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文档简介

实验三、植物细胞悬浮培养与生长量的测定植物细胞悬浮培养技术（Suspensionculture）特点：细胞可以不断增殖，形成高密度的细胞群体，适于大规模培养；能够提供大量较为均匀的细胞，为研究细胞的生长、分化创造方法和条件。必须指出：悬浮培养中既有单细胞，也有小细胞团。概念：是指一种在受到不断摇动的液体培养基里，培养单细胞及小细胞团的组织培养系统。实验目的了解细胞悬浮系建立的全过程，掌握细胞悬浮培养技术及生长量的测定方法。1、起始悬浮液的制备愈伤组织液体培养基摇床振荡悬浮培养质地疏松，细胞分散程度大；质地紧密，细胞分散程度小，不适于悬浮培养转速30～150rpm防细胞破裂（2）培养细胞的生长量测定①鲜重测定采用直接测量法，将悬浮培养的细胞用细胞筛过滤，过滤后用水冲洗，除去培养基，然后离心除去水分。将获得的沉淀细胞称量即为悬浮细胞的鲜重。②干重测定将鲜重测定得到的细胞置于60℃烘箱内烘12～24h（因材料大小、数量多少而定）取出，冷却后立即称量，即为悬浮细胞干重。2、细胞生长曲线在整个培养过程中，细胞数目不断发生变化，呈现出明显的由慢到快，再到慢，最后增长停止的细胞周期。

细胞的生长呈S形曲线滞后期

(lagphase)指数生长期(exponentialphase)直线生长期(linearphase)减慢期(progressivedecelerationphase)静止期(stationaryphase)培养时间培养细胞数目1234512345细胞很少分裂，其时间长短取决于在继代时原种培养细胞所处的生长期和转入细胞数量的多少细胞分裂活跃，细胞数目迅速增加细胞生长和发育最快的时期由于培养基中某些营养物质已经耗尽，或是由于有毒代谢产物的积累，细胞

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