病毒感染的检查防治

病毒感染的检查方法

与防治原则

第1页，共23页。

第一节病毒感染的检查一、标本的采集与送检

用于分离培养的标本：a、采集急性期标本b、采集感染部位标本c、冷藏

血清学诊断的标本：急性期和恢复期双份血清，-20℃保存第2页，共23页。二、病毒的分离培养与鉴定

（一）病毒的分离培养1.最常用细胞培养2.鸡胚接种：主要用于流感病毒的分离3.动物接种少用：主要用于狂犬病病毒、乙型脑炎病毒的分离第3页，共23页。第4页，共23页。常用的细胞培养第5页，共23页。（二）病毒在细胞内增殖的指标1.细胞变化CPE、多核巨细胞、包涵体2.红细胞吸附3.干扰现象4.细胞代谢改变第6页，共23页。第7页，共23页。病毒在细胞内增殖的指标正常细胞病变细胞①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落1细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)第8页，共23页。麻疹病毒感染细胞呼吸道合胞病毒感染细胞②形成多核巨细胞或称融合细胞第9页，共23页。③形成包涵体(inclusionbody)第10页，共23页。（三）病毒数量和感染性测定1、蚀斑试验2、ID50或TCID50病毒感染鸡胚、动物或细胞后，引起50%发生死亡或病变的最小量。病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称蚀斑，蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的，称蚀斑形成单位，病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位PFU来表示。第11页，共23页。三、病毒感染的血清学诊断四、病毒的快速诊断（一）形态学检查（二）检测病毒抗原抗体测病毒感染脱落细胞或分泌物细胞中的抗原（三）检测病毒抗体已知抗原测血清中抗体测IgM，或动态测IgG（双份血清）（四）检测病毒核酸PCR试验引物核酸杂交试验探针

基因芯片技术第12页，共23页。病毒感染的检查检测内容查病毒查特异性抗体

病毒颗粒病毒抗原病毒核酸病毒酶类：如逆转录酶

电镜直接观察光镜检查包含体分离培养第13页，共23页。.第二节病毒感染的特异性预防第14页，共23页。灭活疫苗（inactivatedvaccine）活疫苗（livingvaccine）重组载体疫苗（recombinantcarriervaccine）亚单位疫苗（subunitvaccine）化学提取或人工合成疫苗重组疫苗（recombinantvaccine）核酸疫苗（nucleicacidvaccine）一、人工主动免疫常用生物制品第15页，共23页。二、人工被动免疫常用生物制品

免疫球蛋白

血清丙种球蛋白

细胞免疫制剂

IFN-α、β、γ细胞因子IL-2、IL-6、IL-12TNF、CSF

淋巴因子激活的杀伤细胞——LAK细胞

第16页，共23页。人工被动免疫（artificialpassiveimmunization）如：1.血清免疫球蛋白用于甲肝、麻疹、脊髓灰质炎预防2.高效价含乙肝病毒表面抗体的免疫球蛋白用于预防母婴乙肝传播第17页，共23页。策略：阻断病毒复制周期中吸附穿入、

脱壳、核酸复制、或装配释放任一环节，从而抑制病毒复制要求：抗病毒药物能穿入细胞选择性地抑制病毒复制又不损伤宿主细胞第三节病毒感染的治疗第18页，共23页。

核苷类药物非核苷类反转录酶抑制剂蛋白酶抑制剂其他抗病毒药物

干扰素和干扰素诱生剂

中草药

基因治疗剂

治疗性疫苗

抗病毒化学制剂反义寡核苷酸干扰RNA核酶（ribozyme）

第19页，共23页。一、药物治疗1.核苷类药物

2.病毒蛋白酶抑制剂3.天然药物如中药二、基因治疗1.反义寡核苷酸2.核酶3.干扰RNA三、免疫治疗

1.中和抗体（单抗）2.治疗性疫苗3.干扰素第20页，共23页。一、药物治疗

（一）核苷类药物1.抑制病毒基因复制碘尿苷(疱疹净)用异常嘧啶取代胸腺嘧啶,眼疱疹病毒感染。也可渗入细胞DNA,故有毒性。

无环鸟苷(啊昔洛韦)，竞争病毒复制酶。2.抑制病毒基因转录：病毒唑

（二）蛋白酶抑制剂“鸡尾酒”治疗HIV，3TC加蛋白酶抑制物

（三）天然药物：黄芪、板蓝根、大青叶第21页，共23页。

二、基因治疗

1.反义寡核苷酸、反义寡核脱氧核酸(反义RNA、反义DNA)与病毒DNARNA关键基因互补

2.核酶：病毒RNA结合,切割降解靶RNA

3.感染RNA

三、免疫治疗1.中和抗体（单抗）2.治疗性疫苗3.干扰素第22页，共23页。内容梗概病毒感染的检查方法

与防治原则。3.动物接种少用：主要用于狂犬病病毒、乙型脑炎病毒的分离。CPE、多核巨细胞、包涵体。①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落。1细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)。2、ID50或TCID50。病毒感染鸡胚、动物或细胞后，引起50%发生死亡或病变的最小量。病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称蚀斑，蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的，称蚀斑形成单位，病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位PFU来表示。抗体测病毒感染脱落细胞或分泌物细胞中的抗原。（三）检测病毒抗体已知抗原测血清中抗体测IgM，或动态测IgG（双份血清）。PCR试验引物。核酸杂交试验探针。重组载体疫苗（recombinantcarriervaccine）。核酸疫苗（nucleicac