第7章酶学-第四章酶学第二节、命名与分类

酶是由生物体产生的、具有高度催化效率和高在本章节中把酶所催化的反应称作酶促反应，发生化学反应前的物质称底物，而反应后生成的物过渡态（活化分子 能活化

底物基产物基反应进过渡态（活化分子产物产物基

反应进★酶具有高度的催化效CO2+ 1s之内，可以使6×105个CO2分子105~1017如此高的催化效率使生物体内含量甚微酶具有高度的专一酶：只作用于结构近似的分子，甚至只催化一种专一性的分

当底物具有异构体的时候，酶只能作用于其中一种。这种专一性叫做异构专一性。又包括旋光异构专一性H2O+H2O+

L氨基酸

NH3

★酶活性可以调用酸水解淀粉生产葡萄糖，需要在245-294kPa140-150℃用淀粉酶水解，65℃第二节、 名与分酶底物 “酶底物 “酶1961年以前，人们根据酶作用的底物名称、反该命名定，每种酶的名称应明确标明底物用用乙醇脱氢 谷丙转氨酶 过氧化物 H2O2∶邻甲氧基酚氧化

乙 乙 NADH+丙氨 谷氨 国际酶学（EnzymeCommission,EC）将所有的

乳 催化化合物某些基团在分子间反应通式： 反应通式： 反应通式： A＋催化各种同分异构体之间的转化，即基团在分子的反应通式：

ATP 谷氨 谷氨酰亚亚亚亚-亚在亚-亚类中的序大第一个“11大类，即氧化还原酶类；第二个“1”——第1亚类，供氢体为CHOH；第三个“11亚亚类，受氢体为NAD+；第四个“1”——在亚亚类中的顺序号。

辅因子（辅酶或辅基较松弛辅基——与酶蛋白结合较紧密，常常以共价键酶的结构特酶往往有个所谓活性中心

催化部位：底物的敏感键在此被打断或形成新的键，从而（约1%2%），相当于23个氨基酸残基锁与假说酶作用高效性的机E+ E- P+过渡态（活化分子过渡低过渡低物基产物基

反应进邻近效应和定向效有些底物在溶液中的浓度为10-3mol/L，而在酶的活性中心高达100表面上而引起的。其催化原理是降低了底物进入过渡诱导契合和底物变形效 椅式构 酶与底物作用时，通过放出电子或吸取电子，作用于底物的缺电子中心或负电中心，迅速形成不稳定的中间共价复合物，称为共价催化，共价催化酸碱催化是指酶的活性中心通过暂时提供质子或者收回质子的方式，促进并稳定过渡态的形成， +- - -

-COO - -S+

+ NH+第151 2、根据国际酶学的规定，酶可以分成氧化还原酶类 酶类 3 4酶促反应速v=△[P]/V注意：一个酶促反应的速 酶促反应初速Vt影响酶促反应速度的因底物浓度对酶促反应速度的V1903Henri通过蔗物（蔗糖）浓度[S]与酶促反应速度v之间的关系

一级反根据底物饱和现象，Henri1903中间产物ES，然后ESP。V

零级反

混合级反

一级反

X射线衍射可以直接观察到羧肽酶A米氏方P156图7-稳态理论版的VmaxvKm+米氏方程的推k-1[ES]+k2[ES]=k1[Et][S]+k-2[Et][P] （2）ES复合物[E]=[Et]+[ES]v=k2[ES]Vmaxk2根据上述四个假设前提，推导反应速度v与底物浓度[S]之间的关系方程，即米氏方程。tttk1[Et][S]k2[ES]+k-1[ES]（前提条件k2+k-[Et][S]

k2+k-

[Et][S]Km[EtE[ES]（前提条件([E]-[ES[S]

Km[E][S]–[ES][S]=Km[E][S]=[ES][S]+Km[ES]

Km+[ES]

Km+而v=k2[ES]（前提条件因此v

Km+[S]vKm+Vmaxk2[E]（前提条件VmaxvKm+V

零级反VmaxvKm+

米氏常数的意当Km[S]时，Vmax／2。因此，Km等于酶促反VVKm某些酶的Km酶底乳酸脱氢酸己糖激D-葡萄D-果-半乳糖苷D-乳碳酸酐过氧化氢蔗糖蔗3、已知KmKm和Vmax的测vv= =v.1＋v斜率-0[S](mM·L- 6.25×10- 7.5×10- 1.0×10- -1min-1)

1、请根据数据求Km值和2、当[S]=5×10-2mM/L酶浓度对酶促反应速度的影tttVmaxvKm+

Vmax=pH2激活剂对酶促反应速度的影抑制剂对酶促反应速度的影不可逆抑乙酰胆

有机磷杀虫×胆碱酯

乙乙酰胆碱能神经兴奋 可逆抑竞争性抑会，因而降低了酶的。竞争性抑制可用下式表示非竞争性抑抑制剂与底物可以结合在酶的不同部位上，两者非竞争性抑制可用下式表示反竞争性抑总结别构

同工生物体内能够催化相同的化学反应，分子结构却不相同的一组酶，这一类酶往往来自于不同部位。举例：中的乳酸脱氢（乳酸脱氢酶 乳13.50

小时a：葡萄糖50μg/mL，山梨糖醇150μg/mL；b：葡萄糖100μg/mL，山梨糖醇100μg/mL；C：葡萄糖150μg/mL；山梨糖醇50μg/mL）第六节、酶的分离纯化 测 选 1、选材提取，否则低温-20℃~-80℃保存。2、细胞破碎3、酶的抽4、酶的纯酶的测定与比酶定定义：酶是指酶催化一定化学反应的能力；一般用最适条件下催化某一化学反应的速度来表示，即酶催化的反应速度越快，酶越高，反之则表示该酶低。人们往往以酶的催化能力（即酶）来衡量酶，酶单 问题：某1mg酶制剂在最适条件下，5min内使30mmol底物转变为产物，问该酶制剂的催化反应速度是多少？假设1mmol/min为一个单位，请问该答案：6mmol/min，6个单位1个酶单位（IU）,是指在最佳条件下1min1μmol1个酶单位（Kat）,是指在最佳条件下1s1mol1Kat=6×107比概念：指每毫克酶制剂蛋白所含的酶单位酶单位数比比是酶制剂纯度的常用指标—比越大，表示酶越问题：0.5mg酶在最佳条件下，5min内使30mmol底物转变为产物，设1个单位为1mmol/min，请问答案：12酶的纯化倍数和回收率计一般来讲，酶制剂每进行一次纯化，比都要上升，纯化倍数=每次比/第一次回收率=每次 /第一次 习题：书上189页第五回顾

组很多辅因子是小分子有机物，其主要组成部分是维生素和辅助因子的基本概★维生所以这么重要，是因为很生素是每一种辅助因子都具有特殊的功能，可以特定地同一种辅助因子可以和多种不同的酶蛋白结合形

I(NAD+)和辅酶氢的载+ 氧化型辅酶 还原型辅酶A辅酶辅酶糖O OCH3-维生素与辅助因子的关维生素