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(生物科技行业浙大生物化学试题浙江大学2001年攻读硕士学位研究生入学考试题考试科目:生物化学,编号555注意:答题必须写在答题纸上,写在试卷或草稿纸上均无效壹是非题1/30酶反应的专壹性取决于其辅助因子的结构肽酰转移酶在蛋白质合成中催化肽键的生成和酯键的水解3E.coli连接酶摧化俩条游离单链DNA分子形成磷酸二酯键通过柠檬酸途径将乙酰辅酶A转移至胞液中,同时可使NADH上的氢传递给NADP生成NADPH亮氨酸的疏水性比缬氨酸强必需氨基酸是指合成蛋白质必不可少的壹些氨基酸脯氨酸是α螺旋破坏者维系蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键DNAG-CDNA11DNA双螺旋的俩条链方向壹定是相反的酶影响其催化反应的平衡酶促反应的米氏常数和催化的底物无关维生素EB1TPP16ATP是体内能量的储存形式糖酵解过程无需氧气的参和磷酸吡哆醛只作为转氨酶的辅酶起作用21DNA复制时,后滞链需多个引物22绝缘子和增强子壹样都属于顺式作用元件23PCR是包括变性,复性和延伸三个步骤的循环反应24Sanger曾俩获诺贝尔奖tRNAAPE14-β氧化反应的逆反应镰刀型贫血症患者血红蛋白和正常人的血红蛋白在氨基酸组成上只有2个残基有差别地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1中国科学家在今年完成了人类基因组11/61Thr2D-核糖3A4GSH5尼克酰胺6丙酮酸三名词解释4/241反密码子2操纵基因3多肽核酸(peptidenucleicacid)4折叠酶5共价调节6HumenGenomeProject四综合题10/401试表述Glu经脱氨基,有氧氧化等途径彻底分解成NH3,CO2,和H2O时的代谢路线,要求用箭头表示所经过的主要中间产物.计算1摩尔Glu共可产生多少摩尔的NH3,CO2,ATP?2以血红蛋白为例说明蛋白质四级结构的含义,比较血红蛋白和肌红蛋白结构和功能的异同请对中心法则加以阐述蛋白质的实验操作步骤浙江大学2002年攻读硕士学位研究生入学考试题考试科目:生物化学,编号570注意:答题必须写在答题纸上,写在试卷或草稿纸上均无效壹是非题1/20所谓肽单位就是指组成蛋白质的氨基酸残基速度4Sanger反应(二硝基氟苯法)用以鉴定多肽链羧基末端氨基酸,而Edman反应(苯异硫氰酸酯法)则用以鉴定多肽链氨基末端氨基酸.和胆固醇的化学结构最相近的维生素是维生素B12.,RNA生长激素释放抑制因子是壹个14B1TPP地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1cAMP呼吸链电子载体是按照其标准势能逐步下降而氧化仍原电势逐步增加的方向排列的12CO对氧化磷酸化的影响主要是抑制ATP的形成过程,但不抑制电子传递过程利用酮体作为燃料分子供能紫外辐射引起的DNARNARNA对蛋白质进行糖基化修饰真核生物中同壹转录单位能够通过不同的拼接而产生不同的蛋白质合成模板二用化学结构式完成下列酶促反应4/201异柠檬酸裂解酶2丙酮酸羧化酶3磷酸戊糖异构酶4烯脂酰辅酶A水化酶5丙氨酰tRNA合成酶三综合题10/60对αα;SDSSDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁PH如果希望反应初速度达到其最大速度的90%DNAE.coliDNAIIIRNA6Jacob和Monod在上个世纪60年代初提出乳糖操纵子模型,开创了基因表达调节研究的新领域,具有划时代意义.请你试述乳糖操纵子理论.浙江大学2003年攻读硕士学位研究生入学考试题考试科目:生物化学注意:答题必须写在答题纸上,写在试卷或草稿纸上均无效壹是非题1/20ATP4FMN和FAD的组成中有核黄素.()5在细菌的复制中起主要作用的是DNA聚合酶I()6DNA变性后其粘度增大()7乙醛酸循环在所有的高等植物中都存在.()8EMP途径本身只产生仍原剂,而不产生高能中间产物.()和胆固醇的化学结构最相近的维生素是维生素B12.()11CoQ只能作为电子传递的中间载体.()12DNA双螺旋结构的稳定性主要来自碱基对之间的氢键()13组成蛋白质的所有氨基酸中,由于含有的α-碳原子属于不对称碳原子,因此都具有旋光性.()14mRNA的3`端polyA结构是由DNA的非编码区转录的.()乙酰辅酶ATCA17E.coliRNA聚合酶的σ亚基和转录的终止识别有关.().()Vmax是能够达到的()二写出下列物质的结构式2/101Ser2U3草酰乙酸4ATP5D-glucose三写出下列酶催化的生化反应式(不要求写结构式)3/301磷酸果糖激酶2磷酸甘油变位酶3丙酮酸脱氢酶系4顺乌头酸酶5异柠檬酸裂解酶6脂酰辅酶A脱氢酶7谷丙转氨酶8鸟氨酸转氨甲酰酶9DNA合成酶10氨酰tRNA合成酶四综合题15/90简述SDSpUC18)DNA,请你设计壹个简单的实验4DNA双螺旋模型是哪年由谁提出的?简述其基本内容.为什么说该模型的提出是分子生物学发展史上的里程碑,具有划时代的贡献?2004考试科目:生物化学名词解释50)埃德曼降解抗体诱导契合学说热力学第二定律补救途径荷尔蒙竞争性抑制细胞膜9DNA聚合酶10基因表达问答题:(15)(15)仍有几份数学试卷,可不知道怎么上传压缩文件,如果想要,望告之方法3叙述基因文库和cDNA文库的制作步骤且进行它们的特征比较(20)用图表示说明生物体内三羧酸循环ATP(20)比较说明(30)2004浙江大学分子试题PCR(15)(15)(25))(25)(20)6A,B和C三个基因都决定矮牵牛花的花色,当基因型为A-B-C-时表型为红色,其余为白色.AaBbCc的个体和三种纯系(系1系2和系3)杂交.分别的红色:白花1:3,1:7和1:1的分离比.问:系1和系2杂交,F1基因型和表型如何,F2的基因型和表型如何系3和系2杂交,F1基因型和表型如何,F2的基因型和表型如何(要写出分离比)(25)7什么是染色体重排和基因重排它们在发育中有和作用它们在进化中有和作用(25)06浙江大学分子生物学试卷壹、名词解释:(25%)1DNASouthernBlotting或PCR的方法进行检测。2、SSR:简章序列重复多态性,引物是根据微卫星DNA重复序列俩翼的特定短序列设计,用来扩增重复序列本身。由于重复的长度变化极大,所以是检测多态性的壹种有效方法。其特点包括:壹般检测到的是壹个单壹的多等位基因位点,共显性遗传,故可鉴别杂合子和纯合子;得到的结果重复性很高。3、EST:表达序列标签,是指从不同的组织构建的cDNA文库中,随机挑选不同的克隆,进行克隆的部分测序所产生的cDNA大规模地产生EST,结合生物信息学的手段,将为人们提供壹种快速有效的发现新基因的方法。4、STS:序列标签位点,是由特定引物序列所界定的壹类标记的统称,短的在基因组上是能够被唯壹操作的序列,因而能够确定在物理图谱上的特定位置。5、CAP:CAP即分解代谢物基因活化蛋白是壹种激活蛋白,因为细菌的许多启动子为弱启动子,本身和RNA聚合酶的作用较弱,在有CAP蛋白这类激活蛋白存在下,可使RNA聚合酶和启动子的亲和力增强,CAP蛋白的活性强烈依赖cAMP。6AFLP:扩增片段长度多态性,其特点是把RFLP和PCR结合了起来。其基本步骤是:把DNAPCR扩增(在所有的限制性片段俩端加上带有特定序列的“接头特异PCR扩增,只有那些和7、SNP:单核苷酸多态性,是壹种较为新型的分子标记,其依据的是壹位点的不同等位基是很有意义的。8、FISH:荧光原位杂交技术,是壹种利用非放射性的荧光信号对原位杂交样本进行检测的来,通过荧光标记的DNA探针和待测样本的DNA进行原位杂交,在荧光显微镜下对荧光基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。9DNA。10、RNAinsituhybridization:RNA原位杂交,是利用cDNA为探针来检测和其互补的mRNA11、单克隆抗体:每个B淋巴细胞有合成壹种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,含遗传基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成该细胞的子孙,即克隆由许多个被激活B细胞的分裂增殖形成多克隆,且合成多种抗体。如果能选出壹个制造壹种专壹抗体的细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆。单克隆细胞将合成壹种决定簇的抗体,称为单克隆抗体。12进行杂交,通过检测杂交信号的强弱进而判断样品中靶分子的数量。由于用该技术能够将极其大量的探针同时固定于支持物上DNA分子或RNA分子进行检测分析,从而解决了传统核酸印迹杂交,技术复杂、自动化程度低、检测目的分子数量少、效二、描述A文库构建原理和方法A)3)文库质量定义。答:cDNA:以mRNA为模板,利用反转录酶合成和mRNA互补的DNA(complementaryDNA,cDNA),再复制成双链cDNA片段,和适当载体连接后转入受菌体,扩增为cDNA文库(cDNAlibrary),然后再采用适当方法从cDNA文库种筛选出目的cDNA。和基因组DNA文库类似,由总mRNA制作的cDNA文库包括了细胞全部mRNA信息,自然也含有我们感兴趣的编码cDNA。当前发现的大多数蛋白质的编码基因几乎都是这样分离的。cDNA获得方法:①TotalRNA的提取;②mRNA的分离;③cDNA双链合成:SupersciptII—RTcDNA末端补平,cDNAXhoI。的提取,的双酶切消化,载体去磷A双链和载体的连接:连接,检测R方法电转化感受态细胞的制备,连接产物纯化,电转化;④快速鉴定、菌落PCR文库质量定义:评价壹个文库是否有实用价值主要在于文库的含量和插入片段的大小俩cDNA中的每壹个序1.7×105,同时为cDNA1kb。1)化学诱变)物理诱变A)()()碱基修复概念变在自然界普遍存在。基因突变的方式很多,主要有1)化学诱变,基因突变能够由某些化学物质所引起,这些化学物质称为化学诱变剂。现已知很多的化学诱变剂,它们诱变的机制是不同的。在DNA物理诱变,利用物理因素引起基因突变的称物理诱变,如X射线、紫外线、电离辐射等物理因素可造成插入,改变读码或变成假基因(4)移码突变:基因中插入或者缺失壹个或几个碱基对,会使DNA的阅读框架(读码框)发生改变,导致插入或缺失部位之像吖啶类染料分子能插入DNA分子,使DNA复制时发生差错,导致移码突变(5)无意(6)损伤的修复系统主要有以下几个:①损伤碱基的直接修复;②切除修复,包括碱基切除修复、核苷酸切除修复和DNA交链的切除修复;③错配修复;④重组修复,又称复制后修复;⑤跨损伤DNA合成,这是壹种利用损伤核苷酸为模板,通过DNA聚合酶I使碱基掺入到复制终止处进行DNA合成,从而延长DNA链的修复。基因突变的特点为:第壹,基因突变在生物界中是普遍存在的。第二,基因突变是随机发生的。第三,在自然状态下,对壹种生物来说,基因突变的频率是很低的。第四,大多数基因突变对生物体是有害的,由于任何壹种生物都是长期进化过程的产物,它们和环境条件已经取得了高度的协调。第五,基因突变是不定向的。四、阐述壹条反向遗传克隆功能基因的途径(25%)答:反向遗传学是相对于经典遗传学而言的。经典遗传学是从生物的性状、表型到遗传物质来研究生命的发生和发展规律。反向遗传学则是在获得生物体基因组全部序列的基础上,通

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