分光光度计使用原理及操作方法_第1页
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1/1/3分光光度法原理：光是一种电磁波拥有必定的波长和频次。可见光的波长范围在 400-760nm，紫外光为200-400nm，红外光为760-5000nm。可见光因波长不一样体现不一样颜色，这些波长在必定范围内体现不一样颜色的光称单色光。利用棱镜可将白光分红按波长次序摆列的各样单色光，即红、橙、黄、能量。物质汲取由光源发出的某些波长的光可形成汲取光谱，因为物质的分子构造不一样，对光的汲取能力不一样，所以每种物质都有特定的汲取光谱，并且在必定条件下其汲取程度与该物质的浓度成正比，分光光度法就是利用物质的这类汲取特点对不一样物质进行定性或定量剖析的方法。在比色剖析中，有色物质溶液颜色的深度决定于入射光的强度、有色物质溶液的浓度及液层的厚度。当一束单色光照耀溶液时，入射光强度愈强，溶液浓度愈大，液层厚度愈厚，溶液对光的汲取愈多，它们之间的关系，切合物质对光汲取的定量定律，即朗伯比尔（朗伯比尔定律：物理意义：当一束平行单色光垂直经过某一平均非散射的吸光物质时与其吸光度A光物质的浓度cb成正比。数学表达式：A=lg(1/T)=KbcA2/2/3T——透射比，是透射光强度比上入射光强度；K——为摩尔汲取系数，它与汲取物质的性质及入射光的波长 λ相关；C——吸光物质的浓度；B使用方法：721可见分光光度计其波长范围360～800nm，色散元件为三角棱形.检查仪器各调理钮的开端地点能否正确，接通电源开关，翻开样品室暗箱0位”，预热20min0电”位器调整电表为T=0％。盖上样品室盖使光电管受光，推进试样架拉手，使参比溶液池（溶液装入4／5高度，置第一格）置于光路上，调理＝100％。

100％透射比调理器，使电表指针指 T重复进行翻开样品室盖，调0，盖上样品室盖，调T为器稳固。光度值。读数后应立刻翻开样品室盖。丈量完成，拿出比色皿，洗净后倒置于滤纸上晾干。各旋钮置于本来放大器各档的敏捷度为：“样

1”倍；“1020，敏捷度挨次增大。因为单色光波长不一时，光能量不一样，需选不一样的敏捷度档。选择原则是在能使参比溶液调到T＝1000和”“100。”注意事项：3/3/31、该仪器应放在干燥的房间内，使用时搁置在坚固安稳的工作台上，室内照明不宜太强。热时节不可以用风扇直接向仪器吹风，防备灯泡灯丝发亮不稳固。2、使用本仪器前，使用者应当第一认识本仪器的构造和工作原理，以及各个操控旋钮之功能。在未按通电源以前，应当对仪器的安全性能进行检查，电源接线应坚固，通电也要优秀，各个调理旋钮的开端地点应当正确，而后再按通电源开关。测定方法：选参比测定试样溶液的吸光度，需先用参比溶液调理透光度为 100%（吸光度为0），以除去其余成分及吸光池和溶剂等对光的反射和汲取带来的测定偏差。选方法：单组分和多组分（1）单组分是指样品溶液中含有一种组分，或许是在混淆物溶液中待测汲取系数法等。校准曲线法（常用）：配制一系列不一样含量的标准溶液，采用适合的参比，在同样的条件下，测定系列标准溶液的吸光度，作A-c曲

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