纳豆激酶品种介绍课件

纳豆激酶纳豆激酶1、纳豆激酶简介纳豆激酶是第二代溶栓剂,是纤溶酶中的一种纳豆激酶是在纳豆发酵过程中由纳豆菌(Bacillusnato)或纳豆枯草杆菌(Bacillussubtilisnatto)产生的丝氨酸蛋白酶,它可分泌到细胞外。纳豆激酶具有很强的纤溶活性,它不但能直接作用于纤维蛋白,而且还能激活体内纤溶酶原,从而增加内源性纤溶酶的量与作用,因此表现出较强的溶血栓作用。、纳豆激酶简介2、纳豆激酶理化性质纳豆激酶为一单链多肽,由275个氨基酸残基组成氨基酸序列中含有8个赖氨酸残基,不含半肤氨酸残基。与其它枯草杆菌蛋白酶具有极高的同源性,与枯草杆菌BPN的同源性86%,与枯草杆菌蛋白酶DY和枯草杆菌蛋白酶Carlsberg也分别有70%和72%的同源性。理论分子量为27728Da。在实际测定中,测得的分子量结果却因方法的不同而不同。提纯的纳豆激酶为白色粉末,无臭味。、纳豆激酶理化性质3、纳豆激酶功效作用2.1溶解血栓纳豆激酶可直接分解血栓,每克湿纳豆溶栓效果相当于尿激酶1600IU尿激酶只能注射,纳豆激酶即可注射也可口服,而且可以在毛细血管中发挥作用2.2防止骨疏松纳豆中包含大豆异黄酮和维生素K2。大豆异黄酮能防止骨中钙的溶解,而维生素K2则能够将钙固定于骨中。大豆异黄酮和维生素K的组合能相互协力,起到强骨的作用。2.3抗菌作用纳豆菌对抑制0-157同类的0-11130-144病原性大肠杆菌以及其它病原菌诸如,金黄色葡萄球菌、沙门氏杆菌、李斯特菌等同样有抑制作用。抗菌机理在于纳豆菌能够产生杀菌物质吡啶二羧酸■2.4调节肠胃、润肠通便、排毒养颜纳豆菌所产生的吡啶二羧酸,有效杀灭、抑制肠道内的有害菌和病毒使肠内菌群达到一个有利健康的动态平衡,迅速解决便秘、肠炎、腹泻问题,还你一个健康的肠道、纳豆激酶功效作用42、纳豆激酶功效作用■2.5明显改善女性更年期综合症妇女更年期症状和绝经后妇女易发的骨质疏松,主要是由于体內雌激素水平下降造成的。大豆类黄酮可以补充体内雌激素不足,不但可以明显改善更年期症状,而且可以防治女性骨质疏松。再考虑到纳豆排毒养颜和减肥作用,纳豆对女性来说是非常■2.6缓型减肥直观降低餐后血糖纳豆菌在肠内大约能坚持1周左右,可以促进其它有益菌增殖。人体吸收的营养就成为肠內细菌的饵食而被吞噬,再加上纳豆激酶可燃烧脂肪,由此就能减肥。还有纳豆粘物质发挥了浸溶、包裹的作用。因而纳豆减肥是缓型有效的,不会反弹。然而餐后血糖值岀现明显下降趋势,是非常直观的。一是纳豆菌吞噬葡萄糖和粘物质的作用,二是纳豆中的高弹性蛋白酶(或称腴肽酾,Elastase),抑制了血糖增加。它有与猪胰脏所含的这种酶的作用,而猪胰腺的弹性蛋白酶已用于高血糖的治疗药物2.7解酒、保护肝脏纳豆酶进入人体后,通过三重渠道构建酒精防护屏障,促进解酒。此外,纳豆中的多种活性物质活化肝细胞,促进肝细胞再生,提高肝功能,保护肝脏,有效预防改善脂肪肝2.8预防高血压纳豆菌食品中含有angiotensinconvertingenzyne(ACE)的inhibitor,它会阻止angiotensin变成activeform。目前对纳豆激酶功效作用的研究热点为溶栓作用2、纳豆激酶功效作用5纳豆激酶溶栓特点3.1溶栓剂研究介绍目前预防和治疗血栓性疾病的方式主要有三种:是针对某些有高凝状态的患者用药物预防血栓形成;二是对己有血栓形成的患者给予抗凝治疗,以阻止血栓的延伸、扩大、避免栓塞并发症三是采用手术或服用溶栓药物,消除血栓、疏通血管、恢复正常血液流动,减少组织或脏器的损伤。前两者对己形成血栓无法溶解,无法消除病患,属于保守疗法;而手术取栓技术难度和风险较大,费用也高,除了急性栓塞造成严重堵塞外一般慎用,所以目前在治疗诸如肺栓塞、急性心肌梗塞、脑血栓等严重血栓性疾病时,临床多采用溶栓剂。近年来对溶栓剂的研究方兴未艾,取得了长足进步,己发展出三代溶栓剂。纳豆激酶溶栓特点63、纳豆激酶溶栓特点3.溶栓剂研究介绍第一代溶栓剂以尿激酶(UK)和链激酶(SK)为代表,50年代末和60年代初最先应用于临床。其主要特征是溶栓的效果较好,但纤溶特异性差,副作用大,易引发全身纤溶进,并伴有严重出血症状。。后又利用基因工程对SK肽链进行改造得到了基因重组链激酶(Recombinantstreptokinase,tSK),其溶栓能力有所提高。。但rSK仍然是一种非选择性纤维蛋白溶解剂第二代溶栓剂主要有单链尿激酶型纤溶酶原激活剂(singlechainurokinaseplasminogenactivator,Scu-PA)、组织型纤溶酶原激活剂(tissuetypeplasminogenactivator,t-PA),基因重组葡激酶(recombinantsylokinase,rSAK)和以纳豆激酶于临床,共同特征是具有它们虽然在具体溶栓性能上有所差异,但都具有相对选择性降解纤维蛋白的作用,出血副作用较小第三代溶栓剂为提高溶栓剂的特异性,半衰期及溶栓效率,人们应用现代分子生物学技术对第一代和第二代溶栓剂进行改进,得到了各方面效能有较大提高的新型溶栓剂。第三代溶栓剂主要包括突变体、嵌合体及导向体3大类。3、纳豆激酶溶栓特点73、纳豆激酶溶栓特点3.2纳豆激酶溶栓特点虽然第三代溶栓剂具有更优良的应用前景,但目前大多还处于实验室研究阶段,离投入应用还遥未有期;而且由于涉及复杂的技术并依赖基因工程菌进行生产,势必供给有限、价格不菲。纳豆激酶是目前发现的近200种具有口服溶纤作用的物质中最具潜力的溶纤蛋白酶在体外试验中可以看到纳豆激酶与纤维蛋白溶酶原共同作用可以明显的溶解纤维蛋白凝块。在以大鼠为对象的动物实验中,经过静脉注射发现纳豆激酶的纤溶能力是血纤维蛋白溶酶(plasmin)的4倍以上。健康人口服纳豆激酶的实验表明,纳豆激酶可以明显缩短优球蛋白溶解时间、增加血栓溶解面积和血栓分解产物。因此,纳豆激酶不仅可用于静脉注射,还有很好的口服效果。在众多第二代溶栓剂中,纳豆激酶以其来源广泛、价廉易得,溶栓活性高、特异性强、副作用小,可口服,使用方便、安全的优点,得到了国内外研究者的青睐,成为目前溶栓剂研究的热点3、纳豆激酶溶栓特点8、纳豆激酶制备方法1、传统的生产方法纳豆的传统制作方法是将精选黄豆浸泡并蒸熟,然后用稻草包扎起来,维持一定的温湿度,培养1-2天。发酵生成一种能拉成细长丝的粘稠状的物质即为纳豆。然后用生理盐水对纳豆进行浸提,离心提纯制取纳豆激酶传统的生产方法多采用固态发酵的方法生产纳豆激酶,发酵过程中染菌、散热等问题未能得到很好解决,纳豆激酶产率较低,这对纳豆激酶产品的开发及推广造成了一定的障碍。因此人们转而探索液体发酵生产的方法。日本的方法液体培养的最适温度为28.5℃左右,超过32℃几乎不显示活性;最适碳源为麦芽糖。付利等的研究结果显示,发酵后4d酶活性达到最大,最适碳源为木糖,最适氮源是大豆蛋白胨,最适温度为37℃、纳豆激酶制备方法9、纳豆激酶制备方法2、现代生产方法目前研究的纳豆激酶包括液体深层发酵和固体发酵两种来源。无论采用哪种生产方法其大致流程均分为两大步骤:一是纳豆的制备,二是纳豆激酶的分离提纯纳豆的制备纳豆制备工艺流程:大豆→脱皮→浸洗→灭菌→接种→发酵→纳豆。纳豆激酶的提纯纳豆激酶的分离纯化一般以纳豆为原料,用生理盐水浸提二次,合并提取液,用乙醇沉淀以除去粘性物质,然后用盐析、超滤等方法进一步提纯。为了获得单的酶,通常用凝胶过滤或层析分离来纯化3、基因工程的研究国外对纳豆激酶基因的研究仅限于Nakamura等利用鸟枪法得到了NK基因重组到Puc19质粒上,转化到E.colihB101受体菌中,该基因工程菌发酵产物具有胞外蛋白酶活性,但没有检测其溶栓活性单位国内更多的进行纳豆激酶基因表达的报道多限于微生物反应器,相对于微生物反应器来讲,用植物和动物作为生物反应器来表达纳豆激酶蛋白具有更大的优势,更易于产业化,而到现在为止,国内只有一篇分别关于纳豆激酶在植物生物反应器和动物生物反应器中表达的相关报道、纳豆激酶制备方法10纳豆激酶品种介绍课件11纳豆激酶品种介绍课件12纳豆激酶品种介绍课件13纳豆激酶品种介绍课件14纳豆激酶品种介绍课件15纳豆激酶品种介绍课件16纳豆激酶品种介绍课件17纳豆激酶品种介绍课件18纳豆激酶品种介绍课件19纳豆激酶品种介绍课件20纳豆激酶纳豆激酶21、纳豆激酶简介纳豆激酶是第二代溶栓剂,是纤溶酶中的一种纳豆激酶是在纳豆发酵过程中由纳豆菌(Bacillusnato)或纳豆枯草杆菌(Bacillussubtilisnatto)产生的丝氨酸蛋白酶,它可分泌到细胞外。纳豆激酶具有很强的纤溶活性,它不但能直接作用于纤维蛋白,而且还能激活体内纤溶酶原,从而增加内源性纤溶酶的量与作用,因此表现出较强的溶血栓作用。、纳豆激酶简介22、纳豆激酶理化性质纳豆激酶为一单链多肽,由275个氨基酸残基组成氨基酸序列中含有8个赖氨酸残基,不含半肤氨酸残基。与其它枯草杆菌蛋白酶具有极高的同源性,与枯草杆菌BPN的同源性86%,与枯草杆菌蛋白酶DY和枯草杆菌蛋白酶Carlsberg也分别有70%和72%的同源性。理论分子量为27728Da。在实际测定中,测得的分子量结果却因方法的不同而不同。提纯的纳豆激酶为白色粉末,无臭味。、纳豆激酶理化性质23、纳豆激酶功效作用2.1溶解血栓纳豆激酶可直接分解血栓,每克湿纳豆溶栓效果相当于尿激酶1600IU尿激酶只能注射,纳豆激酶即可注射也可口服,而且可以在毛细血管中发挥作用2.2防止骨疏松纳豆中包含大豆异黄酮和维生素K2。大豆异黄酮能防止骨中钙的溶解,而维生素K2则能够将钙固定于骨中。大豆异黄酮和维生素K的组合能相互协力,起到强骨的作用。2.3抗菌作用纳豆菌对抑制0-157同类的0-11130-144病原性大肠杆菌以及其它病原菌诸如,金黄色葡萄球菌、沙门氏杆菌、李斯特菌等同样有抑制作用。抗菌机理在于纳豆菌能够产生杀菌物质吡啶二羧酸■2.4调节肠胃、润肠通便、排毒养颜纳豆菌所产生的吡啶二羧酸,有效杀灭、抑制肠道内的有害菌和病毒使肠内菌群达到一个有利健康的动态平衡,迅速解决便秘、肠炎、腹泻问题,还你一个健康的肠道、纳豆激酶功效作用242、纳豆激酶功效作用■2.5明显改善女性更年期综合症妇女更年期症状和绝经后妇女易发的骨质疏松,主要是由于体內雌激素水平下降造成的。大豆类黄酮可以补充体内雌激素不足,不但可以明显改善更年期症状,而且可以防治女性骨质疏松。再考虑到纳豆排毒养颜和减肥作用,纳豆对女性来说是非常■2.6缓型减肥直观降低餐后血糖纳豆菌在肠内大约能坚持1周左右,可以促进其它有益菌增殖。人体吸收的营养就成为肠內细菌的饵食而被吞噬,再加上纳豆激酶可燃烧脂肪,由此就能减肥。还有纳豆粘物质发挥了浸溶、包裹的作用。因而纳豆减肥是缓型有效的,不会反弹。然而餐后血糖值岀现明显下降趋势,是非常直观的。一是纳豆菌吞噬葡萄糖和粘物质的作用,二是纳豆中的高弹性蛋白酶(或称腴肽酾,Elastase),抑制了血糖增加。它有与猪胰脏所含的这种酶的作用,而猪胰腺的弹性蛋白酶已用于高血糖的治疗药物2.7解酒、保护肝脏纳豆酶进入人体后,通过三重渠道构建酒精防护屏障,促进解酒。此外,纳豆中的多种活性物质活化肝细胞,促进肝细胞再生,提高肝功能,保护肝脏,有效预防改善脂肪肝2.8预防高血压纳豆菌食品中含有angiotensinconvertingenzyne(ACE)的inhibitor,它会阻止angiotensin变成activeform。目前对纳豆激酶功效作用的研究热点为溶栓作用2、纳豆激酶功效作用25纳豆激酶溶栓特点3.1溶栓剂研究介绍目前预防和治疗血栓性疾病的方式主要有三种:是针对某些有高凝状态的患者用药物预防血栓形成;二是对己有血栓形成的患者给予抗凝治疗,以阻止血栓的延伸、扩大、避免栓塞并发症三是采用手术或服用溶栓药物,消除血栓、疏通血管、恢复正常血液流动,减少组织或脏器的损伤。前两者对己形成血栓无法溶解,无法消除病患,属于保守疗法;而手术取栓技术难度和风险较大,费用也高,除了急性栓塞造成严重堵塞外一般慎用,所以目前在治疗诸如肺栓塞、急性心肌梗塞、脑血栓等严重血栓性疾病时,临床多采用溶栓剂。近年来对溶栓剂的研究方兴未艾,取得了长足进步,己发展出三代溶栓剂。纳豆激酶溶栓特点263、纳豆激酶溶栓特点3.溶栓剂研究介绍第一代溶栓剂以尿激酶(UK)和链激酶(SK)为代表,50年代末和60年代初最先应用于临床。其主要特征是溶栓的效果较好,但纤溶特异性差,副作用大,易引发全身纤溶进,并伴有严重出血症状。。后又利用基因工程对SK肽链进行改造得到了基因重组链激酶(Recombinantstreptokinase,tSK),其溶栓能力有所提高。。但rSK仍然是一种非选择性纤维蛋白溶解剂第二代溶栓剂主要有单链尿激酶型纤溶酶原激活剂(singlechainurokinaseplasminogenactivator,Scu-PA)、组织型纤溶酶原激活剂(tissuetypeplasminogenactivator,t-PA),基因重组葡激酶(recombinantsylokinase,rSAK)和以纳豆激酶于临床,共同特征是具有它们虽然在具体溶栓性能上有所差异,但都具有相对选择性降解纤维蛋白的作用,出血副作用较小第三代溶栓剂为提高溶栓剂的特异性,半衰期及溶栓效率,人们应用现代分子生物学技术对第一代和第二代溶栓剂进行改进,得到了各方面效能有较大提高的新型溶栓剂。第三代溶栓剂主要包括突变体、嵌合体及导向体3大类。3、纳豆激酶溶栓特点273、纳豆激酶溶栓特点3.2纳豆激酶溶栓特点虽然第三代溶栓剂具有更优良的应用前景,但目前大多还处于实验室研究阶段,离投入应用还遥未有期;而且由于涉及复杂的技术并依赖基因工程菌进行生产,势必供给有限、价格不菲。纳豆激酶是目前发现的近200种具有口服溶纤作用的物质中最具潜力的溶纤蛋白酶在体外试验中可以看到纳豆激酶与纤维蛋白溶酶原共同作用可以明显的溶解纤维蛋白凝块。在以大鼠为对象的动物实验中,经过静脉注射发现纳豆激酶的纤溶能力是血纤维蛋白溶酶(plasmin)的4倍以上。健康人口服纳豆激酶的实验表明,纳豆激酶可以明显缩短优球蛋白溶解时间、增加血栓溶解面积和血栓分解产物。因此,纳豆激酶不仅可用于静脉注射,还有很好的口服效果。在众多第二代溶栓剂中,纳豆激酶以其来源广泛、价廉易得,溶栓活性高、特异性强、副作用小,可口服,使用方便、安全的优点,得到了国内外研究者的青睐,成为目前溶栓剂研究的热点3、纳豆激酶溶栓特点28、纳豆激酶制备方法1、传统的生产方法纳豆的传统制作方法是将精选黄豆浸泡并蒸熟,然后用稻草包扎起来,维持一定的温湿度,培养1-2天。发酵生成一种能拉成细长丝的粘稠状的物质即为纳豆。然后用生理盐水对纳豆进行浸提,离心提纯制取纳豆激酶传统的生产方法多采用固态发酵的方法生产纳豆激酶,发酵过程中染菌、散热等问题未能得到很好解决,纳豆激酶产率较低,这对纳豆激酶产品的开发及推广造成了一定的障碍。因此人们转而探索液体发酵生产的方法。日