2023学年北京市海淀区重点中学高三第六次模拟考试生物试卷含答案解析

2023学年高考生物模拟测试卷注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．2020年春节期间，“新冠肺炎”疫情导致全国性的居家隔离，引发该病的新型冠状病毒是一种外层有冠状刺突蛋白的RNA病毒｡下列关于该冠状病毒的叙述，正确的是（）A．降低了活性的新型冠状病毒的RNA可以作为疫苗B．该病毒可能在血浆中自我复制，因此具有极强的传染性C．该病毒侵入人体后，能激发人体的细胞免疫和体液免疫D．该病毒的遗传物质彻底水解可得到A､C､T､G四种碱基2．下图是某研究小组模拟赫尔希和蔡斯进行噬菌体侵染细菌的部分实验过程。下列叙述正确的是（）A．第一步使用的是32P标记的T2噬菌体B．第二步是将被标记的噬菌体与未标记的细菌混合C．上清液中较高的放射性来自新形成的子代噬菌体D．赫尔希和蔡斯的实验能证明DNA是细菌的遗传物质3．质子泵在泵出H+时造成膜两侧的质子浓度差为阴离子的跨膜运输提供了驱动力。下图为某植物根细胞通过质子泵吸收H2PO4-和NO3-的示意图，下列说法正确的是（）A．运输H2PO4-和NO3-的载体蛋白的空间结构相同B．抑制细胞呼吸不会影响H2PO4-和NO3-的跨膜运输C．质子泵同时具有酶的功能和载体蛋白的功能D．图中离子的运输方式和根细胞吸收水的方式相同4．果蝇的红眼和朱砂眼是由等位基因D和d控制的一对相对性状。该性状存在纯合致死现象（若隐性纯合致死，则基因型为dd、XdXd、XdY的个体死亡；若显性纯合致死，则基因型为DD、XDXD、XDY的个体死亡）。实验调査发现雌果蝇中基因型和表现型均为两种，雄果蝇只有一种表现型。下列叙述错误的是（）A．基因D和d位于X染色体上B．该性状表现为显性纯合致死C．若亲代雌果蝇中两种基因型的个体各有2000只，随机选取多对雌雄果蝇杂交，F2雌果蝇中两种基因型的比例为1∶8D．若不考虑其他因素的影响，杂交过程中等位基因D和d的基因频率不断发生变化5．下列关于人类遗传病及优生的叙述，错误的是（）A．各种遗传病在青春期的患病率很低B．葛莱弗德氏综合征可以通过其染色体核型进行诊断C．通过检查发现胎儿有缺陷，可诊断该胎儿患有遗传病D．羊膜腔穿刺技术可确诊神经管缺陷、某些遗传性代谢疾病6．2018年1月美国学术期刊《免疫》报道，记忆T细胞会储存在脂肪组织中。下图是研究人员进行的有关实验，下列叙述错误的是A．在抗原刺激下，小鼠T细胞增殖分化形成记忆T细胞和效应T细胞B．接受脂肪组织移植前的实验鼠B不应接种相应的病原体C．实验鼠B不患病可能与移植的脂肪组织有关D．该实验足以证明脂肪组织中有记忆T细胞二、综合题：本大题共4小题7．（9分）玉米是全球最重要的农作物之一，寒冷条件下其产量降低，科研人员推测这可能与植物体内的一种酶（RuBisco）的含量有关。为探究其含量与低温（14℃）胁迫下玉米产量的关系，科研人员利用转基因玉米进行了一系列实验。（1）首先获得目的基因RAP1（编码RuBisco大小亚基组装的分子伴侣）和LSSS（编码RuBisco的大小亚基），再利用____________酶将目的基因分别与____________结合，并用________法导入普通玉米中，获得转基因玉米。（2）在实验中（如图），图1应使用_______玉米，与转基因玉米（图2、3、4）一起在25℃的温度下生长了三周，然后将温度降低到___________生长两周，然后又升高到25℃。（3）描述上图所示实验结果：______________；为使实验严谨，应补充一组对照，具体处理是：_______________。（4）此外科研人员还对株高、干重及叶面积进行了测定，实验结果表明RuBisco可能是通过影响叶面积的大小来影响光合作用强度进而影响产量的。为进一步验证上述结论还需要______________。8．（10分）下图是有关甲病（显隐性基因分别用A、a表示）和乙病（显隐性基因分别用B、b表示）的某家庭遗传系谱图，其中部分人员的基因检测结果如下表所示，四种条带各代表基因A、a、B、b中的一种。1号2号5号6号7号8号条带1————————？条带2——————条带3——————————条带4————————请回答下列问题：（1）代表a基因的是条带_______；乙病的遗传方式是________；8号的基因检测结果与7号相同的概率是_______。（2）7号再次怀孕，若B超检查显示是女性，医生建议还需要进一步做两种病的基因检测，理由是___________________________________。（3）调查乙病致病基因在某地的基因频率可直接由_________（填“男性”“女性”或“整个”）群体中的发病率得出。9．（10分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。10．（10分）基因打靶技术是建立在基因同源重组技术以及胚胎干细胞技术的基础上而发展起来的一种分子生物学技术。请结合图示回答下列有关问题：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表达可以使无毒的丙氧鸟苷代谢为毒性物质，导致细胞死亡。（1）将目的基因和与细胞内靶基因同源的DNA片段都重组到__________上，构建打靶载体（基因表达载体）。（2）打靶载体测序验证正确后，利用__________酶，将之线性化，以提高重组率。通过__________技术将打靶载体导入胚胎干细胞，这样打靶载体和与细胞内靶基因同源的区段就有机会发生同源重组。（3）为了筛选发生同源重组的细胞，可在培养液中加入__________。最后还需要通过__________技术鉴定同源重组的细胞（去除靶基因），将这样的细胞通过动物细胞培养后，获得大量打靶成功的细胞。其中，暂时不用的细胞进行__________保存。（4）将打靶成功的细胞注射入小鼠囊胚，移植到同种、__________的母鼠体内，一段时间后对受体母鼠进行妊娠检查，确保其生下嵌合体小鼠。这种嵌合体小鼠长大后，体内同时存在被“修饰”过的基因和未被“修饰”的基因。如果某些小鼠的__________（填“体细胞”或“生殖细胞”）恰巧被“修饰”过了，则它们的杂交后代中，就可能出现基因完全被“修饰”过的小鼠。11．（15分）桃子是很多人喜爱的一种水果，其果肉中含有葡萄糖、有机酸和维生素C等营养成分，对人体很有益。桃子可用来酿造桃子酒、桃子醋，桃叶可用来提取番茄红素。请回答下列有关问题：（1）在自然发酵酿造桃子酒的过程中，酵母菌主要来自_____________。桃子叶肉细胞与酵母菌细胞的生物膜系统组成的主要差异为______________________________。（2）在酿制桃子酒的过程中，装置的通气操作及目的为____________________。酿制桃子酒时，若未对桃子进行严格的消毒处理，则对桃子酒的制作是否有影响？____________________。（3）在醋酸菌发酵过程中，醋酸菌可以利用的底物主要有__________。若在制作桃子酒的基础上继续酿造桃子醋，需要改变的条件主要为__________。（4）从桃叶中提取番茄红素，确定提取方法主要根据__________来决定。

2023学年模拟测试卷参考答案（含详细解析）（含详细解析）一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、C【答案解析】

病毒没有细胞结构，只含有蛋白质和1种核酸；病毒作为非己成分可以激发机体的免疫反应。【题目详解】A、疫苗本身是抗原，一般是病毒的蛋白质外壳，A错误；B、病毒没有独立生存的能力，所以只能在细胞内依赖于宿主细胞的营养物质进行复制，B错误；C、该病毒侵入人体后，能激发人体的细胞免疫和体液免疫，C正确；D、该病毒是RNA病毒，其核酸彻底水解获得A、U、C、G四种碱基，D错误。故选C。【答案点睛】本题以“新冠病毒”为题材，考查病毒的知识，需要考生识记病毒的结构、病毒与免疫的知识。2、B【答案解析】

1、噬菌体的结构：蛋白质外壳（C、H、O、N、S）+DNA（C、H、O、N、P）；

2、噬菌体的繁殖过程：吸附→注入（注入噬菌体的DNA）→合成（控制者：噬菌体的DNA；原料：细菌的化学成分）→组装→释放；

3、T2噬菌体侵染细菌的实验步骤：分别用35S或32P标记噬菌体→噬菌体与大肠杆菌混合培养→噬菌体侵染未被标记的细菌→在搅拌器中搅拌，然后离心，检测上清液和沉淀物中的放射性物质。

实验结论：DNA是遗传物质。【题目详解】A、图中放射性主要分布于上清液中，而沉淀物的放射性很低，说明使用的是35S标记的T2噬菌体，A错误B、第二步是将被标记的噬菌体与未标记的细菌混合，B正确；C、上清液的放射性来自亲代噬菌体，C错误；D、噬菌体表现出遗传性状的连续性，该实验的结果只能证明DNA是噬菌体的遗传物质，不能证明DNA是细菌的遗传物质，D错误。故选B。【答案点睛】本题考查DNA是遗传物质的证据的相关知识，旨在考查考生的理解能力和获取信息的能力。3、C【答案解析】

由图可知，质子泵在泵出H+时需要消耗能量，为主动运输，而同时利用膜两侧的质子浓度差为阴离子的跨膜运输提供了驱动力，说明质子泵吸收H2PO4-和NO3-所需要的能量来自膜两侧的质子浓度差，为主动运输的方式。【题目详解】A、运输H2PO4-和NO3-的载体蛋白种类不相同，所以二者的空间结构存在差异，A错误；B、质子泵在泵出H+时需要消耗ATP，而质子泵吸收H2PO4-和NO3-所需要的能量来自膜两侧的质子浓度差，所以抑制细胞呼吸会影响H+运输，使膜两侧的质子浓度差变小，进而影响H2PO4-和NO3-的跨膜运输，B错误；C、质子泵能够水解ATP，具有ATP水解酶的功能，同时也可以运输H+，具有载体蛋白的功能，C正确；D、题图中离子的运输方式为主动运输，而水的运输方式为自由扩散，两种运输方式不同，D错误。故选C。【答案点睛】本题主要考查物质的跨膜运输，意在考查考生能理解题意，判断不同物质的运输方式。4、C【答案解析】

根据雌性有2种表现型，而雄性只有1种表现型可知，控制眼色的基因位于X染色体上；根据雌性有2种表现型可知，致死的基因型为显性纯合子。【题目详解】A、根据雌雄的表现型种类不同可知，基因D和d位于X染色体上，A正确；B、根据雌性有2种表现型可知，该性状表现为显性纯合致死，B正确；C、若亲代雌果蝇中两种基因型的个体各有2000只，即雌性个体中1/2XDXd、1/2XdXd，其产生的配子为1/4XD、3/4Xd，雄性个体XdY产生的配子为1/2Xd、1/2Y，根据棋盘法计算可知，F2雌果蝇中XDXd:XdXd=1:3，C错误；D、由于显性纯合子致死，故杂交过程中等位基因D和d的基因频率不断发生变化，D正确。故选C。5、C【答案解析】

各类遗传病在人体不同发育阶段的发病风险：①一般来说，染色体异常的胎儿50%以上会因自发流产而不出生。②新出生婴儿和儿童容易表现单基因病和多基因病。③各种遗传病在青春期的患病率很低。④成人很少新发染色体病，但成人的单基因病比青春期发病率高。⑤更显著的是多基因遗传病的发病率在中老年群体中随着年龄增加加速上升。【题目详解】A、由分析可知，各种遗传病在青春期的患病率很低，A正确；B、葛莱弗德氏综合征(47，XXY)属于染色体数目异常遗传病，可以通过分析染色体核型进行诊断，B正确；C、胎儿有缺陷，可能只是由环境因素导致的，不一定是遗传病，C错误；D、羊膜腔穿刺是用于确诊胎儿是否有染色体异常、神经管缺陷以及某些能在羊水中反映出来的遗传性代谢疾病，D正确。故选C。【答案点睛】本题考查人类遗传病及优生的相关知识，要求识记人类遗传病的类型，掌握监测和预防人类遗传病的方法，能结合所学的知识准确判断各选项。6、D【答案解析】

据图分析，实验鼠A注射抗原，发生免疫反应，产生的记忆T细胞会储存在脂肪组织中，将脂肪组织移植到实验鼠B中，当其感染病原体时会发生二次免疫反应因而不患病。【题目详解】A、根据细胞免疫可知，在抗原刺激下，小鼠T细胞增殖分化形成记忆T细胞和效应T细胞，A正确；B、为了排除自身记忆细胞的影响，接受脂肪组织移植前的实验鼠B不应接种相应的病原体，B正确；C、实验鼠B不患病可能与移植的脂肪组织中含有记忆T细胞有关，发挥特异性免疫，C正确；D、实验不以证明脂肪组织中有记忆T细胞，还应做相应的对照试验，D错误。故选D。二、综合题：本大题共4小题7、限制酶和DNA连接酶载体（质粒）农杆菌转化法/鸟枪法/花粉管通道法非转基因（野生型）14℃与1和2相比LSSS（3）和LSSS-RAF1（4）组玉米长势较好，且3和4组无明显差异野生型玉米一直在25℃的温度下生长测定各组中RuBisCo酶的含量及成熟时玉米籽粒的干重【答案解析】

根据题干信息和图形分析，该实验探究RuBisco含量与低温（14℃）胁迫下玉米产量的关系，实验的自变量有温度、玉米的种类，因变量是玉米的长势。图中显示2、3、4是不同的转基因玉米，则1组应该是非转基因玉米，作为对照组；长势较好的是3、4两组。【题目详解】（1）基因工程中，最常用的运载体是质粒，将目的基因与质粒结合形成重组质粒（基因表达载体）需要用到限制酶和DNA连接酶；将目的基因导入普通玉米常用农杆菌转化法。（2）根据题意分析，2、3、4组玉米都是转基因玉米，则1组应该是作为对照组的非转基因玉米；根据题干信息已知，该实验探究RuBisco含量与低温（14℃）胁迫下玉米产量的关系，因此将四组玉米一起在25℃的温度下生长了三周，然后将温度降低到14℃生长两周，然后又升高到25℃。（3）据图分析可知，与1和2相比，LSSS（3）和LSSS-RAF1（4）组玉米长势较好，且3和4组无明显差异。为使实验严谨，应设置一组不经过低温处理的对照组，具体处理是野生型玉米一直在25℃的温度下生长。（4）实验结果表明RuBisco可能是通过影响叶面积的大小来影响光合作用强度进而影响产量的，为进一步验证该结论还需要测定各组种RuBisCo酶的含量及成熟时玉米籽粒的干重。【答案点睛】解答本题的关键是掌握基因工程的基本步骤和实验设计的基本原则，能够根据实验目的和图形分析自变量和因变量、实验组和对照组，进而结合题干要求分析答题。8、3伴X染色体隐性遗传2/36号（AaXbY）与7号（AaXBXb）生育的女孩可能患乙病也可能不患乙病，同时可能患甲病也可能不患甲病男性【答案解析】

从系谱图看出，5号是甲病患者，且为女性，其父母均不患甲病，故甲病是常染色体隐性遗传病；且1号、2号均是甲病基因携带者，即基因型为Aa，另据基因检测带谱，1号与2号都含有条带1和条带3，结合5号的基因检测带谱，判断条带1代表A基因、条带3代表a基因；5号同时具有B和b基因，但表现正常，说明乙病是隐性遗传病，2号只有B基因，其儿子即6号不患乙病，进一步说明乙病是伴X染色体隐性遗传病。【题目详解】（1）根据以上分析可知，条带1代表A基因、条带3代表a基因；乙病的遗传方式是伴X染色体隐性遗传病；6号（AaXbY）与7号（AaXBXb）所生的8号表现正常，基因型可能为A_XBXb，因此与7号基因检测结果相同即基因型相同的概率是2/3。（2）6号（AaXbY）与7号（AaXBXb）生育的女孩，甲病与性别无关，可能患甲病也可能不患甲病，就乙病而言，女孩可能患乙病也可能不患乙病，因此还需要进一步做两种病的基因检测。（3）乙病是伴X染色体隐性遗传病，其基因频率等于男性群体中的发病率。【答案点睛】本题考查基因的分离定律和自由组合定律、人类遗传病及其监测和预防等，考查学生的获取信息的能力和理解能力。9、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【答案解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术．此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3、重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定，如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。【题目详解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA连接酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒；大肠杆菌作为受体细胞，需要用氯化钙处理，以便重组质粒的导入。（2）①根据题意和图示分析，经过4次PCR技术后获得了新的基因，这是一种定点的基因突变技术。②与研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），因此4次PCR应该分别选择如图所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根据实验中的对照原则，若要比较新蛋白A的表达效率是否提高，则需设置三组实验实验变量的处理分别为：仅含新蛋白质A的重组质粒，仅含蛋白A的重组质粒和空白对照（仅含空质粒，以排除空质粒可能产生的影响）。因此，将含有新蛋白A基因的重组质粒和含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用抗原——抗体杂交方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。由于蛋白A（或新蛋白A）具有抗菌作用，所以为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较抑菌圈的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，是因为蛋白A基因的发酵产物对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高。【答案点睛】本题主要考查基因工程、PCR技术等相关知识，考生需要理解和记忆相关知识，并学会应用所学知识正确答题。10、载体（或质粒）限制显微注射新霉素和丙氧鸟苷DNA分子杂交液氮（或冷冻）生理状态相同（或经同期发情处理）生殖细胞【答案解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【题目详解】（1）分析题图可知，将目的基因和与细胞内靶基因同源的DNA片段都重组到载体（或质粒）上，构建打靶载体（基因表达载体）。（2）打靶载体测序验证正确后，利用限制酶，将之线性化，以提高重组率。通过显微注射技术导入胚胎干细胞，这样打靶载体与细胞内靶基因同源的区段就有几率发生同源重组。（3）neor是新霉素抗性