爱心医院检验科标本采集手册

标本采集手册概述实践证明，为保证临床检验质量，必须做到全过程质量控制,即对实验室检查的全过程进行全面的质量控制和质量管理。这里包括：实验前(分析前)、实验中(分析中)和实验后(分析后)三个阶段的质量控制。其中实验前质量控制是全面质量控制的前提。国内外均有报道,检验结果误差中70%左右来自实验前(分析前),而且实验前(分析前)误差是仪器、试剂、质控品和标准品等再好也无法解决的。因此,必须注意做好实验前质量管理。一实验前质量控制主要包括：（一）患者的准备；（二）标本的采集；（三）标本的储存；（四）标本的运送；

（五）标本送出及签收；

（六）标本的处理；

（七）已知的和需考虑的生物因素和干扰因素等。（一）患者的准备根据所采标本的类型和所分析的物质而定。标本采集前患者的状态对检测结果有一定的影响，不同检测项目对标本采集前患者的状态有不同的要求。许多非疾病因素，如是否空腹、精神状况、体力活动、使用药物等都可能影响检验结果。因此，在标本采集前，要根据需要对患者做好相应的准备。一般要求患者处于安静状态；晨起时的精神、体力、情绪等因素的影响较小，是大部分标本采集的最佳时间；如可能，患者最好停服干扰检测的药物；根据项目和标本类别选择相应的容器。许多检测对饮食、饮水和药物有特殊要求，如：静脉采血前至少要空腹8小时；血脂测定须禁食12-14h后采血；情绪紧张可使血糖升高,；吗啡、可卡因可使淀粉酶(AMY)升高；微生物培养最好在使用抗生素之前；采血样之前按摩前列腺可引起酸性磷酸酶的升高；醛固酮检测要在起床活动前取卧位血，起床后活动2

小时取立位血；尿液检查按不同项目分别留取晨尿、随机尿、计时尿；大便潜血检查前要素食，禁食含动物血的食物等。具体要求后述。（二）标本的采集正确的采集标本是保证检验质量的基础。要注意以下问题：

（１）避免干扰物污染，特别是定量分析标本；

（２）标本采集部位和方法要正确；

（３）标本标识一定要清晰无误；（４）无人为的溶血和混浊因素：如收集标本用力震荡或用玻璃棒及木棍搅拌会导致溶血；餐后采血会出现脂血而致血清、血浆混浊。（５）合理使用抗凝剂及防腐剂；

（６）收集区温度最好不超过20℃；（７）微生物检验标本采集严格无菌概念；

（８）标本采集后要尽快送至实验室。一、血液标本的采集方法（一）血液标本的种类和用途1静脉采血静脉血是最常用的血液标本，用于绝大多数临床化学、血清学和免疫学、全血细胞计数和血细胞形态学、血栓和止血学、血液寄生虫学和病原微生物学检验等。2动脉采血动脉采血用于血气分析。3毛细血管采血毛细血管采血可满足用血量不超过200ul的检验，如全血细胞计数和床旁快速检验。（二）采血器材1真空采血装置真空管采血简便、快速、省力，可连续多管采血；免去用注射器的抽吸和转注步骤，可避免或减轻机械性溶血；无血液污染，保持手、工作台面和申请单清洁，预防交叉感染，对工作人员和患者有保护作用；抗凝剂和血液比例固定，有利于保证检验质量。一次性真空采血管分类表容器用途颜色添加剂适用范围规格（ml）血常规血栓与止血血沉常规生化免疫分子生物血气分析淡紫红蓝黑红红灰EDTA-K2枸橼酸钠枸橼酸钠分离胶/促凝剂分离胶/促凝剂分离胶/促凝剂无添加剂血常规凝血机制血沉生化免疫免疫杂项血气分析21.81.6333注：2注射器和试管塑料器材与玻璃器材，对某些试验有不同的影响。——凝血因子测定以塑料注射器采血为好，玻璃器材可加速血液凝固。——用塑料试管，因血液不易凝固，分离血清时间延长，不利于临床化学，血清学和免疫学等的检验。——普通注射器抽血由于抽吸和转让，容易引起可见或不可见的溶血。（三）血液标本的采集方法静脉血标本的采集采血部位通常采用肘部静脉。当肘部静脉不明显时，可采取手背部、手腕部、胭窝部和外踝部静脉。婴幼儿可采用颈外静脉采血。采血步骤1核查病人住院病人：应携带检验申请单和已标记好的试管采集病人标本，需核查病人姓名、床号与病房以确认无误。门诊病人：核查内容包括查看病人姓名是否与申请单姓名一致、申请单名字是否与发票一致，病人是否符合采血要求(如空腹等)，若符合，在申请单和试管中统一贴条码，采血垫枕上一张新的清洁卫生纸。2按检验项目的要求，准备好相应的采血器材。3患者取卧位或坐位，手臂伸直平放在台面垫枕上，充分暴露穿刺部位。4采血前，采血员需用消毒剂擦手消毒。5找好静脉后，先后碘仪棉签由内向外侧顺时针方向消毒穿刺处皮肤，稍等片刻再无菌棉签以相同的方法擦去碘迹。在采血部位上方扎上脉压带，嘱患者紧握拳头，使静脉显露。如静脉仍不明显，可嘱咐患者反复握拳数次，促使静脉怒张。肥胖患者，上述伸握拳数次后仍不明显，这时必须凭操作者经验，以左手指在采血部门触摸，发现静脉走向后，试探性穿刺往往成功。6穿刺采血6.1使用真空采血针采血6.1.1开包装袋，取出采血针并将采血针上的护套取下，手持采血以15°的角度刺入静脉血管，此时可在连接胶管中见回血。然后将管塞穿刺针（不要将乳胶护套拔下）刺入真空采血管，血液会自动流入真空采血管中。6.1.2采血完后，先把采血针从静脉血管中抽出，用无菌干绵签压住伤口，然后再从真空采血管管塞中拔出穿刺针。将采血管轻轻颠倒混匀4-5次。7再次核对病人的姓名和号码，并将一次性采血器材放入专用一次性利器盒中。8取下采血垫枕上的清洁卫生纸，换上新一张，再用消毒剂擦手消毒，进行下一病人的采集。9当使用多种试管采血时依不含添加剂管、抗凝管次排行，具体顺序如下：血培养瓶→红头管→蓝头管→紫头管）→其它注意事项：1溶血对许多项目的检测产生干扰（见PSC009中的“溶血的影响”），因此，必须严格防止标本溶血，造成溶血的原因有压脉带捆扎时间太长，淤血过久；穿刺不顺损伤组织过多；抽血速度太快；抗凝血用力振荡；离心速度过快等。2采血前应向病人耐心解释，以消除不必要的疑虑和恐惧心理。如遇个别病人进针时或采血后发生眩晕，应立即拔出针头让其休息片刻，可以恢复。若为低血糖诱发瞎晕，可立即静注葡萄糖或嘱患者口服糖水即可，如有其他情况，应立即找知医生共同处理。3操作时避免溢出或溅泼血液。若血液溅出，立即用消毒液清洗消毒。警告：注意安全保护，所有的血标本都被认为有潜在的传感染性，主要的危险是来自于通过血液传播HIV，乙肝、丙肝病毒。应采取标准预防措施。动脉血标本的采集肱动脉、股动脉、前臂动脉以及其它任何部位的动脉都可以进行采血。1将注射器吸取肝素钠溶液，而后将肝素液来回抽动，使针筒局部湿润，多余肝素全部排出弃之，注射器内死腔残留的肝素液即可抗凝。2针刺动脉血管，让注射器内芯随动脉血进入而自动上升，取1—2ml全血即可。3拔针后，注射器不能回吸，只能稍外推，使血液充满针尖空隙，并排出第一滴血弃之，让空气尽量排尽，将塑料嘴或橡皮泥封住针头，隔绝空气。再把注射器来回搓滚，混匀抗凝血，立即送检。毛细血管采血测定项目要求血量不多的情况下一般可采用手指穿刺采血。在下列情况下，手指穿刺采血更优于静脉采血。1患者静脉表浅而脆薄。2患者是儿童，且找不到合适的静脉穿刺，或不配合静脉采血。然而，下列情况手指穿刺采血不适用：1人在极度寒冷状态。2指穿刺采血收集血量不能达到实验要求。手指毛细血管穿刺步骤1核查病人后，在申请单和试管上统一编号。采血前，检验者用消毒剂擦手消毒或用一次性手套。2病人手指如果寒冷、发绀、肿胀或发炎时应该避免采血。如果病人手指寒冷需要采血，可以用温湿毛巾或温水（大约42℃）预温3至5分钟，以促进血液流动。告之病人正确的姿势后，让病人的手能够舒适的放在采血垫上。3用拇指和食指紧捏住病人的中指或无名指大约离指尖3mm处。轻轻按摩采血部位5—6次（使其自然充血）。4用蘸75%的医用酒精棉球清洁整个指尖，待其干燥。5一手拿无菌采血针，一手握紧病人的手指，以至于暴露最佳采血部位。6使皮肤紧韧，快速而平稳的刺破皮肤。采完后，把采血针和采血管丢入“锐器合”中。7如果病人是0.5岁以下的儿童，一般采用大拇指采血。如果是成人或0.5岁以上的儿童，穿刺部位应该选择中指或无名指的指腹。8如果血液自动流出，用绵球擦去第一滴血，并擦干切口部。把使用后的绵球丢入“生物危害垃圾桶”中。9如果血液不自动流出，可以把病人的手指朝下稍稍加压，以促进血液的流出，但注意不要把组织液挤出混入血液中。如果施压后血液还不能流出，换部位使用新的采血针再进行穿刺。10手持微量毛细管，以30—45度角接触穿刺部位。收集50--100ul血，用洁净棉球擦干毛细管外侧。11将微量毛细管中的血液立即冲入微量收集管中，即刻盖上盖，颠倒混均至少10次。12血液采集完毕，用清洁的棉球或纱布轻压于病人伤口上，等待血液停止流出。13采血完成后，检验者再次用消毒剂擦手消毒或更换手套，进行下一病人的采集。脚跟毛细血管穿刺脚跟毛细血管穿刺采集血液法适用于一周岁以下的新生儿或婴儿注意：行脚跟穿刺时应避免损伤，最好在儿科病房有医生指导下进行。注意事项1采血前，手必须用消毒剂擦手消毒或更换手套。2让病人安稳的坐好，防范患者晕倒或摔倒。3当穿刺后，加压血液也不能流出，考虑再行穿刺时，一定要更换新的采血针，旧的采血针已被污染，不能重复使用。4当血液采集完毕时，用干净棉球或纱布压于伤口上，并告之病人轻压伤口直到止血为止。5每次采血前后，检查者必须用消毒剂擦手消毒或更换手套。以防止交叉感染。6操作时避免溢出或溅泼血液。若血液溅出，立即用消毒液清洗消毒。警告者说所有的血标本都被认为有潜在的传染性。主要的危险是来自于通过的血液传播HIV，乙肝，丙肝等病毒。二、用于不同检测目的血液标本采集方法（一）血液寄生虫检验标本采集1疟原虫1.1EDTA-K2抗凝静脉血1—2ml，由检验人员涂片。为保证涂片质量，检验科推荐病房直接送EDTA-K2抗凝静脉血。1.2取静脉血困难的患者，可采取新的末梢血，薄涂片和厚涂片各3级，立即送检。1.3在治疗之前和规则发热后期采集标本，即间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血，此时，早期滋养体已发育至易于鉴别形态的晚期；恶性疟患者，应在发作方20小时左右采血。2微丝蚴2.1盐水涂片法床旁采集末梢血2.2浓集法用静脉血，DETA抗凝真空管抽取静脉血。2.3怀疑丝虫感染应在中午和午夜多次采血检验（班氏及马来丝虫微丝蚴于夜晚10时至凌晨2时，罗氏丝虫微丝蚴于上午10时至下午4时，血液中数量增多）（二）出、凝血功能及血液流变检验标本采集血和抗凝剂比例一定要准确。标本要及时送检，不能久置(2小时之内检测)。抽血应顺利，避免溶血或凝血。病人在抽血前应禁食，避免脂血减低实验的敏感度。1凝血因子检测1.1第V因子：用蓝帽真空管静脉采血。不稳定，采血后立即分离血浆测定，否则应快速冻，-20℃保存，测定前快速融解，避免反复冻融。1.2第II/VII/VIII/IX/X/XI/XII/XIII因子：蓝帽真空管静脉采血，不得有凝块，立即送检。为避免被组织凝血活酶污染，最好用第二管血。1.3vW因子（vWF）：无添加剂真空管在安静条件下静脉采血，立即送检。1.4使用抗凝药物，如香豆素类者和肝素应停用2周。2全血粘度检测采集清晨空腹静脉血，用肝素抗凝。抗凝血置室温4h内完成测定。另外，加抽一管“血沉”标本。3出血时间测定对采血部位要保暖，血液会自动流出。选择切口要避开血管、疤痕、水肿、溃疡等部位。试验前一周避免服用抗血小板的药物。4血小板聚集试验试验前7—10天内避免服用阿司匹林、保泰松、抗组胺制剂、酚噻嗪类、氯吡格雷、噻氯匹定等影响血小板功能的药物。试验当天禁用含咖啡因饮料。蓝帽真空管静脉采血。（三）部分生化项目检验1肌酐清除率低蛋白饮食3天（＜40g蛋白质/d），第4日晨8时排空膀胱计时，至次晨8h准确留取24小时尿（加5ml甲苯防腐），记录尿量，取5—10ml测尿肌酐；24h任意时间采集空腹静脉血3ml检测血肌酐。试验期间避免使用头孢菌素，如有可能应停用一切药物。肌酐清除率=尿肌酐浓度×24h尿量/血肌酐浓度校正清除率=[肌酐清除率×标准体表面积（1.73m2）]/受试者体表面积受试者体表面积公式（m2）=0.0061h+0.0128w-0.1529h：身高（cm）w：体重（kg）2口服葡萄糖耐量试验（OGTT）2.1试验准备：对试验有影响的药物如烟酸、阿司匹林、β受体阻滞剂、利尿剂、磺胺类等至少应停用1周；试验前3天每天谷类食物应不少于200—300g，否则会出现假阳性；试验前1天禁用烟、酒、茶、咖啡，避免剧烈体力活动；试验前1天禁食10—16小时，不禁水；至少静卧或静坐半小时，避免精神紧张。2.2试验程序：早晨7—8时排空膀胱，取空腹血后，在5分钟内饮完准备好的糖水（无水葡萄糖75g，儿童按1.75g/kg体重，总量不超过75g，溶于250—300ml温开水中）。服完后,分别于隔30分钟、60分钟、120分钟和180分钟取血，含空腹共5次。2.3注意事项：由于血糖以每小时5%—15%的速率分解，因此取血后应立即送检。如用75g水解淀粉代替葡萄糖，可避免口服葡萄糖引起的消化系统不适。如用馒头餐（干重100g）代替葡萄糖，因与葡萄糖的吸收速度不同，应在吃完并饮水300—350ml后计时。3糖化血红蛋白（GHb）EDTA抗凝静脉血2—3ml。（四）激素检测标本采集1皮质醇有日分泌节律，分别在上午8点和下午4点两次取血，采血前至少安静休息30分钟，应尽快分离血清。2泌乳素因泌乳素睡眠时增高，起床后缓慢下降，应在上午8—10时空腹避免运动，在安静状态下用真空管静脉采血，应尽快分离血清。3孕酮于末次月经后或妊娠第3月起，上午8：00静脉取血。由于受ACTH分泌节律的影响，除有月经周期变化规律外，还有日内变化规律。应连续多次测定，并应与LH、FSH、E2同时测定以便对结果做出正确解释。二、尿液标本的种类晨尿：即清晨起床后第一次排尿时收集的尿液标本，即为首次晨尿。如为睡眠8h以上，又称卧位8h尿液。这种标本尿液较为浓缩，可用于肾脏浓缩能力评价，有利于尿液形态学和化学成分分析。随机尿：即随时间留取的尿液标本。这种标本不受时间限制，标本新鲜易得。最适合于门诊、急诊患者的尿液筛检试验，以及隐血、酮体、尿糖、尿淀粉酶等的检验。但此尿液标本易受多种因素影响，致尿检成分浓度减低或增高，造成临床结果对比的混乱。负荷尿：为某种特殊需要检查一定负荷后的尿，如葡萄糖负荷后的糖耐量试验，运动负荷后的运动后血尿、起立活动后的直立性蛋白尿等。餐后尿：通常收集午餐后至下午2时的尿液。这种尿标本，有利于检出病理性糖尿、蛋白尿、或尿胆原。这是因为进餐后，胃肠道的负载加重，减低了尿糖、尿蛋白的肾阈值。餐前尿：早、中、晚三餐前半小时至1小时排尿弃去，进餐前再留取尿标本检验尿糖，尿糖浓度反映餐前空腹的血糖平均水平，用于糖尿病治疗监测和疗效评价。计时尿：一般根据临床诊断或疾病观察的需要，按特定时间采集尿液标本。3h尿：一般是收集上午6—9时时段内的尿液，多用于检查尿液有形成分，适用于尿液有形成分排泄率检查。如1h尿排泄率检查等。12h尿：即晚上8时到次晨8时之内的12h全部尿液，用于Addis计数。24h尿：患者上午8时排尿一次，将膀胱排空，弃去尿液，此后收集各次排出的尿液，直至次日上午8时最后一次排尿的全部尿液。特殊试验尿：中段尿：适用于尿培养。标本采集前尽量憋尿，留取晨尿。先用肥皂和水彻底清洗，干净毛巾擦干。女性病人撑开阴唇，彻底清洁外阴及阴唇，无菌纱布擦干。保持阴唇分开，手指不碰触清洁区域，男性病人应翻转包皮清洗。在不间断排尿过程中，弃去前段尿，以无菌带盖杯留取中段尿。导管尿：患者发生尿潴留或排尿困难时，通常由医护人员用导尿管或穿刺取尿。注意事项1容器要保持清洁，避免化学品和细菌污染，最好使用一次性尿杯。2尿液标本要求新鲜。留取后2小时内检验，否则应冷藏，测试前需复温。为防止尿标本变质，24h尿标本需要添加适量的防腐剂。·24h尿尿酸、尿素、肌酐、蛋白、钠、钾、氯等化学成分检测，按5ml/L尿加入甲苯。·24h尿肾上腺皮质激素及其代谢产物（17-OH、17-KS）、香草扁桃酸（VMA）、钙、磷等化学成分检测。按1ml/L尿加入浓盐酸。3尿早孕试验（HCG试验）随机尿，但以清晨第一次尿为最佳。4用于尿培养标本的采集方法采集中段尿，立即送检。三、粪便、体液及生殖道标本采集方法1粪便标本采集1.1住院标本采用粪便采集盒。1.2选取有脓血、粘液部分的粪便2—3g，外观无异常的粪便可在表现及内部不同部位取材。无法获得粪便的情况下，可用经无菌生理盐水或用增菌液湿润的直肠拭子插入肛门4—5cm深处（小儿2—3cm），轻轻转动一圈，擦取直肠表现的粘液后取出，盛于无菌试管或保存液中送检。1.3检查阿米巴滋养体时，应在排便后立即从脓血部分和稀软部分取材涂片检查。检查蟯虫卵时，最好用玻璃纸拭子或透明胶纸于清晨排便前自肛门周围皱襞处拭取标本。进行血吸虫卵毛蚴孵化试验要留全份新鲜便（不少于30%）。注意事项（1）粪便标本要新鲜，最好在2小时内送检。（2）不能将标本置于吸水纸中送检，以免影响细胞形态。（3）潜血试验时患者应素食3天。2痰液标本采集用清水漱口数次，用力自气管深部咳出痰液至无菌带盖杯内。注意事项（1）痰液标本的采集以清晨为佳，此时患者痰量较多且含菌也多。（2）咳痰时应尽量防止唾液及鼻喉部分泌物混入，以减少污染。（3）若患者痰量减少，需要检查痰中结核杆菌时，则收集24h痰液。3脑脊液标本采集3.1由医生采集。3.2通常采用腰椎穿刺，较小儿童也可采用小脑延髓池穿刺，穿刺野皮肤消毒必须彻底。3.3一般分3管收集：第一管用作细菌试验，第二管用作化学检查，第三管用作常规检验，顺序不可错乱。3.4常规检测应留取2ml立即送检。3.5注意事项：当颅内感染，出血或肿瘤，颅内压升高，穿刺有一定的危险性；必要时可先静脉给予适量的渗透性利尿剂（如20%甘露醇），降低颅内压后穿刺并减少取材量，以免诱发脑疝。浆膜腔积液标本采集4.1浆膜腔积液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等。4.2胸水及腹水抽取10ml，心包液、关节液等抽取2—5ml，将所得穿刺液盛于加有抗凝剂的试管中或加有抗凝剂的试管中，立即送检或置4℃冰箱保存。4.3抗凝剂为100g/L乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2盐），每0.1ml可抗凝6ml浆膜腔积液。5生殖道标本采集5.1精液标本采集排精后的精细管恢复造精功能的时间约为4—5日，故应嘱受检查禁欲4—5日后受检。如怀疑精子形成低下应禁欲7日。标本采集方法如下：5.1.1手淫法：受检者应消毒手指，进行手淫后射精于灭菌干燥清洁的试管小瓶内，留取全部精液，勿遗漏。5.1.2体外射精法：亦称性交中断法，采用此法应注意不可丢失最初射精液（精液的1/3），它是精子浓度较高的部分。5.1.3精液标本采集后，应立即送检，放置不超过2小时，保持温度在25—35℃。注明采集时间和前次排精的日期。标本不可贮于塑料或乳胶制品内：因乳胶橡皮和防粘粉剂可于2—3h内抑制成杀死精子的活动。5.2前列腺液标本采集检查前72小时避免性活动，因排精或性兴奋前列腺液白细胞增多可超过20个/HP，禁欲7天以上白细胞也可增多，故以排精后3—5天为宜。其采集方法通常为按摩法：嘱受检者排出尿液后，肛指自上而下按摩前列腺左右两叶各2—3次，或自前列腺两侧向中线各按压2—3次，然后由前列腺的中线向肛门口按压2—3次，再挤压会阴部的尿道，便有前列腺液自尿道口流出。弃去第一滴，用干燥洁净的玻片搂取标本，立即送检。在气温较高或采集前列腺量过少时，应特别注意及时送检，以防标本干涸。5.3白带标本采集采用消毒拭子自阴道深部或阴道穹隆后部宫颈管取材，置于已备好的消毒生理盐水中送检。6十二指肠液采集6.1十二指肠引流液多由临床医师用十二脂肠管采集。6.2根据采集的先后可分为4瓶，可依次标明为D、A、B和C液。D液：多在插管引流时自然流出，系十二指肠液，呈淡黄色。A液：系来自胆总管的胆汁，呈金黄色。B液：系自胆囊，呈深褐色。C液：是直接来自肝胆管的胆汁，呈柠檬黄色。6.3由于十二指肠引流液中含有胰酶能迅速消化破坏细胞，故标本采集后应立即送检。7胃液采集胃液多由临床医师采集，一般取空腹胃液或胃窦部生理盐水冲洗洗液置于洁净试管。由于胃液的酸性及酶类能迅速消化破坏细胞，故取得标本后应立即送检。8阴道/宫颈脱落细胞采集8.1取样由医生完成。8.2所用器械必须清洁、干燥。不能粘附任何化学药品如酒精，肥皂等。亦不能使用任何润滑剂。8.3用窥阴器扩张阴道：用无菌小木片在阴道上段左右侧壁轻刮一下，注意不可用力刮取，以避免非自然脱落细胞混入标本。如检查炎症时取宫颈外口处边缘，如遇特殊情况可于阴道壁、子宫颈、子宫腔或直接溃疡处采集。8.4将刮板上分泌物均匀涂于玻片上,不能来回涂抹,不能过厚,立刻将涂片置于固定液中,以免干燥后细胞皱缩变形。9淋病奈瑟菌涂片12.1一般由医生或护士采集。12.2男性患者，洗净尿道口，用手指由后向前挤出脓液滴于载玻片上，如无分泌物，可用小拭子或取菌环插入尿道1.5—2.5cm，待10—15s后再轻轻旋转数秒钟，取出涂片。12.3女性阴道分泌物或宫颈刮片，最好用不含润滑剂的窥镜取材，先试去脓性分泌物，再用一无菌拭子伸入宫颈内1—2cm并压出宫颈腺体分泌物，放置30s后，使拭子充分吸收分泌物再取出涂片。10乳糜试验乳糜液存在于淋巴管内，主要为微粒脂肪所组成。当病理情况下（如丝虫病）引起淋巴管阻塞而破裂时，乳糜液进入体液，形成乳糜体液。标本采集：尿、胸水等体液5—10ml，2小时内送检。四、临床微生物标本采集方法一、血培养1标本采集1.1严格无菌操作，静脉穿刺部位皮肤用0.5%碘伏由内向外消毒，待0.5—1分钟消毒剂挥发干后再行穿刺。1.2采血量约为培养基的1/5—1/10，儿童取血2—5ml，成人10ml；标本过少阳性率降低。专用培养瓶经碘伏消毒0.5—1分钟后将血液注入，厌氧培养切勿混入空气。混匀，立即送检。1.3在间隔短时间（例如30分钟）后，更换采血部位同上法再重复一次采血，取双份血样分别作需氧和厌氧培养。特别提醒注意1.4应尽可能在抗菌治疗前和预计发热期前0.5—1h内采血，若热型不稳定，应在发热初期尽快采血。已经使用抗菌药物可能对细菌生长有影响，如病情允许应停药2天采血，或使用含抗生素吸附剂的专用培养瓶。1.5怀疑为细菌性脑膜炎应在发热的头1—2天内，怀疑为伤寒应在发热第一周内，怀疑为布鲁菌病应在预期发热前取血：经培养24—48小时如未见细菌生长，应再连续取血两次。1.6怀疑为细菌性心内膜炎，急性在2小时内连续取血3次；亚急性在发热寒战期每隔1—2小时采血连续3—4次，或24小时内连续采血3—4次。培养24小时后如为阴性结果应再取1次血；如仍为阴性在抗生素治疗之前还要再取1次血以提高检出率。1.7静脉采血通常用肘正中静脉，怀疑亚急性细菌性心内膜炎也可自股动脉采血。对血培养阴性而高度怀疑伤寒或布鲁菌病者，可抽取骨髓培养和辅助血清学试验有助于诊断。二、尿培养1中段尿标本采集方法（尤其妇女和儿童）：1.1标本收集前夜尽量憋尿，留取晨尿。1.2标本收集前应严格注意无菌操作，先用肥皂和水彻底清洗，干净毛巾擦干，女性病人撑开阴唇，彻底清洁外阴及阴唇，无菌纱布擦干。保持阴唇分开，手指不碰触清洁区域。男性病人应翻转包皮冲洗。1.3弃去前段尿，收集中段尿10—20ml盛于无菌带盖杯中，立即送检。2注意事项2.1尿液是良好的培养基，采集后应尽快送检。不能及时送检者，可保存于4℃不超过6h。2.2使用导管、膀胱镜、膀胱穿刺等外科手术方法采集的尿液标本送检时，需在申请单上需详细注明。2.3有泌尿道感染症状的病人可在症状出现时收集，治疗48—72h后重复送检；对无症状的菌尿病人（尿常规白细胞、硝酸盐试验等），应连续送检3份。三、大便标本采集1应在病程早期、抗菌药物治疗前采集。自然排便后，可挑取脓或粘液部分粪便，液体粪便取絮状物盛于带盖无菌杯中。2标本应尽快送实验室（＜1h）。如不能马上送出，则置于4℃冰箱保存待送出。标本最好能置于卡布运送培养基。3使用直肠拭子收集法可提高能侵入肠道粘膜的病原菌如志贺菌属的检出率。四、呼吸道标本采集1上呼吸道标本患者坐于光源前，用压舌板压下舌头，无菌棉签用力擦拭肿胀部位，但不要碰触舌或颊表面。1.1若从鼻腔采样本作培养，可用一支无菌棉拭子（尖端的棉花必须紧密）直接插入鼻腔，应避免用大而疏松的棉拭子，因其可能滑落，甚至陷于病人鼻腔中。1.2若从咽喉采集样本作培养，须在光线充足下，至少采集两根拭子，分二次收集，收集完后，应置于运送培养基，以防样本干燥，采集时尽量避免接触舌头唾液。采集完后，应尽快送检，以防苛养菌死亡。1.3鼻咽样本须用一根细长的拭子（最好可弯曲），由鼻腔穿入咽喉处，轻轻旋转搽拭，然后取出，再从另一鼻孔穿入鼻咽处。2下呼吸道标本2.1气管抽吸物：纤支镜标本、气管内插管、鼻咽抽吸液。2.2采集方法2.2.1清晨，用清水反复嗽口后用力自气管深部咳出的当日第一口浓痰，于带盖、广口、密封的无菌杯，尽快送检。2.2.2对小儿或咳痰困难病人，用压舌板向后压舌，用棉拭深入咽部，经压舌刺激咯嗽时，可喷出肺部和气管分泌物，粘在棉拭上，置入无菌试管中送检。2.2.3尽快送检，以防苛养菌死亡。不能及时送检则置于4℃冰箱保存待送出。五、生殖道标本采集1男性尿道：先用生理盐水局部清洗，