鼠伤寒沙门氏菌、哺乳动物肝微粒体致突变性实验课件_第1页
鼠伤寒沙门氏菌、哺乳动物肝微粒体致突变性实验课件_第2页
鼠伤寒沙门氏菌、哺乳动物肝微粒体致突变性实验课件_第3页
鼠伤寒沙门氏菌、哺乳动物肝微粒体致突变性实验课件_第4页
鼠伤寒沙门氏菌、哺乳动物肝微粒体致突变性实验课件_第5页
已阅读5页，还剩10页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

鼠伤寒沙门氏菌微粒体酶试验Amestest原理鼠伤寒沙门氏菌野生型（原养型）人工方法正向诱变鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型（异养型）诱变物作用回复突变

Ames是检测遗传毒理学的体外试验，检测终点是基因突变通过统计回复突变的菌落数判断受试物质的致突变性高低S-9混合液的制备过程（使需要代谢激活的物质得以活化）25341暴露肝脏，KCL灌注断头处死大鼠、放血、去皮取出肝脏，加入KCL剪碎制成匀浆，9000g离心取上清、分装、冻存深粗糙（rfa）特性2紫外线敏感（UvrB）特性3抗氨苄青霉素（R因子）特性4回变特性鉴定6组氨酸需求特性1菌株特性鉴定自发回变特性51、组氨酸需求特性有细菌生长空白空白组氨酸-生物素赖氨酸空白37℃24h0.1ml菌液顶层底层菌株特性鉴定2、深粗糙（rfa）特性0.1ml菌液顶层普通培养基抑菌环滤纸片（有结晶紫）37℃24h菌株特性鉴定3、紫外线敏感特性普通培养基15W紫外灯33cm，8s37℃，24h菌株特性鉴定5、自然回变特性0.1ml菌液顶层底层37℃，24h菌株特性鉴定6、回变特性鉴定0.1ml菌液0.1ml致突变物0.2-0.5mlS-9顶层底层37℃，24h菌株特性鉴定点试法将顶层培养基倒入底层培养基中，凝固后放入滤纸片，将受试物点在纸片上放入底层，37℃培养48h观察结果掺入法将受试物0.1ml、菌液0.1ml分别加入顶层培养基中，倒入底层培养基中，凝固后37℃培养48h观察结果Ames试验方法及结果评价点样纸片周围长出一圈密集的His+回变菌落者，受试物即为阳性致突变物质。背景菌生长良好受试物每皿回变菌落数增加一倍以上并有剂量-反应关系，试验结果具有重现性即可认为该受试物为诱变阳性。结果与报告1实验结果判断与评价（1）点试法凡在点样纸片周围长出一圈密集的his回变菌落者，该物质具有致突变性，即为阳性；如只出现少数散在菌落，则为阴性。（2）掺入法突变率=诱发回变his菌落数/自发回变his菌落数

确认待测物具有致突变作用，必须具有以下几点：①诱发突变His+菌落数为自发回变His+菌落数的2倍或2倍以上②回变菌落数随剂量增加而增加，并在一定剂量范围内剂量效应曲线呈

人人文库> 全部分类> 行业资料 > 医学制药

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论