医学微生物学实验一省一等奖课件

《医学微生物学》实验课件南华大学病原学实验教学中心EtiologyExperimentalTeachingCenterofUniversityofSouthChina1《医学微生物学》实验课件南华大学病原学实验教学中心1实验内容一、显微镜的使用操作及注意事项二、细菌的形态和特殊结构观察：

1.自阅片：破伤风杆菌（示芽胞）、变形杆菌（示鞭毛）2.示教片：肺炎链球菌（示荚膜）三、革兰染色法（自做）2实验内容一、显微镜的使用操作及注意事项2实验室规则微生物学实验要求1、微生物无处不在：故要树立有菌观念，实验过程要无菌操作;2、实验材料为病原微生物，具有感染性1）穿好白大衣，除必要的书籍、记录本及文具外，其他个人用品不得带入实验室；2）实验室禁止饮食，未经许可严禁将实验材料带出实验室3实验室规则微生物学实验要求33、按照实验要求，认真积极的完成实验，有些实验需第二天观察结果，要求同学们亲自观察，并详细记录结果，完成实验报告；4、爱护实验器材，实验用过的器材放置指定位置，实验室仪器不得乱摸乱碰；实验自阅玻片标本损坏10元/张；5、实验完毕后，整理实验台，值日生负责室内卫生，并负责关门、关窗、关水、关电。43、按照实验要求，认真积极的完成实验，有些实验需第二天观察结一、显微镜的使用操作及注意事项5一、显微镜的使用操作及注意事项5二、显微镜的使用6二、显微镜的使用6

（一）观察前准备

1.显微镜拿取

2.调节通光量

使用油镜时，为使通光量最大，可采用：1）光圈开到最大；2）聚光器上升到最高；3）低倍（10×）物镜下，转动凹面反光镜，使视野的光照达到最明亮均匀。7（一）观察前准备

1.显微镜拿取7（二）低倍镜观察

粗旋钮调节：物像出现细旋钮调节：物像清晰为什么镜检任何标本都要先用低倍镜观察？操作要点8（二）低倍镜观察

为什么镜检任何标本都要先用低倍镜观察？操作（三）高倍镜观察在低倍镜转换高倍镜（40x）适当调节细螺旋即可看到物像

忌使用粗螺旋，否则极易压碎标本．甚至损坏物镜。操作要点注意9（三）高倍镜观察在低倍镜转换高倍镜（40x）忌使用粗螺旋，（四）油镜观察

1.滴油（不要抹开）2.转换为油镜头，使其浸入香柏油3.调节细螺旋即可找到物像

油镜头须浸入油中

不使用粗螺旋，细螺旋也不可无限旋转，否则可压碎玻片及损坏物镜头光圈需开至最大聚光器须上升至最高注意10（四）油镜观察注意104.玻片处理5.镜头擦拭：限取3张擦镜纸

---如香柏油不慎玷污非油浸镜头应立即直接拭去（勿用二甲苯）---擦拭时沿一个方向，禁止旋转6.还原各部分7.填写显微镜使用登记表注意114.玻片处理注意11二、细菌的形态和特殊结构观察12二、细菌的形态和特殊结构观察12（一）细菌的基本形态1．球菌：

葡萄球菌(葡萄状排列)链球菌(链状排列)脑膜炎奈瑟菌(成双排列)2．杆菌：大肠杆菌、枯草杆菌等3．螺形菌：霍乱弧菌等

13（一）细菌的基本形态131.荚膜荚膜与微荚膜概念化学成分变异医学意义（二）细菌的特殊结构

141.荚膜（二）细菌的特殊结构

14取材：小鼠腹腔渗出液染色法：Hiss染色放大倍数：10X100荚膜菌体肺炎链球菌（示荚膜）15取材：小鼠腹腔渗出液荚膜菌体肺炎链球菌（示荚膜）152.鞭毛（Flagllum）概念数目、位置和排列可不同鞭毛是细菌的运动器官医学意义：162.鞭毛（Flagllum）概念16变形杆菌（示鞭毛）鞭毛菌体取材：纯培养物染色法：鞭毛染色放大倍数：10X10017变形杆菌（示鞭毛）鞭毛菌体取材：纯培养物173.芽胞概念形状、直径、位置随菌种而不同形成条件非细菌的繁殖体抵抗力强医学意义：183.芽胞概念18破伤风梭菌（示芽胞）芽胞菌体取材：纯培养物染色法：革兰染色放大倍数：10X10019破伤风梭菌（示芽胞）芽胞菌体取材：纯培养物194.菌毛概念在光镜下看不见，使用电镜才能观察到分类：普通菌毛和性菌毛医学意义204.菌毛概念20三、革兰氏染色法

常用染色方法

单染法：一种染料使细菌着色，如美蓝和复红染色；

复染法：两种或两种以上染料染色，有助于鉴别细菌，如革兰染色法和抗酸染色法。21三、革兰氏染色法

常用染色方法21结晶紫卢戈碘液液酒精复红G-菌：类脂质多肽聚糖少G+菌：肽聚糖多交联度大类脂质少渗透性学说：两类细菌的细胞壁成分和结构差异【原理】22结晶紫卢戈碘液液酒精复红G-菌：G+菌：渗透性学说：两类细菌【材料】1.葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。2.革兰染色液。23【材料】1.葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。23

涂片：注意无菌操作

干燥

固定染色【步骤】24【步骤】24

初染：结晶紫染液染lmin

水洗，甩干

媒染：卢戈氏碘液染1min

水洗，甩干

脱色：酒精脱色约30s

水洗，甩干

复染：复红染液染1min

水洗，甩干

印干

油镜观检染色关键步骤！25染色关键步骤！25革兰阳性球菌革兰阴性杆菌取材：培养混合菌液放大倍数：100X10革兰染色结果【结果】26革兰阳性球菌革兰阴性杆菌取材：培养混合菌液革兰染色结果【结果作业1、细菌特殊结构绘图2、革兰染色法的完全实验报告（实验名称、目的、材料、步骤、结果、分析、结论）27作业1、细菌特殊结构绘图27《医学微生物学》实验课件南华大学病原学实验教学中心EtiologyExperimentalTeachingCenterofUniversityofSouthChina28《医学微生物学》实验课件南华大学病原学实验教学中心1实验内容一、显微镜的使用操作及注意事项二、细菌的形态和特殊结构观察：

1.自阅片：破伤风杆菌（示芽胞）、变形杆菌（示鞭毛）2.示教片：肺炎链球菌（示荚膜）三、革兰染色法（自做）29实验内容一、显微镜的使用操作及注意事项2实验室规则微生物学实验要求1、微生物无处不在：故要树立有菌观念，实验过程要无菌操作;2、实验材料为病原微生物，具有感染性1）穿好白大衣，除必要的书籍、记录本及文具外，其他个人用品不得带入实验室；2）实验室禁止饮食，未经许可严禁将实验材料带出实验室30实验室规则微生物学实验要求33、按照实验要求，认真积极的完成实验，有些实验需第二天观察结果，要求同学们亲自观察，并详细记录结果，完成实验报告；4、爱护实验器材，实验用过的器材放置指定位置，实验室仪器不得乱摸乱碰；实验自阅玻片标本损坏10元/张；5、实验完毕后，整理实验台，值日生负责室内卫生，并负责关门、关窗、关水、关电。313、按照实验要求，认真积极的完成实验，有些实验需第二天观察结一、显微镜的使用操作及注意事项32一、显微镜的使用操作及注意事项5二、显微镜的使用33二、显微镜的使用6

（一）观察前准备

1.显微镜拿取

2.调节通光量

使用油镜时，为使通光量最大，可采用：1）光圈开到最大；2）聚光器上升到最高；3）低倍（10×）物镜下，转动凹面反光镜，使视野的光照达到最明亮均匀。34（一）观察前准备

1.显微镜拿取7（二）低倍镜观察

粗旋钮调节：物像出现细旋钮调节：物像清晰为什么镜检任何标本都要先用低倍镜观察？操作要点35（二）低倍镜观察

为什么镜检任何标本都要先用低倍镜观察？操作（三）高倍镜观察在低倍镜转换高倍镜（40x）适当调节细螺旋即可看到物像

忌使用粗螺旋，否则极易压碎标本．甚至损坏物镜。操作要点注意36（三）高倍镜观察在低倍镜转换高倍镜（40x）忌使用粗螺旋，（四）油镜观察

1.滴油（不要抹开）2.转换为油镜头，使其浸入香柏油3.调节细螺旋即可找到物像

油镜头须浸入油中

不使用粗螺旋，细螺旋也不可无限旋转，否则可压碎玻片及损坏物镜头光圈需开至最大聚光器须上升至最高注意37（四）油镜观察注意104.玻片处理5.镜头擦拭：限取3张擦镜纸

---如香柏油不慎玷污非油浸镜头应立即直接拭去（勿用二甲苯）---擦拭时沿一个方向，禁止旋转6.还原各部分7.填写显微镜使用登记表注意384.玻片处理注意11二、细菌的形态和特殊结构观察39二、细菌的形态和特殊结构观察12（一）细菌的基本形态1．球菌：

葡萄球菌(葡萄状排列)链球菌(链状排列)脑膜炎奈瑟菌(成双排列)2．杆菌：大肠杆菌、枯草杆菌等3．螺形菌：霍乱弧菌等

40（一）细菌的基本形态131.荚膜荚膜与微荚膜概念化学成分变异医学意义（二）细菌的特殊结构

411.荚膜（二）细菌的特殊结构

14取材：小鼠腹腔渗出液染色法：Hiss染色放大倍数：10X100荚膜菌体肺炎链球菌（示荚膜）42取材：小鼠腹腔渗出液荚膜菌体肺炎链球菌（示荚膜）152.鞭毛（Flagllum）概念数目、位置和排列可不同鞭毛是细菌的运动器官医学意义：432.鞭毛（Flagllum）概念16变形杆菌（示鞭毛）鞭毛菌体取材：纯培养物染色法：鞭毛染色放大倍数：10X10044变形杆菌（示鞭毛）鞭毛菌体取材：纯培养物173.芽胞概念形状、直径、位置随菌种而不同形成条件非细菌的繁殖体抵抗力强医学意义：453.芽胞概念18破伤风梭菌（示芽胞）芽胞菌体取材：纯培养物染色法：革兰染色放大倍数：10X10046破伤风梭菌（示芽胞）芽胞菌体取材：纯培养物194.菌毛概念在光镜下看不见，使用电镜才能观察到分类：普通菌毛和性菌毛医学意义474.菌毛概念20三、革兰氏染色法

常用染色方法

单染法：一种染料使细菌着色，如美蓝和复红染色；

复染法：两种或两种以上染料染色，有助于鉴别细菌，如革兰染色法和抗酸染色法。48三、革兰氏染色法

常用染色方法21结晶紫卢戈碘液液酒精复红G-菌：类脂质多肽聚糖少G+菌：肽聚糖多交联度大类脂质少渗透性学说：两类细菌的细胞壁成分和结构差异【原理】49结晶紫卢戈碘液液酒精复红G-菌：G+菌：渗透性学说：两类细菌【材料】1.葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。2.革兰染色液。50【材料】1.葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。23

涂片：注意无菌操作

干燥