在紫外灯(365nm)下检视,供试品溶液色谱在与对照品溶液色谱的相应位置上,显相同颜色的斑点。第三节苦参和甘草配伍研究的意义根据病情需要和药性特点有选择地将两种或两种以上的药物配合在一起应用。最初治疗疾病多采用单味药物。随着药物品种的日益增多,对药性特点的不断明确,用药也由简到繁,出现了多种药物配合应用的方法。配伍既能照顾复杂病情,又可增强疗效,减少毒副作用,因而被广泛采用。西汉时期的<神农本草经>最早总结了中医配伍用药的规律,指出:“有单行者,有相须者,有相使者,有相畏者,有相恶者,有相反者,有相杀者,凡此七情,合和时视之。”除单行是指单用一味药治病外,相须、相使、相畏、相杀、相恶和相反都属药物配伍应用的范畴。苦参和甘草分别对乙肝病毒都有很好的疗效,但是单独使用效果不理想,因此配伍使用是以后的研究趋势,本文从研究配伍之后的主要成分变化为着眼点进行相应研究,具有重要意义。第四节本章小结本章主要对苦参和甘草的主要药理作用、主要成分、结构及药材鉴定概述、苦参和甘草配伍研究的意义进行详细说明,让读者对苦参、甘草及其配伍有了初步的认识,说明了配伍研究的重要意义和研究趋势。第二章甘草酸和苦参碱的制备方法学研究第一节甘草酸的提取、精制方法学研究HYPERLINK一、先加酸水提法称10.0g甘草粉,加蒸馏水或自来水500ml,一定温度下热提,然后离心,滤渣重复热提二次,合并三次离心上清液,抽滤除去少量浮渣,控温8℃,于旋转蒸发仪中减压浓缩至400ml,甘草酸水提浓缩液加入一定量的酸,静置,离心,0℃冰水淋洗至pH5~6,干燥,得甘草酸粗品,称重,计算,得甘草酸粗品得率。以甘草酸粗品得率较高为选择指标,进行单因素验,依次确定以下6个提取参数:热提水温、热提时间、热提次数、加酸量、静置时间、甘草等级。HYPERLINK二、先加醇水提法在甘草酸水提浓缩液中加入200ml无水乙醇,静置1h,离心,将离心上清液旋转蒸发浓缩至稠膏状,加1%稀氨水200ml使之复溶,再加6%稀盐酸100ml,静置2h离心,0℃冰水洗至Ph5~6,冷冻干燥,得甘草酸粗品,称重,计算甘草酸粗品得率。HYPERLINK三、稀氨水提取法甘草片烘干,粉碎,称粉100g,加入稀氨水500ml,控温100℃热提1.5h,离心,滤渣重复提取二次,合并三次离心上清液,抽滤,控温8℃于旋转蒸发仪中减压浓缩至400ml,加6%稀盐酸200ml,静置20h,离心,0℃冰水淋洗至pH5~,冷冻干燥,称重,计算甘草酸粗品得率。HYPERLINK四、无水乙醇提取法甘草片烘干,粉碎,称粉100g,加无水乙醇500ml,控温70℃加热提取1.5h,离心,滤渣重复提取二次,合并三次离心上清液,抽滤控温80℃,于旋转蒸发仪中减压浓缩,真空干燥,称重,计算甘草酸粗品得率。HYPERLINK五、氨性无水乙醇提取法甘草片烘干,粉碎,称粉100g,加无水乙醇500ml、25%~28%氨水20ml,控温70℃加热提取1.5h,离心,滤渣重复提取二次,合并合并三次离心上清液,抽滤控温80℃,于旋转蒸发仪中减压浓缩,真空干燥,称重,计算甘草酸粗品得率。HYPERLINK六、重结晶法精制甘草酸称甘草酸粗品5g,加50%乙醇溶液(70℃)200ml,搅拌均匀后静置2h,离心,抽滤,滤液活性碳脱色后转移至旋转蒸发仪,控温80℃减压浓缩至快干,转移到小烧杯中,冷冻干燥,称重,计算甘草酸精品得率。七、二次沉淀法精制甘草酸称甘草酸粗品5g,加50%乙醇溶液(70℃)20mL,搅拌均匀后静置24h,离心,抽滤,滤液脱色后转移至旋转蒸发仪,控温80℃减压浓缩至稠膏状,复水至200mL,如有不溶物可水浴加热,并加数滴氨水,加6%稀盐酸50mL,静置8h,离心,O℃冰水洗至pH5-6,冷冻干燥,称重,计算甘草酸精品得率。八、静态吸附法树脂的活化加入树脂体积0.4倍的50%乙醇溶液,浸泡24h。将树脂置于抽滤装置中,用50%乙醇溶液洗至流出液不呈白色浑浊,并以水洗净乙醇。加5%稀盐酸,浸泡2~4h,然后用水洗至pH中性。加2%NaOH溶液,浸泡2-4h,然后用水洗至pH中性。称5g二次沉淀法所得的甘草酸精品,加热使之溶于1000mL水中,使甘草酸溶液与AB-8树脂(500g)混合,静态吸附2h,四层纱布过滤,抽滤,滤液旋转蒸发浓缩至100mL,加6%HCl20mL,观察有无白色沉淀产生。滤渣(AB-8树脂)用500mL50%乙醇搅拌下洗脱2h,洗脱液旋转蒸发至于,称重,计算此次精制的得率。苦参碱的提取、精制方法学研究HYPERLINK一、溶剂提取法苦参碱的溶剂提取法,常用水、酸水及乙醇等作为提取溶媒,提取方法多为浸渍、渗漉、煎煮、回流等经典方法。孔令明[1]从酸水回流提取、乙醇回流提取两大苦参总碱方法的对比中发现,乙醇回流法在保证较高的苦参碱得率的情况下,出膏率相对较低,综合比较发现,乙醇回流法对苦参总碱的提取效果较好,是一种目前较为合适的苦参总碱溶剂提取方法。其最佳工艺参数为:采用筛分目数20~60目的苦参粉,以60%的乙醇溶液,料液比为1:2,回流提取2次。谭桂莲[2]分别对水煎法、乙醇回流法和渗滤法提取氧化苦参碱工艺进行优选研究,结果表明,渗滤法所得浸提物中,氧化苦参碱含量明显高于水煎法和乙醇回流法,故认为渗滤法为氧化苦参碱的最佳提取方法。选择浸泡时间、乙醇浓度、溶剂用量、流速4个因素,每因素3水平,用L9(34)正交表进行实验设计,以氧化苦参碱的含量为考核指标。结果分析:根据各因素的影响来看,其影响大小顺序是乙醇浓度>溶剂用量>浸泡时间>流速。因此,可推断最佳工艺为加倍量65%乙醇,浸泡24h渗滤,流速为5ml/min.表面活性剂有降低表面张力及增溶作用。在提取剂中加人表面活性剂,一方面相互聚形成胶束,从而增加了提取剂对药材的浸提能力;另一方面可降低提取剂与药材间的界面张力,促进润湿,在胶束作用下有效成分易被解吸、提取。应用表面活性剂于苦参碱的提取,一般选用毒性相对较小,对皮肤刺激性较低的非离子型表面性剂吐温类。鲁传华[3]等以多种浓度的乙醇、稀盐酸溶液、胶束分散系及水为提取溶剂,常温浸渍法提取苦参中苦参碱,考察表面活性剂吐温的水及醇溶液正向胶束体系提取苦参碱的效率。结果表明,含有表面活性剂的提取剂能更快地达到最大提取量,提高生产率。李晓梅[4]在提取溶剂(水或乙醇)中分别加人吐温20或吐温80提取苦参碱,以苦参碱含量为考核指标,考察非离子型表面活性剂在苦参碱提取中的实际应用价值。结果表明,在苦参碱提取中应用吐温20和吐温80,可以降低药材与溶剂之间的表面张力,增加药材中细胞渗透性,使溶剂最大限度地溶解或增溶药材中有效成分,显著增加参碱提取率,降低成本,提高经济效益。HYPERLINK二、离子交换法利用生物碱盐通过强酸型阳离子交换树脂柱,使生物碱盐阳离子交换在树脂上,而非生物碱化合物则流出柱外,将交换后的树脂晾干,用氨水碱化,氯仿提取的原理。高拴平等[5]图研究了离子交换法提取分离苦参碱的工艺过程,技术路线是:苦参粉—甲醇回流提取—回收溶剂粗提物—稀硫酸溶解脱脂一水—除揉一201型阳离子交换树脂一碱化树脂一氯仿提取—回收溶剂叶脱水一丙酮一苦参碱结晶。采用上述提取分离方法,苦参碱的产率高,结晶质量好。张存莉等[6]采用不同浓度的乙醇和阳离子交换树脂对苦参碱进行提取和纯化,并对不同的苦参碱纯化工艺进行比较和研究。结果表明,用的乙醇进行提取和用阳离子交换树脂进行纯化的工艺过程,生物碱收率较高,生产成本较低,工序较为简单,适宜工业化生产。HYPERLINK三、树脂吸附法 吸附树脂是近十多年来发展起来的一类有机高分子聚合物,它具有物理化学稳定性高、吸附选择性独特、不受无机物存在的影响、再生简便、解吸条件温和、使用周期长、宜于构成闭路循环、节省费用等诸多优点。因此,它被广泛应用于中草药有效成分的提取分离。田成旺等[7]以大孔吸附树脂对苦参碱溶液的吸附行为为研究对象,采用分光光度法进行苦参碱浓度的测定,并由此用来研究苦参碱在01树脂上吸附平衡与吸附动力学规律,为利用01大孔树脂吸附苦参碱提供了可靠的实验数据和操作经验,从而为大孔吸附树脂应用于苦参碱的提取分离奠定了基础。高红宁等[8]考察微滤一大孔树脂法精制苦参中氧化苦参碱、苦参总黄酮的效果,并与水提醇沉法进行了比较,应用微滤膜进行处理后,再上AB一8大孔吸附树脂柱。结果显示微滤和大孔树脂吸附联用处理的氧化苦参碱、苦参总黄酮的保留率优于醇沉法微滤一大孔树脂法处理的固形物去除杂质效果优于醇沉法。可见微滤一大孔树脂法较醇沉法能更有效地保留有效成分、去除杂质。HYPERLINK四、超临界流体萃取技术超临界流体苹取技术超临界流体萃取技术是近年来发展起来的新型提取分离技术,目前在中药有效成分方面的应用日益扩大。尽管超临界流体萃取对生物碱类成分较难提取,或提取率较低,但通过优选适宜的夹带剂,即可解决难提取及提取率低的问题。葛发欢等[9]对采用超临界CO2流体提取苦参碱进行大量的研究,探讨了超临界CO2流体提取中,非离子表面活性剂吐温80、司盘80的多元醇混合体系对萃取苦参碱的影响。采用一次加料,一级萃取,二级分离,超临界连续流动,萃取过程按一定速率注人夹带剂的方式。作者根据研究结果推测非离子表面活性剂的多元醇混合体系在超临界流体中可能形成类似微乳体系,此微乳体系的形成与表面活性剂浓度以及多元醇、比例等因素有直接关系。刘喆等[10]对超临界流体萃取苦豆子中氧化苦参碱进行验证实验。选择氨水作为碱化剂,选择42MPa为CO2的萃取压力,以乙醇为夹带剂,选取4种浓度的乙醇溶液作为夹带剂分别进行实验,以67%浓度的乙醇作为夹带值的提取率均高于以其他3种浓度碱提取率。结果表明,用该方法在选定条件下,氧化苦参碱的提取率为4%~5%,其各项数值均优于传统的回流萃取法,充分显示了超临界CO2流体萃取先进性。本章小结 eq\o\ac(○,1)甘草酸粗提的众多方法中,先加酸水提法和稀氨水提取法较适工业生产,而氨性无水乙醇提取法较适合实验室提取高纯度甘草酸。这几种提取方法提取所得甘草酸粗品g依次为8.27g/100g甘草粉、10.2lg/100g甘草粉、10.75g/100g甘草粉。eq\o\ac(○,2)在甘草酸提取的众多影响因素中,存在显著性差异的是提取温度、加酸量、提取次数、提取时间和甘草等级。静置时间对甘草酸提取的影响是存在差异,但不存在显著差异。甘草酸提取影响因素的最优选择为:提取温度为100oC、加酸量为10mL(pH=1)、提取次数为3次、提取时间为1.5h、静置时间为20h。eq\o\ac(○,3)甘草酸精制方法中,重结晶法得率为65%,纯度为73%(比色法);二次沉淀法得率为50.6%,纯度为80%(比色法);如用AB-8树脂对二次沉淀法精品进一步进行精制,可得纯度为85%(比色法)的精品。eq\o\ac(○,4)苦参碱是传统中草药苦参、苦豆子的主要活性成分,是一类具有广泛应用前景和巨大开发价值的中药,目前,对苦参的研究有了一定基础,但在提取工艺和制剂研究方面,还处于较低水平,苦参制剂品种较混乱,存在过多过杂的问题。需应用现代提取分离技术,提高分离效果并节约能源对苦参碱的现有制剂进行现代化改良,进一步加大研究和开发力度,研究新型的制剂以适应各种的疾病的需要,提高其科技含量,将有助于提高其疗效。第三章HYPERLINK苦参与甘草配伍研究HYPERLINK第一节材料与设备1、药品与试剂未炮制甘草粗粉:市售一级品北碚文戈化工产品经营部苦参碱标准品:中国药品生物自制制品鉴定所苦参:购自药材市场无水乙醇:重庆川东化工有限公司氨水:重庆川东化工有限公司蒸馏水:重庆邮电大学药学院实验室氯仿:重庆川东化工有限公司溴麝草酚兰pH=7.6缓冲液:精确称取溴麝草酚兰0.125g,加入到依式子“65.0X+435.0Y+水=1000mL,X:0.2mol/L的磷酸二氢钠,Y:0.2mol/L的磷酸氢二钠”配制的溶液中,振摇。以上所用试剂均为分析纯度。2、主要仪器与设备旋转蒸发器R201D-ⅡUV-7504紫外-可见分光光度计:上海欣茂仪器有限公司;DF-101S磁力搅拌器:金坛市岸头国瑞实验仪器厂;HHS数字恒温水浴锅:天津华北实验仪器有限公司;FA1004电子天平:上海恒平科学仪器有限公司;NOKIA1200计时器:北京诺基亚制造厂。HYPERLINK第二节甘草酸的提取1、甘草酸的提取甘草粗粉100g加12倍水(1200ml),煎煮3次,合并煎煮液,离心,含甘草酸离心液,浓缩,浓缩液中加入200mL无水乙醇,静置1h,离心,将离心上清液旋转蒸发浓缩至稠膏状,加1%稀氨水200mL使之复溶,再加6%稀盐酸100mL,静置20h离心,0℃冰水洗至pH5-6,冷冻干燥,得甘草酸粗品,称重计算甘草酸粗品得率。甘草酸的精制(AB-8树脂法)(1)树脂的活化加入树脂体积0.4倍的50%乙醇溶液,浸泡24h。将树脂置于抽滤装置中,用50%乙醇溶液洗至流出液不呈白色浑浊,并以水洗净乙醇。加5%稀盐酸,浸泡2~4h,然后用水洗至pH中性。加2%NaOH溶液,浸泡2-4h,然后用水洗至pH中性[11]。(2)精制 称5g二次沉淀法所得的甘草酸精品,加热使之溶于1000mL水中,使甘草酸溶液与AB-8树脂(500g)混合,静态吸附2h,四层纱布过滤,抽滤,滤液旋转蒸发浓缩至100mL,加6%HC120mL,观察有白色沉淀产生。滤渣(A一8树脂)用500mL50%乙醇搅拌下洗脱2h,洗脱液旋转蒸发至于,称重,计算此次精制的得率[12]。HYPERLINK第三节苦参碱的提取一、最大吸收波长的选择精确称取苦参碱标准品250mg,置于25mL容量瓶中,用无水已醇定容,摇匀。精密吸取标准品溶液4.0mL,置于10mL容量瓶中,用无水已醇稀释至刻度线,摇匀。再吸取稀释液2mL于三角烧瓶中,加5mLpH=7.6的溴麝草酚兰缓冲溶液和10mL氯仿,密塞,振摇2min,移入50mL分液漏斗中,静置30min,分出氯仿层于具塞比塞管中。空白试剂以2mL无水乙醇代替标准品稀释液,其他步骤同上。将所制得的药剂置入紫外-可见分光光度计中,测定其不同波长的吸光度。重复3次,求其平均值。二、标准曲线绘制精确称取苦参碱标准品250mg,置于25mL容量瓶中,用无水已醇定容,摇匀。分别精密吸取标准品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL,置于10mL容量瓶中,用无水已醇稀释至刻度线,摇匀。再分别吸取稀释液2mL于5个三角烧瓶中,各加5mL的pH=7.6的溴麝草酚兰缓冲溶液和10mL氯仿,密塞,振摇2min,移入50mL分液漏斗中,静置30min,分出氯仿层于具塞比塞管中。空白试剂以2mL无水乙醇代替标准品稀释液,其他步骤同上。将所制得的药剂置入紫外-可见分光光度计中,测定其在特定波长的吸光度。重复3次,求其平均值。三、样品的测定精确取样品提取液2mL,加5mLpH=7.6的溴麝草酚兰缓冲溶液和10mL氯仿,密塞,振摇2min,移入50mL分液漏斗中,静置30min,分出氯仿层于具塞比塞管中。在波长410nm处测定苦参碱的A值。重复3次,取其平均值。根据标准曲线方程求出提取物中苦参碱的含量,按下面方法计算苦参碱得率。苦参碱得率=苦参碱质量/苦参质量×100%第四节苦参与甘草配伍研究(1:1、2:1、1:2)1、苦参碱与甘草酸配比为1:1取1g苦参粉、1g甘草粉,分别加入10倍水(10ml),煎煮1h,合并煎煮液离心,将离心上清液旋转蒸发浓缩至稠膏状,加入50ml氯仿提取苦参碱,将所制得的苦参碱提取液加入100ml无水乙醇,在波长410nm处测定苦参碱的A值。重复3次,求其平均值。2、苦参碱与甘草酸配比为2:1取2g苦参粉、1g甘草粉,分别加入10倍水(10ml),煎煮1h,合并煎煮液离心,将离心上清液旋转蒸发浓缩至稠膏状,加入50ml氯仿提取苦参碱,将所制得的苦参碱提取液加入100ml无水乙醇,在波长410nm处测定苦参碱的A值。重复3次,求其平均值。3、苦参碱与甘草酸配比为1:2取1g苦参粉、2g甘草粉,分别加入10倍水(10ml),煎煮1h,合并煎煮液离心,将离心上清液旋转蒸发浓缩至稠膏状,加入50ml氯仿提取苦参碱,将所制得的苦参碱提取液加入100ml无水乙醇,在波长410nm处测定苦参碱的A值。重复3次,求其平均值。本章小结本章首先对甘草粗粉采用水提法进行煎煮,煎煮液浓缩,甘草酸水提浓缩液中加入200mL无水乙醇,静置1h,离心,将离心上清液旋转蒸发浓缩至稠膏状,加1%稀氨水200mL使之复溶,再加6%稀盐酸100mL,静置20h离心,0℃冰水洗至pH5-6,冷冻干燥,得甘草酸粗品,称重计算甘草酸粗品得率,并用大孔吸附树脂法进行精制甘草酸。对苦参粗粉采用水提法进行煎煮,煎煮液浓缩,精确苦参碱浓缩液2mL,加5mLpH=7.6的溴麝草酚兰缓冲溶液和10mL氯仿,密塞,振摇2min,移入50mL分液漏斗中,静置30min,分出氯仿层于具塞比塞管中。在波长410nm处测定苦参碱的A值。重复3次,取其平均值。根据标准曲线方程求出提取物中苦参碱的含量,计算出苦参碱得率。最后将苦参碱和甘草酸按照1:1、2:1、1:2三种不同的比例进行煎煮20分钟,通过紫外分光光度法研究配伍之后的苦参碱的变化。HYPERLINK实验结果第一节甘草酸的提取结果方法粗提取(醇提法)精提取(AB-8树脂法)得率3.65%64%纯度75%73%第二节苦参碱标准品曲线一、苦参碱的最大吸收波长选择表1.苦参碱的最大吸收波长选择波长(nm)吸光度(A)平均值(A)3800.5550.4350.3770.4563900.6790.4600.3760.5053950.6940.4740.3640.5114000.6900.5040.3610.5184100.6970.5250.3680.5304150.6800.5060.3640.517图1.苦参碱的最大吸收波长选择二、标准曲线绘制表2.苦参碱的标准曲线绘制浓度(μL/mL)吸光度(A)平均值(A)10.2240.2330.2320.23020.3790.3720.3590.37030.5010.4620.4530.47240.6110.5930.5810.59550.8060.7270.7070.747图2.苦参碱的标准曲线绘制由图1可知,苦参碱与溴麝草酚兰反应物在波长410nm处有最大吸收,与文献报道基本一致,故选择410nm为测定波长。继续在410nm处测定各个浓度的吸光度,以浓度(μL/mL)为横坐标,吸光度(A)为纵坐标,得回归方程为:Y=0.1259X+0.1051,R2=0.9960(见图2)。苦参碱样品的测定表3.苦参碱样品的测定吸光度(A)平均值(A)含量(%)1.6921.5681.5571.6065.085第三节苦参与甘草配伍研究(1:1、2:1、1:2)表4.苦参与甘草配伍研究比例吸光度(A)平均值(A)含量(%)苦参碱:甘草酸=1:11.7901.8181.8271.8115.723苦参碱:甘草酸=2:12.3422.3392.3372.3397.404苦参碱:甘草酸=1:22.33623342.3172.3297.3712:11:21:12:11:21:1图3.甘草与苦参配伍苦参碱吸光度研究图HYPERLINK4.甘草与苦参配伍苦参碱得率研究由图3、图4可知,苦参碱含量较配伍前呈上升趋势,且苦参碱与甘草酸配比2:1时,得率最高。HYPERLINK第四节本章小结本论文对甘草酸采用醇提法法进行粗提取,再采用AB-8树脂法进行精提取,结果为:醇提法得率为3.65%,纯度为75%;AB-8树脂法得率为64%,纯度为73%。对苦参碱采用紫外可见分光光度法测得苦参碱与溴麝草酚兰反应物在波长410nm处有最大吸收,与文献报道基本一致,故选择410nm为测定波长。再通过对苦参与甘草的配伍研究考查苦参碱的变化,结果为:苦参碱与甘草酸配比1:1时,得率为2.563%;对苦参碱与甘草酸配比2:1时,得率4.239%;苦参碱与甘草酸配比1:1时,得率为4.206%。可知苦参碱含量较配伍前呈上升趋势,且苦参碱与甘草酸配比2:1时,得率为最高。结束语经过两个多月的实验,在老师和同学的帮助下。我对甘草酸和苦参碱的制备及配伍以及药理作用有了进一步的了解。整个实验过程包括四个部分:一是相关文献资料的查询;二是甘草酸的提取;三是苦参碱的提取;四是甘草酸苦参碱的配伍研究。该实验基本完成了设计课题的要求,同时得到结果:本次试验对甘草粗粉采用水提法进行煎煮,煎煮液浓缩,甘草酸水提浓缩液中加入200mL无水乙醇,静置1h,离心,将离心上清液旋转蒸发浓缩至稠膏状,加1%稀氨水200mL使之复溶,再加6%稀盐酸100mL,静置20h离心,0℃冰水洗至pH5-6,冷冻干燥,得甘草酸粗品,称重计算甘草酸粗品得率,并用大孔吸附树脂法进行精制甘草酸。对苦参粗粉采用水提法进行煎煮,煎煮液浓缩,精确苦参碱浓缩液2mL,加5mLpH=7.6的溴麝草酚兰缓冲溶液和10mL氯仿,密塞,振摇2min,移入50mL分液漏斗中,静置30min,分出氯仿层于具塞比塞管中。在波长410nm处测定苦参碱的A值。重复3次,取其平均值。根据标准曲线方程求出提取物中苦参碱的含量,计算出苦参碱得率。最后将苦参碱和甘草酸按照1:1、2:1、1:2三种不同的比例进行煎煮20分钟,通过紫外分光光度法研究配伍之后的苦参碱的变化。发现苦参与甘草配伍之后,主要成分苦参碱发生了变化,含量较配伍前呈上升趋势,且苦参碱与甘草酸配比2:1时,得率最高。苦参和甘草分别对乙肝病毒都有很好的疗效,但是单独使用效果不理想,因为配伍使用含量呈上升趋势,故配伍使用将成为苦参碱的使用趋势。
致谢四年的大学生活将随着本研究课题的结束,也将画上一个圆满的句号。在整个课题研究过程中,学院的老师和同学们给了我很大的帮助和鼓励,首先在这里我要特别的感谢重庆邮电学院生物信息学院为我提供了良好的学习环境,让我有了一个能够展现自我的舞台,其次我在这里要感谢的是在整个设计过程中给予我最大帮助的王允老师,整个设计以及整篇论文都是在王允老师的悉心指导下完成的,在这里我向你表示由衷的感谢,谢谢你这三个月以来对我无私的帮助,使我不仅仅对专业知识有了更深的理解和掌握,提高了实验动手能力,更对我今后人生态度、人生目标有了更清晰和明确的认识。此次毕业设计是我大学里最后一次作业,也是今后走上工作岗位的踏板,有了这次的毕业设计经历,相信对自己今后的前途和发展也是大有裨益的。最后,由于本人水平有限,论文中难免有疏漏和错误之处,恳请各位老师和同学批评指正。
参考文献[1]孔令明,章臣桂,金兆祥,等苦参总碱提取条件的优化研究[J].新疆农业大学学报,2004,27(3):37.[2]谭桂莲,秦邦才.中药苦参提取方法的比较和工艺条件优化[J].时珍国医国药,2006,17(1):74[3]鲁传华,谢冬梅,邹爱峰,等.正向胶束法提取苦参总碱及比较分析研究[J].中医药学刊,2003,21(9):1444.[4]李晓梅.非离子表面活性剂在苦参碱提取中的应用[J].山西化工,2004,24(3):30.[5]高拴平,原春兰,官晓成,等.从苦参中提取苦参碱的研究[J].化学工业与工程,2001,18(6):414[6]张存莉,马惠玲,张宏利,等.苦参生物碱工业生产新方法的探究[J],西北林学院学报,2004,10(1):112.)[7]田成旺,秦学功,高瑞叔,等.大孔树脂吸附苦参碱过程的研究[J].离子交换与吸附,2002,18(5):406.[8]高红宁,金万勤,郭立玮.微滤一大孔树脂法与醇沉法精制苦参中氧化苦参碱和苦参总黄酮的比较研究[J].广西中医学院学报,2003,6(3):53.[9]葛发欢,黄星,谭晓华,等.非离子表面活性剂对超临界CO2从苦参中萃取苦参碱类有影响[J].中药材,2002,6(6):426[10]刘喆,缪珊,王剑波,等.超临界流体萃取苦豆子中氧化苦参碱及其含量测定[J].中国新医药,2001,17(8):149.[11]冯福盛,等.吸附树脂AB一8对甘草酸的吸附性能及其在提取纯化中的应用[J].天然产物研究与开发,1997,10(1).[12]Yuhua,ChenFang.StudyonthePrimaryProcessofGlycyrrhizicAcidExtractingfromGlycyrrhiza(J).SichuanEntry-ExitInspectionandQuarantingBureauofP.R.1975,23(11):2560.[13]MihirKantiChaudhurl,SanjayKumarDehury,SiddharthaSankarDhar.Processformakingmetalacetylacetonates[P].US7282573B2,2007.[14]A.Uenoetal.StudiesonLupinAlkaloidsVI.Isolationandstructureof(+)-Isomatrine[J].Chem.Parma.Bull.1975,23(11):2560.[15]Mary,J.R.InfluencesofDifferentMolecularConformationsofDirithromycinonAntibacterialActivityinVitro1006—4931(2008)03—0016—02附录一、英文原文StudyonthePrimaryProcessofGlycyrrhizicAcidExtractingfromGlycyrrhizaYuhua1ChenFang2*(1.SichuanEntry-ExitInspectionandQuarantingBureauofP.R.China,SichuanChengdu,610041;2.SchoolofPharmaceuticalsciences,SouthwestUniversity,Chongqing,400715,China)Abstract:GlycyrrhizinextractionofRadixGlycyrrhizaisoneofthekeytechnologiesofthedevelopmentandapplicationofRadixGlycyrrhiza.ThispaperusedRadixGlycyrrhizaastherawmaterials,ethanolassolvents,andusedultrasound-assistedextractionfromglycyrrhiza,thendidresearchonafewfactorsintheimpactofultrasoundundertheconditionsoftheextractionrateincludingtheamountofsolvent,solventconcentration,ultra-dosetime,soakingtime,sizeandotherfactors.Atlast,itgotasimple,time-saving,high-yield,highpurityandgoodselectiveprocess.Thebestextractionprocessisasfollows:itusestheconcentrationof70percentethanolasthebestsolventextraction;theroleofultrasoundtimeis60minute;thetimeofsoakingis2hours;theheadsizewas50.Throughthisprocess,extractingtimeisshorterthanthetraditionalextractionprocess,andtheyieldofglycyrrhizinhasincreased.Keywords:GlycyrrhizicAcid;Orthogonalexperimentaldesign;Supersonicwave;Extractionprocess;1.ForewordFigure1glycyrrhizicacidstructureschematicdrawingLicoriceisalegumelicorice,GlycyrrhizainflateorGlycyrrhizaglabradriedrootsandrhizomes,withdetoxification,coughexpectorant,spleenandstomach,toreconciletheefficacyofvariousdrugs,areregardedasanimportantancientherbalmedicines.Licoriceacidasitsmainactiveingredient,isalsodifferentwithdifferentcontentsoforigin,usuallywithin(4to14)%ofitbelongstriterpenoidsaponins,licoricerootandrhizomecontainglycyrrhizin,licoriceacid,potassium,calcium.Accordingtoavailabledatareportedfromabroadwereisolatedmorethan100kindsoflicoriceflavonoids,morethan60kindsoftriterpenoidsandcoumarin,avarietyofalkaloids.Intheextractionprocessrequirestheextractionofglycyrrhizininrapid,complete,andlessimpurities.ExtractionofactiveingredientsoftraditionalChinesemedicine,nomatterwhattechnology,choiceofsolventextractionisveryimportant.Solventextractionofglycyrrhizinselected,HOUArmythroughmathematicalmodels,derivedusingasinglesolventextractionwhentheaverage60%??ethanolextractmaximum.Xiefruitalsoconfirmedthattheuseofethanol,acetoneandammoniabetterthanth
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