详细的淋巴细胞的分离、计数教程课件

T淋巴细胞的分离、计数1学习交流PPTT淋巴细胞的分离、计数1学习交流PPT实验目的和要求掌握外周血淋巴细胞分离的方法掌握细胞计数的方法2学习交流PPT实验目的和要求掌握外周血淋巴细胞分离的方法

实验原理

外周血中细胞种类

细胞密度

红细胞和多核白细胞1.090淋巴细胞和单核细胞1.075-1.090血小板1.030-1.035密度梯度离心法：利用一种密度介于1.075-1.092之间而近于等渗的溶液做密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种细胞加以分离。本实验：淋巴细胞3学习交流PPT实验原理外周血中细胞

实验方案抽取外周血分离淋巴细胞细胞计数4学习交流PPT实验方案抽取外周血分离淋巴细

实验材料1.

肝素抗凝血2.

Hank’s液3.

淋巴细胞分离液4.水平离心机5.显微镜6.细胞计数板5学习交流PPT实验材料1.肝素抗凝血5实验步骤肝素抗凝静脉血1.5ml加1.5mlHank’s液稀释置于2ml淋巴细胞分离液上(交界液面：一定不要打乱)稀释后的抗凝血淋巴细胞分离液6学习交流PPT实验步骤肝素抗凝静脉血1.5ml加1.5mlHank’s液稀用Hank’s液洗、离心(1000rpm，5min)重复2次血浆分层液红细胞粒细胞离心（2000rpm，25min）淋巴细胞与单核细胞层7学习交流PPT用Hank’s液洗、离心血浆分层液红细胞粒细胞离心（2000用Hank’s液重悬细胞取10ul细胞悬液与90ul白细胞计数液或台盼兰计数液混合取10ul于细胞计数板上

细胞计数8学习交流PPT用Hank’s液重悬细胞取10ul细胞悬液与90ul9学习交流PPT9学习交流PPT细胞计数板

细胞计数数上不数下，数左不数右。10学习交流PPT细胞计数板

细胞计数数上不数下，数左不数右。10学习交流PP

实验结果22个大方格内细胞总数单个核细胞浓度（细胞数/ml)×104×10=(稀释倍数）活细胞百分率=活细胞数细胞总数×100%细胞活力检测：（死细胞被染成蓝色，活细胞不着色）细胞数量：11学习交流PPT实验结果22个大方格内细胞纯度在90%以上淋巴细胞约占90-95%细胞收获率可达80-90%活细胞百分率在95%以上密度梯度离心法分离外周血单个核细胞：12学习交流PPT纯度在90%以上密度梯度离心法分离外周血单个核细胞：12学

注意事项稀释的肝素抗凝血，沿管壁轻轻叠加于分离液上，使两者形成一个清晰地界面。细胞经离心分层后，缓慢小心吸取，切勿打破形成的细胞层。13学习交流PPT注意事项稀释的肝素抗凝血，

细胞计数的仪器血细胞分析仪，临床常用装有自动显微镜观察系统自动细胞计数仪14学习交流PPT细胞计数的仪器血细胞分析仪，临床常Thanks!15学习交流PPTThanks!15学习交流PPTT淋巴细胞的分离、计数16学习交流PPTT淋巴细胞的分离、计数1学习交流PPT实验目的和要求掌握外周血淋巴细胞分离的方法掌握细胞计数的方法17学习交流PPT实验目的和要求掌握外周血淋巴细胞分离的方法

实验原理

外周血中细胞种类

细胞密度

红细胞和多核白细胞1.090淋巴细胞和单核细胞1.075-1.090血小板1.030-1.035密度梯度离心法：利用一种密度介于1.075-1.092之间而近于等渗的溶液做密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种细胞加以分离。本实验：淋巴细胞18学习交流PPT实验原理外周血中细胞

实验方案抽取外周血分离淋巴细胞细胞计数19学习交流PPT实验方案抽取外周血分离淋巴细

实验材料1.

肝素抗凝血2.

Hank’s液3.

淋巴细胞分离液4.水平离心机5.显微镜6.细胞计数板20学习交流PPT实验材料1.肝素抗凝血5实验步骤肝素抗凝静脉血1.5ml加1.5mlHank’s液稀释置于2ml淋巴细胞分离液上(交界液面：一定不要打乱)稀释后的抗凝血淋巴细胞分离液21学习交流PPT实验步骤肝素抗凝静脉血1.5ml加1.5mlHank’s液稀用Hank’s液洗、离心(1000rpm，5min)重复2次血浆分层液红细胞粒细胞离心（2000rpm，25min）淋巴细胞与单核细胞层22学习交流PPT用Hank’s液洗、离心血浆分层液红细胞粒细胞离心（2000用Hank’s液重悬细胞取10ul细胞悬液与90ul白细胞计数液或台盼兰计数液混合取10ul于细胞计数板上

细胞计数23学习交流PPT用Hank’s液重悬细胞取10ul细胞悬液与90ul24学习交流PPT9学习交流PPT细胞计数板

细胞计数数上不数下，数左不数右。25学习交流PPT细胞计数板

细胞计数数上不数下，数左不数右。10学习交流PP

实验结果22个大方格内细胞总数单个核细胞浓度（细胞数/ml)×104×10=(稀释倍数）活细胞百分率=活细胞数细胞总数×100%细胞活力检测：（死细胞被染成蓝色，活细胞不着色）细胞数量：26学习交流PPT实验结果22个大方格内细胞纯度在90%以上淋巴细胞约占90-95%细胞收获率可达80-90%活细胞百分率在95%以上密度梯度离心法分离外周血单个核细胞：27学习交流PPT纯度在90%以上密度梯度离心法分离外周血单个核细胞：12学

注意事项稀释的肝素抗凝血，沿管壁轻轻叠加于分离液上，使两者形成一个清晰地界面。细胞经离心分层后，缓慢小心吸取，切勿打破形成的细胞层。28学习交流