医院细胞遗传室各类仪器设备标准操作规程

3.53.5水纯化装置医院细胞遗传室各类仪器设备标准操作规程目的规范各类仪器的正常使用和保养，延长仪器的使用寿命，确保各结果的准确性。仪器使用环境：1）无灰尘、通风环境良好。2）避免阳光直射。3）室内温度18〜30C,变化不超过±2c4）室内湿度2〜80%RH。5）电源电压变化再20V±10V之内，5m内不能有配电器。3使用仪器程序超净工作台超净工作台是目前实验室内普遍应用的无菌操作装置，在超净工作台内进行无菌操作，可明显地减少细菌污染的机会。超净工作台的工作原理是利用鼓风机驱动空气，通过高效空气微粒滤层净化，使操作范围形成无菌环境。CO2培养箱实验室一般应置备二台CO2培养箱，将来自同一标本的培养瓶分两线放入不同的培养箱内培养，以保证细胞培养的成功率。 CO2培养箱常见的是隔水式培养箱。培养的细胞需要一个恒定的温度，过低或过高的环境温度均可导致细胞死亡，因此对培养箱的灵敏度要求在±0.5℃。此外，一定浓度的CO也是细胞培养所必需的。 CO培养箱可恒定地提供细胞所需的CO（通常是5%），使培养液的pH值保持稳定，适用于开放性培养。使用时应注意每三个月定期校正，如有异常应及时调整。培养箱内空气必须保持清洁，应定期用酒精擦拭消毒，消毒时每层隔板均需洗刷干净，并用 75％酒精纱布擦拭。每周定期更换箱底水盘中的水，以保持相对湿度。为防污染可在水盘内加入 1%。新洁尔灭。箱内高效空气过滤器堵塞时，指示灯提示后需及时更换烤箱烤箱用于玻璃器皿的烘干和干热灭菌，一般以 650mm<500mm<500mm勺比较适用。烤箱都装有豉风装置， 豉风与升温同时开始。干热灭菌物品时一般为 180℃维持 1.5h，灭菌后应待箱内温度下降至80℃时方可开门，以免骤冷而致玻璃器皿损坏。应注意的是橡皮制品、塑料培养板、有机玻璃制品禁用烤箱灭菌。恒温水浴锅恒温水浴锅是实验室不可缺少的设备。主要用于显带处理和培养基的加温。由专人负责每周更换蒸馏水并添加防腐剂。4.1.24.1.2每周保养3.93.9高压蒸汽灭菌装置离体培养的细胞对水的要求特别高，培养细胞用的器皿清洗最后一道程序应用二蒸水冲洗，培养基的配制也应用二蒸水或超纯水。目前常用的有自动双重纯水蒸馏器（石英管加热），因为普通的橡皮对细胞是有毒的，所以制备好的二蒸水应避免通过橡皮管放出。冰箱实验室必须配备有普通冰箱和低温冰箱（-20℃），普通冰箱用于培养液、生理盐水、Hanks溶液等试剂和标本短期的存放，低温冰箱用于贮存需要冷冻保持生物活性及长时间存放的试剂如血清等。细胞冷冻贮存器细胞冷冻装置一般分为运输用和储存用二种液氮罐，用于细胞株和标本的保存，液氮罐双层结构中间为真空层，其内胆颈部与体部经焊接相连，故搬动和装入液氮时，应缓慢加入，使容器内的温度均匀下降，有条件可配备有程控降温仪的液氮储存系统，该系统的特点是可自动控制冷冻箱的降温速度。离心机细胞培养需要经常消化分离细胞、漂洗制备细胞悬液和进行传代以及染色体的收获，因此接种培养室与细胞处理室内可各配置一台可调速的小型台式离心机。高压灭菌是利用高压蒸汽使细菌体内蛋白凝固而达到灭菌，是最常用的灭菌方法。在115.5℃，30分钟就能杀死所有繁殖型细菌的芽胞。高压蒸汽灭菌比其它灭菌方法效果都好。由于蛋白质的凝固需有水分存在，当细菌体内含有水分在 25％以下时，蛋白质的凝固温度如下：水分含量凝固温度TOC\o"1-5"\h\z25 ％ 74-80 ℃8 ％ 80-90 ℃6 ％ 145 ℃由此可见，在细菌体内有水分存在的条件下可以大大降低灭菌所需的温度。高压灭菌主要用于细胞培养所需的二蒸水、生理盐水、手术器械、布类、橡皮类等。显微镜与细胞遗传图象分析工作站显微镜是分析染色体的必备工具，一般要求每位实验室技术人员配备一台。有条件的实验室可配备细胞遗传图象分析工作站。维护保养记录每日保养每日登记各仪器的运行和使用情况，保证每台仪器的正常运行。每周对各仪器进行清洁维护，检查各仪器是否存在各类使用的隐患。每月保养每月不定期的对各仪器进行抽样检查运行使用情况的检查。小型设备天平普通称量0.1克的电子天平以及分析天平是实验室所必需的，要求每年做一次校正。真空泵培养液的配制都用过滤的方法进行除菌，一般30升旋转式的真空泵即可。酸度计 又称为氢离子测定计或 pH计，是测定各种液体酸碱度的必须工具，要求每半年做一次校正。加样器 加样器是细胞培养不可缺少的用具，其规格有0.5-10ul、10-100ul、100-1000ul,末端可安装不同容量吸管，吸入和注入液体较方便。使用时吸入的液体量不能在其设定范围之外，而且要求每半年做一次校正。常用玻璃器皿及器械 培养器皿是供细胞接种生长等用的器皿，可用透明度好，中性硬质的玻璃制成。另外，还可使用透明、平滑、无毒、干净并经放射性核素照射灭菌密封包装的一次性使用塑料培养器皿，其优点是打开包装即可用于培养操作，缺点是费用较高。目前国内一般实验室使用的还是玻璃器皿。溶液瓶其规格常为500ml、250ml、100ml的配胶塞的盐水瓶和配塑料螺旋盖的盛液瓶，用于贮存各种试剂等。培养瓶有玻璃和塑料二种，常用的规格有25cm2(70ml)和75cM(275ml),160-175cm2(600ml)等规格，国内培养瓶常用的规格有25ml，100ml和250ml等规格，主要用于细胞培养，早期的玻璃培养瓶是用胶塞封口，仅能用于密闭培养，现被螺旋盖培养瓶取代。螺旋盖培养瓶适宜在CO2培养箱中使用， 瓶的底壁是供细胞贴壁生长的生长面，而其它内壁为非生长面。培养皿有玻璃和塑料二种，常用的有 120mm，100mm和60mm#规格，主要用于培养和分离组织用，也可用作单细胞分离及单层细胞贴壁培养等实验，。多孔培养板 材料仅有塑料的一种，其规格有96孔，24孔，12孔，6孔，4孔，用于少量细胞或单个细胞的克隆生长，细胞转化及细胞毒性等各种检测实验。吸管有玻璃和塑料二种，主要用于移送培养基，玻璃吸管有直头和弯头二种，直头吸管用于吸加少量培养基，加抗菌素，加NaHCO调pH等用；弯头吸管用于吹打分散和混悬细胞用。离心管有玻璃和塑料二种，主要用于离心、漂洗和分离细胞，常用的规格有50ml，10ml，5ml三种规格，此外还有微量离心管，规格有1.5ml，1ml，0.5ml，以供贮存少量试剂或其它实验用。器械主要用于取材和原代培养中切割组织。常用的器械有：组织剪、镊子等。使用过程中应注意保护刀锋，用毕擦净、晾干、以防生锈，消毒以煮、高压灭菌或 75%酒精浸泡。其它如配制溶液的量筒、容量瓶以及试管、高压