细胞膜的渗透性课件

实验三、细胞膜的渗透性一、实验目的了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细胞的速度。二、实验原理与人工脂双层膜不同的是，生物膜不但允许水和非极性分子借简单的物理扩散作用透过，还允许各种极性分子，如离子、糖、氨基酸、核苷酸及很多细胞代谢产物通过特有的机制通过。血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。

将红细胞放置在各种溶液中，渗入红细胞的溶质能提高红细胞渗透压，使水进入红细胞，引起溶血及细胞膜破裂。由于溶质透入速度不同，溶血时间也不同。因此，可通过溶血现象来测量各种物质通透性的差别。三、材料、试剂和仪器

1．材料一龄鸡，将鸡血溶于含有抗凝剂的等渗液中（肝素钠0.2mg/mL,一般范围在0.01-0.2mg/mL；等渗液为0.15mol/LNaCl）

2.试剂0.17mol／L氯化钠，0.17mol／L氯化铵，0.17mol／L硝酸钠，0.32mol／L葡萄糖，0.32mol／L甘油，0.32mol／L乙醇，0.32mol／L丙醇；0.12mol／L硫酸钠，0.10mol／L草酸钠，0.10mol／L醋酸钠，

3.器材试管，1mL移液枪，载玻片，盖玻片，光学显微镜等。（二）血细胞血细胞分为三类：红细胞、白细胞、血小板。

1、红细胞呈双面凹陷的圆盘状，直径约为7.5微米，没有细胞核，细胞质内没有细胞器而有大量血红蛋白。血液的颜色就是由血红蛋白决定的。血红蛋白具有与氧和二氧化碳结合的能力。2、白细胞在血液中呈球形，能以变形运动穿过毛细血管壁进入周围组织中。根据细胞质中是否含有特殊颗粒，可把白细胞分为粒细胞和无粒细胞。无粒细胞分为两种，淋巴细胞和单核细胞。粒细胞分为中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞。3、血小板也称血栓细胞，在流动的血液中呈双面凸的圆盘状，侧面看呈梭形，直径2-4微米。血小板的功能是参与止血与凝血。红细胞压积：又称血细胞比容，指的是血细胞在血液中所占的容积百分比。正常成年男性为40%～50%，女性37%～48%，它反映了血液中红细胞和血浆的相对数量变化。血清：血液经自然凝固1～2小时，血凝块回缩，析出淡黄色透明液体即血清。两个概念肝素的作用机理肝素在体内、体外均有强大抗凝作用。与其带大量负电荷有关，可使多种凝血因子灭活。这一作用依赖于抗凝血酶III（antithrombin

III，AT

III）。At

III是凝血酶及因子Ⅻα、Ⅺα、Ⅸα、Ⅹα等含丝氨酸的蛋白酶的抑制剂。肝素与At

Ⅲ所含的赖氨酸结合后引起AT

Ⅲ构象改变，使At

Ⅲ所含的精氨酸残基更易与凝血酶的丝氨酸残基结合，形成At

III凝血酶复合物而使酶灭活，肝素可加速这一反应达千倍以上。2．溶血现象观察：取试管一支加入3mL蒸馏水，加入1滴或2滴稀释的鸡血，轻混一下，然后静止注意观察溶液的颜色变化。由于红细胞发生破裂，溶液颜色由浑浊的红色逐渐清亮。此即为溶血现象。3、溶血前后的镜检观察在溶血前、后分别取一滴血细胞，滴于载玻片上，并盖上盖玻片，光镜下观察血细胞的形态差异。4．鸡红细胞的渗透性记时比较（1）分别取3只试管，各加入3ml的0.17mol／L氯化钠，0.17mol／L氯化铵，0.17mol／L硝酸钠，加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。（2）分别取4只试管，各加入3ml的0.32mol／L葡萄糖，0.32mol／L甘油，0.32mol／L乙醇，0.32mol／L丙醇；加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。4．鸡红细胞的渗透性记时比较（3）分别取3只试管，各加入3ml的0.12mol／L硫酸钠，0.10mol／L草酸钠，0.10mol／L醋酸钠，加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。（4）在反应前、后分别取1-2滴血细胞，滴于载玻片上，并盖上盖玻片，光镜下观察血细胞的形态差异。五、结果与分析将观察到的现象记录，并进行分析

试管编号溶液种类是否溶血溶血所需时间结果分析1234……10渗透压（osmoticpressure）用符号π表示，单位：atmπ的大小可用渗透计测定，或用渗透平衡时高出水面的溶液对下部产生的静水压力表示（h×s×比重=体积×比重）。也可用VantHoff提出的公式计算：

π=icRT或π=n/VRT

c=溶液的摩尔浓度；i=等渗系数

π是溶液的渗透压（kPa），V是溶液的体积（